段建偉 魏俊強(qiáng) 張猛 閆石

摘要：目的 探究哪種劑量青霉素在骨折模型制備過程中預(yù)防感染有效。方法 建立新西蘭大白兔股骨骨折模型，造模成功后依據(jù)青霉素劑量的不同將兔隨機(jī)分為三組，A組術(shù)后左側(cè)臀大肌肌注青霉素40萬U，1次/d，連續(xù)3d，切口換藥7d，1次/d；B組術(shù)后左側(cè)臀大肌肌注青霉素40萬單位，1次/d；C組術(shù)后左側(cè)臀大肌肌注青霉素80萬單位，1次/d，連續(xù)3d。術(shù)后4w對三組兔局部分層穿刺后作菌培養(yǎng)，抽血化驗白細(xì)胞，麻醉后后行X線片檢查。結(jié)果 三組兔術(shù)后早期都可看到切口滲血，患肢跛行，食欲的減退，白細(xì)胞增高。A、B、C三組分別有2、11、2只X線表現(xiàn)出經(jīng)典骨髓炎表現(xiàn)，為皮質(zhì)破壞，邊界不清，死骨形成影相，同時菌培養(yǎng)可見有菌落生長。A、B、C三組感染率分別為8%、44%、9%（表2）。三組間兩兩比較A組和B組比較P<0.00417，兩組有效率之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義；B組和C組之間比較P<0.00625兩組有效率間差異有統(tǒng)計學(xué)意義；A組和C組比較兩組P>0.0125差異未見統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 青霉素40萬單位，1次/d肌注連續(xù)3d加換藥7d或80萬單位，1次/d，連續(xù)3d不用換藥均可有效控制感染，可用于指導(dǎo)兔骨折或骨不連模型的制備中的抗感染。

關(guān)鍵詞：股骨；骨折；實驗動物模型；青霉素；新西蘭大白兔

Penicillin Plus Dressing can be Used to Prevent Infection in the Preparation of Fracture Model

DUAN Jian-wei，WEI Jun-qiang，ZHANG Meng，YAN Shi

（Department of Pediatric Orthopedics，Chengde Medical College，Chengde 067000，Hebei，China）

Abstract：Objective To explore the effective prevention of infection in the process of preparing the fracture model with dose of penicillin. Methods To establish the New Zealand White rabbits femur fracture model and made successful model according to the dose of penicillin different rabbits were randomly divided into three groups， group A after the left gluteus maximus intramuscular penicillin 40 000 u， 1 times / day， for 3 consecutive days， dressing the wound for 7 days， 1 times / day； group B after operation the left gluteus maximus muscle infusion of penicillin to 40 million U， 1 times / day； patients in group C after left gluteus maximus intramuscular penicillin 80 million U， 1 times / day for 3 consecutive days. 4 weeks after the operation of 3 groups of rabbits after partial layer puncture bacteria culture， blood tests of white blood cells， X-ray examinations were performed after anesthesia. Results The 3 groups after operation early can see the incision oozing， limp， decreased appetite， increased white blood cells. Group A， group B and group C respectively， 2， 11， 2 X-ray showed the classic manifestations of osteomyelitis， for the destruction of the cortex， border is not clear， the dead bone formation， images and bacteria culture can be seen， there is a colony growth. The infection rates of A， B and C were 8%， 44%， 9% （Table 2）. Between the three groups， the difference between the two groups was statistically significant between P group and B group， the difference between the two groups was statistically significant； the difference between the B group and the C group was statistically significant； the difference between the A group and the P group was statistically significant between the two groups， the P group and the C group was not statistically significant. Conclusion Penicillin 40 000 u， 1 times / daily intramuscular injection of continuous 3 TICA dressing 7 days or 8 00000 u， 1 times / day， for 3 consecutive days without dressing can effective infection control and can be used in guidance of rabbit fracture or bone nonunion model preparation of anti infection.

