盧　偉，李　暢，耿紅蓮*

(1.中國人民解放軍第161醫(yī)院 檢驗科，湖北 武漢430010；2.第二軍醫(yī)大學長征醫(yī)院 實驗診斷科，上海200003)

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*通訊作者

血清免疫球蛋白及輕鏈定量測定在多發(fā)性骨髓瘤病情監(jiān)測中的應(yīng)用

盧偉1，李暢2，耿紅蓮2*

(1.中國人民解放軍第161醫(yī)院 檢驗科，湖北 武漢430010；2.第二軍醫(yī)大學長征醫(yī)院 實驗診斷科，上海200003)

摘要：目的通過對多發(fā)性骨髓瘤患者血清免疫球蛋白及輕鏈定量測定結(jié)果變化的動態(tài)分析，以評價治療效果。方法對25例IgG-Kappa型多發(fā)性骨髓瘤患者在2008-2014年不同發(fā)展階段中的血清IgG、Kappa定量測定及血清蛋白電泳、免疫固定電泳結(jié)果進行統(tǒng)計，結(jié)合患者不同治療階段的療效，遴選出四個主要時期(初發(fā)、移植前有效、復發(fā)、移植后有效)的結(jié)果并進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果初發(fā)組、復發(fā)組、移植前有效組和移植后有效組的M蛋白平均含量分別為(35.67±8.49)%、(18.08±7.02)%、(8.43±7.94)%、(3.05±2.96)%。25例移植前有效組和8例移植后有效組的M蛋白含量為0的及免疫固定電泳未見IgG、Kappa區(qū)帶的分別都占20%、50%。初發(fā)和復發(fā)組的IgG、Kappa，相比正常對照組升高有統(tǒng)計學意義(P<0.001)，移植前有效組Kappa相比正常對照組升高有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。移植前有效組IgG及移植后有效組IgG、Kappa，相比正常對照組升高無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。移植后有效組IgG、Kappa輕鏈定量結(jié)果相比移植前有效組的更低于其他兩組，療效最佳。結(jié)論血清免疫球蛋白及輕鏈定期的測定為臨床治療多發(fā)性骨髓瘤患者提供可靠的依據(jù)，在患者病情監(jiān)測和療效評價中起到重要的作用。

關(guān)鍵詞：免疫球蛋白；輕鏈；多發(fā)性骨髓瘤；病情監(jiān)測

(ChinJLabDiagn,2016,20:0738)

多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是漿細胞異常增生的惡性腫瘤，并分泌大量的單克隆免疫球蛋白(M蛋白)，臨床表現(xiàn)復雜多樣。其發(fā)病率逐年上升，已占血液系統(tǒng)腫瘤的10%[1]。據(jù)有關(guān)文獻[2]顯示，M蛋白類型中，IgG最為多見。因此本文收集25例IgG-Kappa型MM患者在2008-2014年不同發(fā)展階段中的血清IgG、Kappa定量測定及血清蛋白電泳、免疫固定電泳結(jié)果，結(jié)合臨床資料，進行統(tǒng)計分析，以探討其在患者病情發(fā)展中的重要價值。

1材料與方法

1.1一般資料標本和患者臨床資料來源于上海第二軍醫(yī)大學長征醫(yī)院，對25例IgG-Kappa型MM患者在2008-2014年不同發(fā)展階段中的血清IgG、Kappa定量測定及血清蛋白電泳、免疫固定電泳結(jié)果進行統(tǒng)計，結(jié)合患者不同治療階段的治療效果，遴選出四個主要時期的結(jié)果，其中初發(fā)23例、移植前有效25例、復發(fā)10例、移植后有效8例。25例MM患者中，男13例，女l2例，年齡26-77歲，平均(54.0±10.2)歲。臨床Durie/Salmon分期(以下簡稱DS分期)和臨床ISS(international staging system)分期：DSⅢA、ISSⅢ期8例，DSⅢA、ISSⅡ期12例，DSⅡA、ISSⅠ期1例，DSⅢA、ISSⅠ期1例，DSⅢB、ISSⅢ期2例，DSⅢB、ISSⅡ期1例。嚴格完全緩解(sCR)者1例，完全緩解(CR)者4例，很好的部分緩解(VGPR)者8例，部分緩解(PR)者12例。選擇同時期本院健康體檢者25例，男13例，女12例，年齡27-79歲，平均(55.3±11.4)歲。統(tǒng)計截至時間2014年5月16日。

