鐘文 陳莎 章軍 王躍生 劉安

[摘要]以葛根芩連湯為示范，研究中藥原料和生產(chǎn)工藝對中成藥質(zhì)量一致性的影響，提出保障中成藥質(zhì)量一致性的方法。研究表明生產(chǎn)工藝對產(chǎn)品質(zhì)量一致性的影響一般不超過5%，而原料的影響甚至?xí)^30%，證明后者的影響遠(yuǎn)高于生產(chǎn)工藝。采用調(diào)配技術(shù)，提高了原料的質(zhì)量一致性，使得調(diào)配后原料生產(chǎn)的產(chǎn)品與參照組批間差異<5%，進(jìn)而提高了成品質(zhì)量的一致性。研究結(jié)果顯示，在當(dāng)前情況下影響中成藥質(zhì)量一致性的主要因素是原料，應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)對中藥原料質(zhì)量的控制；通過調(diào)配原料可以提高中成藥質(zhì)量的一致性。

[關(guān)鍵詞]中成藥；質(zhì)量控制；一致性；混批調(diào)配技術(shù)

藥品質(zhì)量一致性是指藥品的每一單位產(chǎn)品（如一片藥，一支注射劑，或一箱料藥等）都符合有效性、安全性的規(guī)定要求，相互之間差異性小，是藥品的重要特征[1]。藥品質(zhì)量一致性是其療效一致性的前提。對于中成藥而言，產(chǎn)品質(zhì)量一致性差，是制約中成藥發(fā)展的關(guān)鍵難題之一[2]，也是急需解決的重要問題。影響中成藥質(zhì)量均一的主要因素是生產(chǎn)過程，包括生產(chǎn)工藝和原料2個(gè)方面[3]。

生產(chǎn)過程控制技術(shù)是通過對原材料、工藝過程中間體以及工藝過程的關(guān)鍵質(zhì)量、性能參數(shù)進(jìn)行實(shí)時(shí)測量，來設(shè)計(jì)、分析和控制生產(chǎn)加工過程的系統(tǒng)，最終目的是確保最終產(chǎn)品質(zhì)量[46]。該技術(shù)在西方制藥工業(yè)中受到廣泛的重視，并獲得了巨大成功[78]。因而生產(chǎn)過程控制技術(shù)被越來越多的應(yīng)用到中藥行業(yè)中控制產(chǎn)品質(zhì)量[912]，并取得了很好的成績。

中成藥的生產(chǎn)工藝比較復(fù)雜，包括提取、分離、純化、濃縮與干燥等眾多環(huán)節(jié)，每個(gè)環(huán)節(jié)都可能影響成品的質(zhì)量，為了保證終產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定，研究者對生產(chǎn)工藝的每個(gè)環(huán)節(jié)都進(jìn)行了深入的研究[1314]。但值得注意的是，在眾多中藥產(chǎn)品質(zhì)量控制中，往往強(qiáng)調(diào)生產(chǎn)工藝的控制，而忽略對原料質(zhì)量的控制。

化學(xué)藥品的原料藥是工業(yè)化產(chǎn)品，多數(shù)原料的純度在99%以上，其質(zhì)量一致性得到了很好的保障，因而生產(chǎn)工藝對產(chǎn)品質(zhì)量一致性的影響可能遠(yuǎn)高于原料。但是中藥原料并非工業(yè)化產(chǎn)品，其質(zhì)量的一致性并不是很理想，有時(shí)甚至差異巨大。眾所周知，不同產(chǎn)地的藥材質(zhì)量并不完全相同，且不同的采集時(shí)間、采收方法、炮制工藝和貯存時(shí)間，都會(huì)導(dǎo)致中藥材質(zhì)量的差異[15]。因而中藥原料對中藥產(chǎn)品質(zhì)量一致性的影響必須進(jìn)行深入研究。然而到目前為止，鮮見類似的研究報(bào)道，也無從評價(jià)原料和生產(chǎn)工藝對中藥產(chǎn)品質(zhì)量一致性影響的大小。

本文以葛根芩連湯為示范性研究對象，評價(jià)原料和生產(chǎn)工藝對產(chǎn)品質(zhì)量一致性影響的大小，明確影響中成藥質(zhì)量一致性的關(guān)鍵因素，并提出相應(yīng)的解決辦法，以期為中成藥的質(zhì)量一致性控制提供切實(shí)可行的思路。

1材料

島津LC20 A高效液相色譜儀，舒美KQ3200 E超聲清洗器（功率150 W，昆山市超聲儀器有限公司），Sartorius BP2llD天平（德國賽多利斯股份有限公司），DZF6090真空干燥箱（上?；|試驗(yàn)儀器有限公司），981B型電子調(diào)溫電熱套（天津市泰斯特儀器有限公司）。乙腈為Fisher公司，色譜級；水為娃哈哈純凈水（浙江，杭州）；磷酸（85%優(yōu)級純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；磷酸二氫鉀（分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；甲醇（分析純，北京化工廠）。