Key words：Femur；Fracture；Experimental animal model；Penicillin； New Zealand White rabbits

近年來對新西蘭大白兔骨折模型制備的研究越來越多，而在制備過程中對預(yù)防感染的研究較少。而王永剛[1]、殷力[2]、吳琳[3]、李東亞[4]、徐自勝[5]等學(xué)者報告的應(yīng)用青霉素抗感染劑量不同。本研究旨在探討青霉素在兔骨不連模型制備過程中所需的劑量，為今后的造模過程中抗感染提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 75只8月齡，體重1.5～2.5kg，新西蘭大白兔，清潔級環(huán)境下飼養(yǎng)（承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院實驗動物中心），自由活動，溫度為（25±0.5）℃，濕度60%。試驗中對兔的處置符合動物倫理學(xué)要求[6]。依據(jù)王永剛[1]、趙震宇[7、8]、郭樹章[9]等學(xué)者的制作兔股骨骨折模型，3%戊巴比妥鈉1.0/kg耳緣靜脈麻醉，兔右側(cè)臥位于兔臺上，術(shù)區(qū)褪毛，0.5%碘伏消毒，鋪單。取左大腿外側(cè)切口，顯露股骨干，安裝由張家港市醫(yī)械制造有限公司提供的Ⅰ型FK5號指骨型外固定支架，在股骨遠(yuǎn)近兩端分別用電鉆打2個孔，中間兩個孔相聚2cm以上，方向為自股骨外側(cè)垂直股骨干，然后擰入4枚2.0mm半針，打孔過程中盡量保持平行。在中間2枚半針之間用線鋸截除長為1.5cm骨段（包括骨膜和骨髓），并使斷端保持分離1.5cm，止血，雙氧水、稀碘伏、生理鹽水反復(fù)沖洗切口后逐層縫合，手術(shù)過程中嚴(yán)格按照無菌要求操作。

1.2 按照處理方法的不同將兔隨機(jī)分為三組，每組25只：A組術(shù)后左側(cè)臀大肌肌注青霉素40萬單位，1次/d，連續(xù)3d，切口換藥7d，1次/d；B組術(shù)后左側(cè)臀大肌肌注青霉素40萬單位，1次/d，連續(xù)3d；C組術(shù)后左側(cè)臀大肌肌注青霉素80萬單位，1次/d，連續(xù)3d。

1.3觀察及隨訪指標(biāo) 造模前后對一般情況觀察和白細(xì)胞檢查：造模前后觀察兔的活動狀況和進(jìn)食情況；切口滲出及愈合情況、軟組織腫脹情況、竇道及分泌物情況。術(shù)前及術(shù)后1、2、4w同一時間耳緣靜脈抽血檢測白細(xì)胞。術(shù)后4w局部褪毛消毒后分層穿刺作細(xì)菌培養(yǎng)，麻醉后后行手術(shù)部位X線片檢查。

1.4數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，對三組的感染率進(jìn)行行×列表資料的χ2檢驗，α=0.05，三個實驗組間的兩兩比較應(yīng)用χ2檢驗中多個樣本率間的多重比較，α′=0.0125。

2 結(jié)果

2.1一般情況觀察 三組兔術(shù)后當(dāng)天切口可見少量血性液體滲出，A組兔切口經(jīng)過換藥3d后滲出逐漸減少至干燥結(jié)痂，8～9d切口基本愈合，B、C兩組兔切口至6d逐漸干燥結(jié)痂，但外架半針與切口接觸部分扔愈合較慢，直至10d時才可見切口閉合，13～15切口基本愈合。最初3d三組動物不同程度出現(xiàn)萎靡，患肢跛行，進(jìn)食減退，只飲少量水，1w后大部分兔食量正常。三組中，A組23只B組14只C組20只切口愈合良好，余15只出C組在應(yīng)用青霉素期間死亡外均有不同程度的軟組織腫脹、膿腫、竇道形成，擠壓皮膚腫脹處有黃白色膿液溢出。白細(xì)胞變化情況見表1。

