摘 要：以柴胡提取物得率為考查指標，對其提取過程進行單因素考察，得到最佳提取工藝。該方法操作方便、準確可靠。

關鍵詞：柴胡 提取物 得率

1、緒論

柴胡原名茈胡，是我國傳統中藥，始載于《神農本草經》[1]。柴胡為傘形科植物柴胡或狹葉柴胡的干燥根，其性味苦涼，有解表退熱，疏肝解郁，升舉陽氣等功效[2-4]。柴胡主含柴胡皂甙，其次含有黃酮類成分、植物甾醇、側金盞花醇、以及少量揮發(fā)油。研究表明，柴胡具有鎮(zhèn)痛、止痛、降溫、鎮(zhèn)咳、抗炎抗菌[5]、保肝利膽、降血壓、抗病毒、抗腫瘤等藥理活性。其中柴胡皂苷對多種致炎劑所致踝關節(jié)腫和結締組織增生性炎癥均有抑制作用；柴胡多糖具有促進免疫功能的作用[6-8]。

2、實驗部分

2.1 實驗材料、試劑及儀器

2.1.1 實驗藥材。柴胡為傘形科柴胡屬，購于中藥材市場，經哈爾濱商業(yè)大學藥學院楊玉山工程師鑒定為道地藥材。

2.1.2 實驗試劑。超純水、無水乙醇、甲醇、正丁醇、石油醚。

2.1.3 實驗儀器。電熱鼓風干燥箱、旋轉蒸發(fā)儀RE-52AA分析天平、循環(huán)水式多用真空泵SHB-Ⅲ、單孔智能水浴鍋HH-ZK1、雙孔智能水浴鍋HH-ZK2

2.2 實驗內容與方法

2.2.1 柴胡提取工藝優(yōu)化

2.2.1.1 柴胡粗體提取總過程。取柴胡粉末10g，置于250ml圓底燒瓶中，加8倍量的90%乙醇，80℃加熱回流1h，抽濾，旋轉蒸發(fā)得到乙醇濃縮液[9]，用石油醚萃取2次，棄石油醚層，提取液用水飽和的正丁醇溶液萃取，萃取液減壓濃縮，將濃縮液置瓷坩堝中待干燥。

2.2.1.2 柴胡乙醇濃度考察。用不同體積分數（90%、80%、70%、60%）的乙醇對柴胡進行粗提，篩選出提取物得率最大的乙醇體積分數。

2.2.1.3 柴胡單因素考察。柴胡提取實驗中，對提取溫度、料液比、提取時間、提取次數和提取溶劑這五種單因素進行實驗，其中藥材柴胡粉末的用量始終為10g。其中單因素按照單因素實驗如表1中設計的。

2.2.1.4 正交實驗。采用L9（34）正交試驗，以柴胡提取物得率最多為評價指標，選擇提取溶劑為A，提取時間為B，提取溫度為C，來考查各因素條件下的柴胡提取物得率。如表2。

2.2.1.5 柴胡最佳提取工藝驗證結果

以最佳工藝進行提取柴胡，得到的提取物需經驗證再確定為最佳提取工藝。

2.3 實驗結果與討論

2.3.1 柴胡乙醇濃度考察結果。經分析，隨著乙醇體積分數的減少得率逐漸減小，而乙醇體積分數為90%的時候，由于乙醇濃度太大導致柴胡的提取物得率小于乙醇濃度為80%的時候。所以選擇80%乙醇進行以下實驗。

2.3.2 柴胡單因素考察結果

2.3.2.1 料液比篩選結果。經分析，隨著料液比的比例增大柴胡提取物得率逐漸增多，料液比1：7的柴胡提取物得率明顯大于其他料液比柴胡提取物得率，應選料液比1：7 進行正交實驗。

2.3.2.2 提取時間篩選結果。經分析，隨著提取時間的延長，柴胡提取物得率呈增多趨勢，所以選取提取時間60-120min作正交實驗的條件。

2.3.2.3 提取溫度篩選結果。經分析，隨著溫度的升高柴胡提取物得率呈減少趨勢，選取取溫度70-80℃作正交實驗的條件。

2.3.2.4 提取次數篩選結果。經分析，隨著提取次數的增加柴胡提取率呈減少趨勢，提取次數為1的柴胡提取物得率明顯大于其他的柴胡提取物得率，說明應選提取次數為1進行正交實驗。

2.3.2.5 提取溶劑篩選結果。經分析，三種提取溶劑的柴胡提取物得率相差不多，三種溶劑都作為考察因素進行正交實驗。

2.3.3 柴胡正交考察結果。通過直觀的分析，以柴胡的最大提取物得率為參考標準，由極差R值可以看出，提取時間對柴胡提取物得率影響最大，其次是提取溫度，提取溶劑影響最小。

優(yōu)化方案的確定：基于此實驗是以提取物得率為考查指標，對于A因素（提取溶劑）：K2>K1>K3，；對于B因素：K2>K1>K3；C因素：K2>K3>K1。所以，最優(yōu)方案為A2B2C2，即提取溶劑為80%乙醇，提取時間為90min，提取溫度為75℃，料液比1：7。

2.3.4 柴胡最佳提取工藝驗證結果。以最佳工藝進行提取柴胡，得到的提取物的得率均為18.5% ，經驗證為最佳提取工藝。

2.3.5 討論。本實驗以柴胡為研究對象，將提取物得率作為考察指標，對其提取過程進行單因素考察和正交實驗，篩選出最佳提取工藝。

根據以往柴胡的提取工藝研究，分別選出以提取溫度、料液比、乙醇體積分數、提取時間、提取次數、提取溶劑為單因素考察因素。確定各因素水平相。

根據柴胡單因素考察結果各實驗組的提取物得率。篩選因素、水平范圍據此設計正交實驗。根據實驗結果選取提取溫度、提取溶劑、提取時間為四因素三水平實驗考察因素。提取溫度確定范圍為70-80℃、提取溶劑確定范圍為甲醇、80%乙醇、蒸餾水，提取時間確定范圍為60-120min。

通過正交實驗結果分析得出，柴胡提取的最佳工藝條件：提取溫度75℃，料液比1：7，80%乙醇，提取時間90min。并且在最優(yōu)工藝條件下柴胡提取物得率可達18.5%。為進一步深入研究柴胡奠定了基礎。

參考文獻：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：263-264.