1.2標本要求空腹抽血，分離血清，避免脂血和溶血。

1.3方法

1.3.1診斷和療效標準患者診斷及分期標準符合文獻中MM診斷及分期標準[3]。療效評價標準參照國際骨髓瘤工作組(international myeloma working group，IMWG)制定的MM療效判定國際統(tǒng)一標準[4]，以達到sCR、CR、VGPR、PR者為有效。

1.3.2儀器和檢測方法血清IgG、Kappa輕鏈定量測定用德靈公司Dade Behring BNII全自動蛋白分析儀及配套試劑，采用速率散射免疫比濁法，正常標準為：血清IgG、Kappa輕鏈正常值分別為8-15 g/L、1.72-3.83 g/L。血清蛋白電泳和免疫固定電泳用Helena公司SPIFE3000全自動電泳儀及配套試劑，血清蛋白電泳采用瓊脂糖電泳，電泳后進行掃描，免疫固定電泳采用瓊脂糖電泳和免疫固定技術(shù)，嚴格按照標準操作規(guī)程進行操作。正常標準為：免疫固定電泳陰性。

2結(jié)果

2.1M蛋白含量通過血清蛋白電泳，初發(fā)組、復發(fā)組、移植前有效組和移植后有效組的M蛋白平均含量分別為(35.67±8.49)%、(18.08±7.02)%、(8.43±7.94)%、(3.05±2.96)%。25例移植前有效組和8例移植后有效組的M蛋白含量為0的及免疫固定電泳未見IgG、Kappa區(qū)帶的分別都占20%、50%。

2.2IgG、Kappa定量結(jié)果與正常對照組相比初發(fā)和復發(fā)組的IgG、Kappa，相比正常對照組升高有統(tǒng)計學意義(P<0.001)，移植前有效組Kappa相比對照組升高有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。移植前有效組IgG及移植后有效組IgG、Kappa，相比對照組升高無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1　IgG、Kappa輕鏈含量(g/L)

注：與對照組比較，*P<0.001，**P<0.05

2.3各組IgG、Kappa輕鏈定量結(jié)果的變化及比較見圖1，移植后有效組IgG、Kappa輕鏈定量結(jié)果相比移植前有效組低，更低于其他兩組。

3討論

免疫球蛋白定量可明確M蛋白所屬免疫球蛋白類別及數(shù)量，也是MM診斷較為敏感的方法[5]。速率散射比濁法定量檢測免疫球蛋白具有速度快、敏感度高、精確度高、穩(wěn)定性好的優(yōu)點。MM患者病程長、病情復雜，定期檢測免疫球蛋白可以直觀地觀察治療期間其結(jié)果的變化，及時為臨床病情監(jiān)測提供可靠的依據(jù)。

在25例IgG-Kappa型MM患者中，初發(fā)組、復發(fā)組、移植前有效組和移植后有效組的M蛋白平均含量相比呈下降趨勢，移植前有效組和移植后有效組的M蛋白含量為0的及免疫固定電泳未見IgG、κ區(qū)帶的分別都占20%、50%。IgG的平均結(jié)果由初發(fā)組的63.93 g/L降到移植后有效組的10.42 g/L，Kappa平均結(jié)果由初發(fā)組的18.42 g/L降到移植后有效組的2.44 g/L。說明患者經(jīng)過有效的治療，血清中M蛋白逐漸消失，免疫固定電泳也會轉(zhuǎn)為陰性。

圖1　各組IgG、Kappa輕鏈定量結(jié)果

從柱形圖上看，MM患者移植前有效組療效是十分明顯的，但移植前有效組Kappa相比正常對照組升高有顯著差異(P<0.05),IgG相比升高無差異(P>0.05)，這可能是MM惡性漿細胞過量分泌M蛋白且發(fā)生組裝障礙，輕鏈合成速度略快于重鏈，游離輕鏈大量增加[6]，總的輕鏈量也就相應(yīng)增加。因此在治療過程中，我們要密切注意各指標的變化，隨時做好變更治療方案的準備。而移植后有效組IgG、Kappa，相比正常對照組升高無差異(P>0.05)，移植后有效組IgG、Kappa輕鏈定量結(jié)果相比移植前有效組低，更低于其他兩組，不難看出移植后患者比未移植患者療效更佳。