葛根芩連湯中的4味中藥，葛根、黃芩、黃連、炙甘草飲片的產(chǎn)家、批號及產(chǎn)地見表1，經(jīng)中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所李西文副研究員鑒定，分別為豆科植物野葛Pueraria lobata （Willd） Ohwi的干燥根；唇形科植物黃芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根；毛茛科植物黃連Coptis chinensis Franch的干燥根莖和豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch的干燥根莖。對照品均來自中國食品藥品檢定研究院和中藥固體制劑制造技術(shù)國家工程研究中心，見表2。

2方法

21色譜條件

色譜柱Merck Chromolith RP18e（46 mm×100 mm，35 μm）；流動(dòng)相005%磷酸（A，含001 mol·L-1磷酸二氫鉀）乙腈（B）；梯度洗脫（0～15 min，8%～14%B；15～25 min，14%～16%B；25～45 min，16%～38%B）；流速2 mL·min-1；柱溫35 ℃；進(jìn)樣量10 μL；檢測波長葛根素、大豆苷、甘草酸銨為250 nm，甘草苷、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素為275 nm，黃連堿、藥根堿、小檗堿、巴馬汀為345 nm；理論塔板數(shù)均不低于3 000。

22對照品溶液的配制

分別精密稱取葛根素、大豆苷、甘草苷、黃連堿、藥根堿、黃芩苷、小檗堿、巴馬汀、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素和甘草酸銨對照品適量，加50%甲醇配制成每l mL分別含4836，3628，1464，7632，1682，4444，3800，7760，7136，3580，1526，1403 μg的混合對照品溶液。

23樣品的制備

231葛根芩連湯提取工藝[16]取葛根72 g、黃連27 g、黃芩27 g和炙甘草18 g，放入2 000 mL圓底燒瓶中，加入8倍量水，浸泡30 min，加熱回流提取2次（1 h，40 min），合并提取液，減壓濃縮，50 ℃真空干燥，粉碎，得浸膏粉。

232葛根芩連湯浸膏粉樣品的制備取浸膏粉01 g，置錐形瓶中，精密加入60%甲醇25 mL，稱重，超聲處理30 min，放冷，補(bǔ)足失重，搖勻，過微孔濾膜（045 μm），濾液作為供試品溶液。

24飲片的調(diào)配方法

以中含量飲片批次為參照組，按照文獻(xiàn)[17]方法對其余批次的飲片進(jìn)行原料的調(diào)配。

3結(jié)果與討論

31飲片質(zhì)量差異性比較

對葛根等4味飲片進(jìn)行含量測定，結(jié)果見表3。葛根中葛根素和大豆苷2個(gè)成分含量的RSD分別為11%，13%；炙甘草中甘草苷和甘草酸銨2個(gè)成分含量的RSD分別為23%，50%；黃連中黃連堿、藥根堿、小檗堿和巴馬汀4個(gè)成分含量的RSD分別為15%，13%，14%，13%；黃芩中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素4個(gè)成分含量的RSD分別為12%，98%，25%，24%。

從上述結(jié)果可以看出，盡管研究用原料的質(zhì)量均滿足藥典的規(guī)定，但是含量差異明顯，質(zhì)量一致性非常差。因而可以推測若是用于工業(yè)生產(chǎn)，將會(huì)直接影響成品的質(zhì)量，造成產(chǎn)品質(zhì)量一致性非常差。

32生產(chǎn)工藝對產(chǎn)品質(zhì)量一致性影響研究

分別選擇高、中、低含量的飲片作為原料進(jìn)行生產(chǎn)。高含量飲片生產(chǎn)5批樣品，中含量藥材生產(chǎn)2批，低含量藥材生產(chǎn)3批。相同批次飲片生產(chǎn)的產(chǎn)品成分含量與批間差異見表4～6。從3個(gè)表中可以看出，無論選用的飲片含量高低，無論生產(chǎn)多少批次，只要是相同批次的飲片生產(chǎn)的成品，其批間差異都較小，各成分含量的RSD基本都小于5%。

同一批次飲片生產(chǎn)的產(chǎn)品，消除了原料的影響，因而可以用于評價(jià)生產(chǎn)工藝對產(chǎn)品質(zhì)量一致性的影響。德國Schwabe藥廠對銀杏葉提取物的規(guī)定，各可測成分的批間差異<5%，則認(rèn)為生產(chǎn)過程是相對穩(wěn)定的[1820]。盡管沒有明確的規(guī)定，一般實(shí)際操作中，中藥產(chǎn)品質(zhì)量差別<5%也被認(rèn)為生產(chǎn)過程是穩(wěn)定的。從本研究結(jié)果可以看出，盡管沒有對生產(chǎn)工藝進(jìn)行額外的控制，比如成分的在線監(jiān)測等，只要采用同一批原料進(jìn)行生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量的一致性依然較為滿意。