2.2放射學(xué)觀察 三組中A組23只B組14只C組20兔骨折斷端整齊，未見皮質(zhì)破壞及死骨影相，余兔可見典型骨髓炎表現(xiàn)，皮質(zhì)反應(yīng)為中度甚至廣泛，皮質(zhì)骨破壞，邊界不清，為低密度透亮區(qū)，其間還可見斷端可見死骨形成，為密度增高且不均勻的死骨塊影。

2.3菌培養(yǎng) 三組兔行穿刺組織的細(xì)菌培養(yǎng)，A組2只B組11只C組2只培養(yǎng)可見菌落生長，行革蘭氏染色和血漿凝固酶實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌。菌培養(yǎng)結(jié)果證實A、B、C三組感染率分別為8%、44%、9%（表2）。三組間兩兩比較A組和B組比較P<0.00417，兩組有效率之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義；B組和C組之間比較P<0.00625兩組有效率間差異有統(tǒng)計學(xué)意義；A組和C組比較兩組P>0.0125差異未見統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。A、C兩組的感染率低于B組。

3 討論

兔作為實驗研究的對象制作骨折模型有其自身的優(yōu)點(diǎn)：容易飼養(yǎng)、手術(shù)耐受力強(qiáng)、體型相對于鼠類較大、操作也較方便、經(jīng)濟(jì)方面也在可接受的范圍[10]。而在制作兔骨折模型過程中感染的存在困擾著許多學(xué)者，除術(shù)中嚴(yán)格按照無菌要求操作外，術(shù)后應(yīng)用青霉素的劑量也各不相同。

兔骨折模型的選擇主要為橈骨和脛骨，原因為存在尺骨和腓骨的支撐，不需要內(nèi)固定[11]。本研究選擇股骨制作骨折模型，手術(shù)創(chuàng)傷大，而股骨為單一承重骨，兔在活動過程中容易發(fā)生內(nèi)固定失效，故選用外固定器固定，傷口因固定針的存在愈合較慢，因此，發(fā)生感染的風(fēng)險增加。

本研究中A組應(yīng)用40萬單位青霉素加換藥和C組只應(yīng)用80萬單位青霉素，感染率無統(tǒng)計學(xué)差異，而A、C兩組相較于B組感染率明顯降低，原因為：①A、B兩組青霉素用量相同，但A組應(yīng)用切口換藥，保持了局部清潔且與外界環(huán)境隔絕，因此A組切口的愈合快于B組；②B組切口周圍滲出的血性液體為細(xì)菌良好的培養(yǎng)基，兔切口與外界接觸后容易使環(huán)境中的細(xì)菌定植于切口周圍，且向深部組織蔓延，引起感染導(dǎo)致骨髓炎；③A組每次換藥消毒過程可殺滅切口周圍的細(xì)菌，為切口甲級愈合提供了良好的條件；④青霉素G半衰期較短，體內(nèi)吸收后以腎、肺、橫紋肌、和啤的含量較高，而骨骼中的含量較低[12]，臨床抗菌藥物學(xué)中提到[13]組織有炎癥使青霉素也較易透入，因此，C組切口未進(jìn)行換藥，但應(yīng)用青霉素的劑量高于B組，使得骨折斷端組織青霉素的濃度高于B組，同樣可起到抗感染的作用。

因此，以兔為研究對象進(jìn)行較大創(chuàng)傷性實驗研究過程中，術(shù)后是否發(fā)生感染，除嚴(yán)格按照無菌要求操作外，與術(shù)后應(yīng)用抗生素的劑量有很大關(guān)系，本實驗驗證青霉素40萬單位，1次/d肌注連續(xù)3d加換藥7d或80萬單位，1次/d，連續(xù)3d不用換藥均可有效控制感染，可用于指導(dǎo)兔骨折或骨不連模型制備中抗感染。

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編輯/成森