MM患者的治療主要以化療為主，針對不同病情，化療方案有PAD、DCEP、VDD、VAD等方法選擇。本文23例MM初發(fā)患者就首選PAD方案治療15例，近期療效達CR2例、VGPR4例、PR6例，總有效率為80%，這與凱英等[7]報道PAD方案治療初發(fā)MM患者31例中近期療效總有效率為74.2%基本一致。通過免疫球蛋白及輕鏈定量的監(jiān)測，初發(fā)患者檢測結(jié)果在逐步下降，證明所選方案有利于患者病情的恢復，達到預(yù)期的療效。但發(fā)現(xiàn)當前治療方案達不到預(yù)期的療效時，就需變更化療方案。本文有5例初發(fā)患者有效治療后免疫固定電泳轉(zhuǎn)為陰性，其中就有1例經(jīng)過3療程PAD化療，2療程VDD化療達到sCR；1例經(jīng)過4療程PAD化療，2療程V-DT-PACE化療達到VGPR。在這個治療過程中，免疫球蛋白及輕鏈定量結(jié)果總是在變化的，隨時觀察其變化幅度的大小，一旦發(fā)現(xiàn)結(jié)果較前有所提高，就要提高警惕，病情有復發(fā)的可能性，并結(jié)合其他臨床表現(xiàn)及相關(guān)檢查來綜合判定不同時期的療效，為患者提供最佳治療手段尤為重要。

對于化療后復發(fā)的患者，免疫球蛋白及輕鏈定量結(jié)果的變化也是很敏感的。本文有1例患者復發(fā)IgG由移植前有效時的9.36 g/L增至35.9 g/L，Kappa由移植前有效時的1.93 g/L增至11.3 g/L，出現(xiàn)肝臟多發(fā)轉(zhuǎn)移癌，腫瘤進展伴髓外侵犯；1例患者復發(fā)IgG由移植前有效時的9.96 g/L增至21.9 g/L，Kappa由移植前有效時的2.91 g/L增至5.35 g/L，出現(xiàn)雙上肢骨痛合并周圍神經(jīng)性病變。所以要根據(jù)患者病情復發(fā)的程度，進行針對性的治療，保證各項指標水平恢復正常或者趨于穩(wěn)定。

自體造血干細胞移植(autologous hematopoietic stem cell transplantation，auto-HSCT)和異基因造血干細胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT)技術(shù)應(yīng)用于MM患者以來，臨床總結(jié)：移植后的療效與MM患者移植前的緩解狀態(tài)有著十分重要的聯(lián)系，移植前療效好的患者，其移植后的療效也會更好或穩(wěn)定發(fā)展[8-9]。本文8例移植患者中，auto-HSCT占7例，allo-HSCT占1例，移植前患者經(jīng)過化療，近期療效達到CR4例、SCR1例、VGPR2例、PR1例，IgG和Kappa定量結(jié)果80%恢復正常，移植后患者病情穩(wěn)定，IgG和Kappa定量結(jié)果100%恢復正常。移植前和移植后免疫球蛋白及輕鏈定量結(jié)果的比較對療效評價的作用是不可忽視的。

移植不能根治MM，那么移植后進行鞏固和維持治療以延長MM緩解的時間是必須的[10]。經(jīng)臨床分析，優(yōu)化各種藥物與移植方式的最佳組合，有望達到長時間緩解[11]。本文有1例MM患者自auto-HSCT經(jīng)過23個月復發(fā)，IgG由移植后有效時的8.9 g/L 增至46.9 g/L，Kappa由移植后有效時的1.92 g/L增至7.33 g/L，經(jīng)2療程T-DCEP化療，4療程V-DT-PACE化療，后又經(jīng)VCD等方案，現(xiàn)IgG降至11.6 g/L，Kappa降至2.9 g/L，已恢復正常，病情穩(wěn)定。免疫球蛋白及輕鏈定量結(jié)果的監(jiān)測在移植后復發(fā)及以后的治療中也發(fā)揮重要作用。

綜上所述，定期進行血清免疫球蛋白及輕鏈定量測定，能快速有效地監(jiān)測MM患者不同發(fā)展階段中的病情，為臨床治療MM患者提供可靠的依據(jù)，在病情療效評價中的作用是不可替代的。

參考文獻：

[1]Hussein MA,Juturi JV,Lieberman I.Multiple myeloma:present and future[J].Curr Opin Oncol,2002,14(1):31．

[2]Pontet F.A data base for 3000 monoclonal immunoglobulin cases and a new classification[J].Clin Chim Acta,2005,355(1/2):13.

