蔣銳
金黃色葡萄球菌廣泛存在于我們生活的每一個角落,可以通過人類的手或空氣對食物造成污染,然后通過口腔、腸道等引起人類和動物化膿性感染,危及人類和動物的生命健康。近幾年,我國由于金黃色葡萄球菌引起的事物中毒事件正在逐漸增多,對食品中金黃色葡萄球菌的檢測實驗工作迫在眉睫,實驗人員更是要注重通過不同檢測方法對實驗結果的對比分析,從而增加食品中金黃色葡萄球菌定量檢測的準確性。
材料與方法
實驗的材料是由筆者自行購買得到,材料的選擇具有隨機性,實驗方法是Baird-Parker平板計數(shù)法以及MPN 計數(shù)法,然后對這兩種方法得到的實驗結果進行對比分析。
材料。實驗的材料分別面包25份、魚丸18份、蜜餞20份、盒飯15份。
樣品稀釋。對于實驗材料中的固體或者是半固體,可以稱取25克放置在225毫升的磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌杯中,通過拍打器均勻的拍打一到兩分鐘的時間,制成1:10的樣品。對于液體類的樣品,可以通過無菌吸管獲得25毫升的樣品,放在225毫升的磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌瓶中,通過搖晃使其均勻,制成1:10的樣品。
檢測方法。(1)采用無菌的吸管吸取1毫升的樣品接種在Baird一Parker平板,保證樣品勻液均勻置于平板上,在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)48小時,觀察菌落的分布特征和生長情況,挑取10個典型的菌落進行革蘭氏染色及血漿凝固酶驗證,計算實驗結果。(2)吸取1毫升樣品勻液接種于含有10毫升10%氯化鈉胰酪陳大豆肉湯管中,可以接種3管,將這3管接種物放在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)48小時,再取一些培養(yǎng)物放在Baird一Parker平板,在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)48小時,觀察菌落特征以及他們的生長情況,從每塊平板上挑選2到3個典型菌落進行革蘭氏染色及血漿凝固酶驗證,并查MPN檢索表。
計算結果。檢測食品中金黃色葡萄球菌陽性結果計算公式:T = St- Sck,其中T是實驗樣品中金黃色葡萄球菌數(shù)CFU/g或者每g(ml)樣品中金黃色葡萄球菌的最大可能數(shù)MPN/g(ml),St是指金黃色葡萄球菌回歸不同實驗樣品后的金黃色葡萄球菌數(shù)CFU /g或每g (ml)樣品中金黃色葡萄球菌的最大可能數(shù)MPN/g (ml),Sck是指不同實驗樣品金黃色葡萄球菌數(shù)CFU/g或每g(ml)樣品中金黃色葡萄球菌的最大可能數(shù)MPN/g2(ml)。
結果
通過以上介紹的方法,對25份面包、18份魚丸、20份蜜餞以及15份盒飯進行實驗探究,將實驗樣品進行分組對照分析,采用Baird一Parker平板計數(shù)法檢測,定量陽性結果為30 CFU /g,采用MPN計數(shù)法檢測,定量陽性結果為23 MPN /g,得到實驗結果如下表所示。
從上表的結果中可以看出,通過Baird一Parker平板計數(shù)法檢測得到的陽性率為8.9%,通過MPN計數(shù)法檢測得到的陽性率為23.1%。對這兩種檢測方法進行總結,結果如下表所示:
通過上面兩個表格的對比,可以看出MPN計數(shù)法檢測出來的陽性率明顯高于Baird一Parker平板計數(shù)法得到的陽性率。由此可見,不同的方法檢測得到的結果差異性還是比較大的,所以在進行實驗的時候要采用多種檢測方法對食品中的金黃色葡萄球菌含量進行綜合評估。
結論
Baird一Parker平板計數(shù)法由于采用沒有經(jīng)過增菌的稀釋液直接接種平板,對金黃色葡萄球檢出率比較低,再加上食品中還含有其他種類的細菌,抑制了金黃色葡萄球菌的正常生長,因此在實驗結果中,可以看到陽性檢出率符合國內的食品安全標準,但是這并不代表食品中的金黃色葡萄球菌的含量就是符合食品安全標準的。這種方式一般比較適用于金黃色葡萄球菌含量比較大的食品,對含量低的食品檢測不能達到實驗的效果。
通過MPN計數(shù)法檢測出來的結果,陽性率比較高,但是最終也不能達到100%的效果,說明食品本身的物理性質和狀態(tài)結構都對實驗結果產生一定程度的影響,因此,在今后的食品檢測實驗中,應該注重多種檢測方法的結合比較分析,通過不同實驗方法得到更加準確的實驗結果。
筆者在實驗材料收集的時候,特別注重區(qū)域分布的問題,有些食品來自規(guī)模比較小的生產作坊,衛(wèi)生環(huán)境比較差,檢測出食品中金黃色葡萄球菌的陽性率比較高,相對大型的生產地,衛(wèi)生條件比較好,生產流程比較清晰,食品中的金黃色葡萄球菌的含量就比較低。另外食品的生產日期也是重要的考慮因素,在后期的實驗中,筆者發(fā)現(xiàn)生產時間長的食品中金黃色葡萄球菌含量明顯多于短期內生產的食品,因此,人們在購買食品的時候一定要注意食品的生產時間,過期或者快要過期的食品不要食用。
食品安全問題一直是人們生活中最重要的事情之一,它直接影響了人類的生活質量,關系到人類的身體健康,因此,檢測部門要嚴格按照國家食品安全條例對市場上的食品進行嚴格的控制,為人類的健康發(fā)展提供安全的生活環(huán)境。對食品中金黃色葡萄球菌的檢測一定要采用多種檢測方法,從對比分析結果中確定食品安全系數(shù)。
(作者單位:長樂市產品質量檢驗所)