33原料對產(chǎn)品質(zhì)量一致性影響研究

將高、低含量的飲片所生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行比較，見表7，可以看出各個(gè)成分之間RSD最高可以達(dá)到30%，90%以上成分含量的RSD大于5%。這表明原料對成品質(zhì)量的影響要遠(yuǎn)大于工藝對成品質(zhì)量的影響。所以，對中成藥而言，要想控制中成藥的質(zhì)量均一，應(yīng)先確保生產(chǎn)原料的質(zhì)量均一。

34調(diào)配技術(shù)用于中成藥質(zhì)量一致性控制研究

以中含量的飲片做為參照，選用其他不同批次的飲片進(jìn)行調(diào)配，并用調(diào)配所得藥材進(jìn)行生產(chǎn)，比較

參照組與調(diào)配組各成分之間的差異，見表8?？梢钥闯觯S芩苷外（RSD 57%），參照組與調(diào)配組各成分的含量RSD都小于5%，表明參照組與調(diào)配組之間沒有顯著性差異，質(zhì)量一致性較好。這說明，采用調(diào)配技術(shù)可以控制原料的質(zhì)量一致性，進(jìn)而達(dá)到控制成品質(zhì)量一致性的目的。

4結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)以葛根芩連湯為示范性研究對象，評價(jià)了原料和工藝2個(gè)因素對中成藥質(zhì)量一致性的影響。本研究所采用的葛根芩連湯的生產(chǎn)過程包括提取、濃縮和干燥3個(gè)環(huán)節(jié)，對常見中藥復(fù)方的生產(chǎn)過程具有很好的代表性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在中藥生產(chǎn)中，生產(chǎn)工藝是相對穩(wěn)定的，所引起的工藝誤差一般不超過5%，對成品質(zhì)量一致性的影響相對較??；而原料的質(zhì)量差異較大，所引起的誤差可到30%以上，對成品質(zhì)量一致性的影響相對較大。藥材市場上飲片質(zhì)量的差異比本研究所用的差異更大，其導(dǎo)致的產(chǎn)品差異也會(huì)更大。這充分說明對中成藥質(zhì)量一致性控制而言，控制原料的質(zhì)量一致性應(yīng)該占據(jù)非常重要的地位，中藥生產(chǎn)過程控制的重點(diǎn)應(yīng)該放在生產(chǎn)原料的質(zhì)量控制上。

本研究采用調(diào)配技術(shù)實(shí)現(xiàn)了原料質(zhì)量的均一，進(jìn)而保證了產(chǎn)品質(zhì)量的均一。這說明調(diào)配技術(shù)能夠解決目前中藥原料質(zhì)量一致性較差的問題，對保障中藥產(chǎn)品質(zhì)量的一致性具有非常重要的作用。

基于本研究結(jié)果，作者呼吁中藥行業(yè)在中藥質(zhì)量均一控制研究方面，應(yīng)該把更多的關(guān)注點(diǎn)放在中藥原料質(zhì)量一致性控制上，在中藥產(chǎn)品生產(chǎn)中盡快采用原料調(diào)配技術(shù)，以期更好的保障中藥產(chǎn)品質(zhì)量一致性。同時(shí)也呼吁監(jiān)管部門在進(jìn)行中藥產(chǎn)品質(zhì)量相關(guān)法規(guī)制定和監(jiān)管時(shí)，對此進(jìn)行重點(diǎn)關(guān)注，推動(dòng)中藥產(chǎn)品盡快實(shí)現(xiàn)“有效、安全、可控”。

本文未涉及純化工藝研究，作者認(rèn)為如果純化工藝是穩(wěn)定的，其引起的誤差一般不會(huì)超過5%，不影響本文結(jié)論。這主要是因?yàn)樵谛滤幧陥?bào)資料中，要求進(jìn)行工藝驗(yàn)證，如果產(chǎn)品質(zhì)量差異超過5%，一般認(rèn)為該工藝不夠穩(wěn)定，難以獲得批準(zhǔn)。但是應(yīng)該看到有很多老的中藥品種，特別是一些注射劑品種，由于申報(bào)時(shí)要求較低，可能存在工藝不穩(wěn)定的情況。比如有些品種可能還在使用石硫法進(jìn)行純化，而石硫法的工藝穩(wěn)定性存在很多問題，其引起的誤差可能較大。對于不穩(wěn)定的工藝，即使進(jìn)行再嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝控制，作者認(rèn)為依然難以消除該工藝對產(chǎn)品質(zhì)量的影響，難以保障產(chǎn)品質(zhì)量的均一性。要解決該問題，只能大力推進(jìn)工藝改進(jìn)，而不是對生產(chǎn)工藝進(jìn)行控制。

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[責(zé)任編輯孔晶晶]