[3]張之南，沈悌．血液病診斷及療效標準[M].第3版.北京:科學出版社,2007:282-285．

[4]Roodman GD．Pathogenesis of myeloma bone disease[J]．Leukemia，2009，23(3)：435．

[5]劉汐盈，孫淑艷，宋媛媛.血清免疫固定電泳、蛋白電泳、免疫球蛋白及輕鏈定量對多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷價值探討[J]．中國實驗診斷學,2010,14(5):681.

[6]翟玉華,梁玉芳,陳文明,等．游離輕鏈檢測對多發(fā)性骨髓瘤診斷的臨床意義[J].中國實驗診斷學,2011,15(9):1525.

[7]凱英,高大,肖鎮(zhèn).PAD方案治療初發(fā)多發(fā)性骨髓瘤31例臨床觀察[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學雜志，2012,44(1):92.

[8]曾麗金,李娟,趙瑩,等．移植前不同誘導治療效果對多發(fā)性骨髓瘤患者移植后療效的影響[J]．中華血液學雜志,2010,31(2):119．

[9]Lahuerta JJ,Mateos MV，Martinez LJ,et al．Influence of pre- and pos- transplantation responses on outcome of patients with multiple myeloma:sequential improvement of response and achievement of complete response are associated with longer survival[J]．J Clin Oncol,2008,26:5775．

[10]Spencer A，Prince H M，Roberts AW，et al．Consolidation therapy with 1ow-dose thalidomide and prednisolone prolongs the survival of multiple myeloma patients undergoing a single autologous stern-cell transplantation procedure[J]．J Clin Oncol，2009，27:1788．

[11]鄒外一，李娟.造血干細胞移植治療多發(fā)性骨髓瘤[J].臨床血液學雜志,2012,25(7):412.

The Application of Quantitative Detection of Serum Immunoglobulin and Light Chain in Multiple Myeloma Condition Monitoring

LUWei1，LIChang2，GENGHong-lian2．

(1.TheClinicalLaboratoryinthe161stHospitalofPLA,Wuhan430010,China;2.DepartmentofLaboratoryDiagnosis,ChangzhengHospital,SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200003,China)

Abstract:ObjectiveMaking a dynamic analysis of the results of quantitative detection of serum immunoglobulin and light chain?in patients with multiple myeloma to evaluate the effect of the treatment.MethodsMake a statistics of the results of serum immunoglobulin including IgG and Kappa,serum protein electrophoresis(SPE)and immunofixation electrophoresis(IFE)of 25 IgG-Kappa patients with multiple myeloma in the different stages of development from 2008 to 2014,in combination with the curative effect of patients with different stages of treatment,select four major periods(early,effective before transplantation,recurrence,effective after transplantation)of results and make a statistical analysis on them.ResultsThe average content of M protein of early,effective before transplantation,recurrence and effective after transplantation groups by using SPE were respectively (35.67±8.49)%,(18.08±7.02)%,(8.43±7.94)%,(3.05±2.96)%.In 25 cases of effective group before transplantation and 8 cases of effective group after transplantation,Both M protein content and not seen IgG-Kappa zone by using IFE were respectively 20%,50%.Compared with normal control group，Kappa of early and recurrence groups were higher and there were with statistical significance(P<0.001),Kappa of effective group before transplantation were higher and there was with statistical significance(P<0.05).IgG of effective group before transplantation,IgG and Kappa of effective group after transplantation,were higher and there were no significant difference(P>0.05).Compared with effective group before transplantation,IgG and Kappa light chain quantitative results of effective group after transplantation were more lower than other two groups,the curative effect is best.ConclusionThe test of serum immunoglobulin and light chain regularly can provide reliable basis for clinical treatment of multiple myeloma patients,and play an important role in the patient condition monitoring and assessment of curative effect.

Key words:immunoglobulin；light chain；multiple myeloma；patient condition monitoring

文章編號：1007-4287(2016)05-0738-04

中圖分類號：R733.3

文獻標識碼：A

(收稿日期：2014-10-17)