王　霞，潘　彤，李紅珠，楊文玲

(天津市血液中心檢驗(yàn)科，天津 300110)

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雙試劑陽(yáng)性樣本復(fù)檢結(jié)果分析及檢測(cè)策略調(diào)整研究

王霞，潘彤，李紅珠，楊文玲△

(天津市血液中心檢驗(yàn)科，天津 300110)

摘要:目的通過(guò)對(duì)雙試劑陽(yáng)性樣本的復(fù)檢結(jié)果進(jìn)行分析，探討現(xiàn)有檢測(cè)策略調(diào)整的可行性。方法對(duì)2012年1月至2014年12月對(duì)HBsAg、抗-HIV、抗-HCV和抗-TP為ELISA雙試劑檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢陽(yáng)性率分別為，HBsAg：99.69%～100%、抗-HIV：100%、抗-HCV：98.96%～99.94%和抗-TP：99.86%～100%。結(jié)論雙試劑陽(yáng)性樣本復(fù)檢結(jié)果可以作為對(duì)檢測(cè)策略調(diào)整的依據(jù)。

關(guān)鍵詞:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；梅毒螺旋體

ELISA試驗(yàn)可用于各種疾病的篩查和診斷，特別適用于血站輸血相關(guān)感染的篩查。目前血站實(shí)驗(yàn)室采用ELISA主要檢測(cè)HBsAg、抗-HIV、抗-HCV和抗-TP。按照《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》[1]、GBT22576-2008/ISO15189-2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》[2]、ISO/IEC15189-2008《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的認(rèn)可準(zhǔn)則》及血站技術(shù)操作規(guī)程(2012)要求[3-4]，血站血液篩查實(shí)驗(yàn)室在采用一項(xiàng)新的檢測(cè)方法，或更換現(xiàn)有檢測(cè)方法時(shí)需要考慮的因素包括完成檢測(cè)必需的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)程序及其組合、檢測(cè)策略等。筆者回顧性分析近3年的雙試劑陽(yáng)性樣本復(fù)檢結(jié)果，旨在探討酶免檢測(cè)策略調(diào)整的可行性及問(wèn)題，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源采自天津市血液中心2012年1月至2014年12月無(wú)償獻(xiàn)血者，年齡18～55歲，體檢合格，獻(xiàn)血前經(jīng)過(guò)HBsAg初篩(金標(biāo)法)及血液比重檢測(cè)(硫酸銅比重法)合格。獻(xiàn)血后按照衛(wèi)生部要求對(duì)血樣進(jìn)行5個(gè)項(xiàng)目的初、復(fù)檢。

1.2試劑與儀器HBsAg初篩金標(biāo)試紙條(廈門新創(chuàng)公司)，初、復(fù)檢試劑(深圳麗珠、荷蘭梅里埃公司)；抗-HCV初、復(fù)檢試劑(北京萬(wàn)泰、美國(guó)強(qiáng)生公司)；抗-HIV初、復(fù)檢試劑(北京萬(wàn)泰、荷蘭梅里埃、法國(guó)伯樂(lè)及英國(guó)索靈公司)；抗-TP初、復(fù)檢試劑(北京華大吉比愛(ài)、北京萬(wàn)泰及北京高達(dá)公司)；ALT初、復(fù)檢試劑(上海榮盛、上?？迫A公司)。酶免初復(fù)檢質(zhì)控品為北京康徹斯坦，ALT高、低值質(zhì)控品為朗道公司產(chǎn)品。所有試劑均通過(guò)中國(guó)藥品生物制品檢定所批檢合格，且在有效期內(nèi)使用。主要檢測(cè)儀器包括STAR全自動(dòng)加樣系統(tǒng)和FAME24/20全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)和東芝TBA-120FR全自動(dòng)生化分析儀。

1.3方法ALT檢測(cè)采用速率法，≥40 IU/L為不合格，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP初、復(fù)檢均采用ELISA法。目前本血站采用初、復(fù)檢初次反應(yīng)性均進(jìn)行雙孔復(fù)檢，雙孔陽(yáng)性為陽(yáng)性，復(fù)檢結(jié)果一陰一陽(yáng)也判定為陽(yáng)性即作不合格報(bào)廢處理，抗-HIV陽(yáng)性送天津市疾病預(yù)防與控制中心進(jìn)行確認(rèn)。所有試驗(yàn)均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1HBsAg雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢2012年1月至2014年12月獻(xiàn)血者HBsAg雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢結(jié)果見(jiàn)表1。各年份的復(fù)檢不合格率間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2抗-HIV雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢2012年1月至2014年12月獻(xiàn)血者抗-HIV雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢結(jié)果見(jiàn)表2。各年份的復(fù)檢不合格率間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1　　HBsAg雙試劑陽(yáng)性結(jié)果的復(fù)檢情況

表2　　抗-HIV雙試劑陽(yáng)性的復(fù)檢情況

2.3抗-HCV雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢2012年1月至2014年12月獻(xiàn)血者抗-HCV雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢結(jié)果見(jiàn)表3。各年份的復(fù)檢不合格率間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表3　　抗-HCV雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢情況

2.4抗-TP雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢2012年1月至2014年12月獻(xiàn)血者血液檢測(cè)抗-TP雙試劑陽(yáng)性復(fù)檢結(jié)果見(jiàn)表4。各年份的復(fù)檢不合格率間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表4　　抗-TP雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢情況

3討論

血站技術(shù)操作規(guī)程對(duì)初次試驗(yàn)有反應(yīng)性的檢測(cè)標(biāo)本的后續(xù)處理有2種方案[4]。方案1：以同一試驗(yàn)對(duì)原血樣(或從血袋導(dǎo)管重新取樣)做雙孔復(fù)試，如果雙孔復(fù)試結(jié)果均為無(wú)反應(yīng)性，其初試有反應(yīng)性可能由于假反應(yīng)性或技術(shù)誤差導(dǎo)致，檢測(cè)結(jié)論為無(wú)反應(yīng)性，血液可放行供臨床使用；如果雙孔復(fù)試結(jié)果中任何1孔為有反應(yīng)性，則檢測(cè)結(jié)論為有反應(yīng)性，對(duì)應(yīng)的血液及由其制備的所有成分應(yīng)隔離并報(bào)廢，將血液標(biāo)本轉(zhuǎn)送相關(guān)實(shí)驗(yàn)室做進(jìn)一步確證或補(bǔ)充試驗(yàn)。方案2：不做重復(fù)試驗(yàn)，初次試驗(yàn)結(jié)論即為檢測(cè)最終結(jié)論。

本血站檢驗(yàn)科的既往檢測(cè)策略是對(duì)ELISA初檢有反應(yīng)性標(biāo)本均采用以同樣的試驗(yàn)方法對(duì)原血樣做雙孔復(fù)試，如果雙孔復(fù)試結(jié)果均為陰性，檢測(cè)結(jié)論為陰性，血液可放行供臨床使用；如果雙孔復(fù)試結(jié)果中任何1孔為陽(yáng)性，檢測(cè)結(jié)論也為陽(yáng)性，對(duì)應(yīng)的所有產(chǎn)品均為不合格并作報(bào)廢處理?；仡櫡治鼋?年的初次反應(yīng)為雙試劑陽(yáng)性的樣本，經(jīng)二次復(fù)檢后陽(yáng)性率約為99.39%～100%，而且統(tǒng)計(jì)結(jié)果也表明3年4項(xiàng)血液篩查檢測(cè)結(jié)果的不合格率也保持穩(wěn)定狀態(tài)。據(jù)此對(duì)檢測(cè)策略進(jìn)行更改：ELISA初次試驗(yàn)雙試劑陽(yáng)性標(biāo)本，其檢測(cè)結(jié)論為陽(yáng)性，不再進(jìn)行雙孔復(fù)試；而對(duì)單試劑初次試驗(yàn)為陽(yáng)性樣本采用以同一試驗(yàn)對(duì)原血樣做雙孔復(fù)試，如果雙孔復(fù)試結(jié)果均為陰性，檢測(cè)結(jié)論為陰性，血液可放行供臨床使用；如果雙孔復(fù)試結(jié)果中任何1孔為為陽(yáng)性，檢測(cè)結(jié)論為陽(yáng)性，對(duì)應(yīng)的所有產(chǎn)品均為不合格。

通過(guò)此次檢測(cè)策略的調(diào)整確認(rèn)使有以下幾點(diǎn)體會(huì)：(1)若檢測(cè)策略調(diào)整為雙試劑陽(yáng)性直接報(bào)廢不再進(jìn)行復(fù)試對(duì)于提高血液安全是有利的但同時(shí)也可能會(huì)造成血液資源的浪費(fèi)；(2)檢測(cè)策略調(diào)整會(huì)大大減少不必要的復(fù)試從而減輕人力，節(jié)約物力與財(cái)力；(3)血液檢測(cè)方法的確認(rèn)不是一性次試驗(yàn)，而是一項(xiàng)需要持續(xù)開(kāi)展的質(zhì)量活動(dòng)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在一定時(shí)間周期內(nèi)對(duì)已經(jīng)過(guò)確認(rèn)的檢查方法的性能包括策略等進(jìn)行驗(yàn)證、確認(rèn)與調(diào)整，才能獲得準(zhǔn)確、穩(wěn)定檢測(cè)結(jié)果的證據(jù)。

總之，血站血液篩查實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該在檢測(cè)過(guò)程發(fā)生的變化進(jìn)行必要的方法確認(rèn)[5-7]。這些變化包括實(shí)驗(yàn)室首次引入的檢測(cè)方法、已確認(rèn)的方法條件發(fā)生變化、試劑的更換、儀器設(shè)備的大修及大保養(yǎng)等。凡是涉及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法的任何改變，均需在投入使用前參照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施確認(rèn)[8-12]。

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(收稿日期：2016-02-11)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.047

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)08-1123-03

△通訊作者，E-mail:yangwenling@tjbc.org.cn。

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