張皎月，郗志華

(太原市第四人民醫(yī)院，山西 太原　030053)

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三種方法聯(lián)合檢查對(duì)結(jié)核性胸膜炎診斷價(jià)值的探討

張皎月，郗志華

(太原市第四人民醫(yī)院，山西 太原030053)

[摘要]目的：探討癌胚抗原、TB-DNA及TB-SA三種方法聯(lián)合檢查在結(jié)核性胸膜炎中的診斷價(jià)值。方法：回顧分析依以上三種方法確診的胸膜炎患者，結(jié)核性胸膜炎患者33例，癌性胸膜炎患者32例，確定各種方法的靈敏度、特異度。結(jié)果：癌性胸膜炎組患者癌胚抗原表達(dá)明顯高于結(jié)核性胸膜炎組，結(jié)核性胸膜炎組TB-DNA、TB-SA明顯高于癌性胸膜炎組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。癌胚抗原、TB-DNA、TA-SA的靈敏度分別為87.9%、72.7%、69.7%，三者聯(lián)合的靈敏度為93.9%。結(jié)論：三種方法聯(lián)合檢測(cè)能明顯提高診斷率，值得臨床推廣應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞]結(jié)核性胸膜炎； 癌胚抗原； TB-PCR ； TB-SA

我國(guó)是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家, 發(fā)病率僅次于印度，也是世界衛(wèi)生組織(WHO)認(rèn)定的27個(gè)耐多藥及廣泛耐藥結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一[1]。目前估計(jì)有500萬(wàn)活動(dòng)性肺結(jié)核患者，每年由結(jié)核病導(dǎo)致的死亡人數(shù)大約有5萬(wàn)，相當(dāng)于每天就有144人死亡[2]。結(jié)核性胸膜炎是結(jié)核病中的一大類(lèi)， 由結(jié)核分枝桿菌代謝產(chǎn)物刺激和(或)其直接進(jìn)入胸膜腔中所導(dǎo)致的炎癥，約占胸腔積液病因的30%～60%[3]。目前用常規(guī)方法來(lái)診斷結(jié)核性胸膜炎有較大難度，影像學(xué)檢查較易發(fā)現(xiàn)，但定性困難，誤診誤治情況時(shí)有發(fā)生，胸膜活檢、胸水查抗酸桿菌及細(xì)胞病理學(xué)檢查陽(yáng)性率均很低。因此，尋找簡(jiǎn)單、高效、快速的方法來(lái)正確診斷，有效指導(dǎo)臨床。

1資料與方法

1.1臨床資料

選取2012年1月～2014年10月于太原市第四人民醫(yī)院確診的65例胸膜炎患者，通過(guò)結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性的胸膜炎患者33例，男20例，女13例，年齡20～69歲，平均(45.3±4.5)歲；經(jīng)胸水細(xì)胞病理學(xué)檢查為癌性胸膜炎者32例，男18例，女14例，年齡35～68歲，平均(46.3±5.6)歲，兩組患者的年齡、性別等一般情況無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)癌胚抗原(CEA)選取貝克曼生產(chǎn)的腫瘤標(biāo)志物試劑盒和貝克曼庫(kù)爾特ACCESS2化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，依照說(shuō)明書(shū)的操作方法，對(duì)胸水癌胚抗原定量檢測(cè)。

1.2.2聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PCR)檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌DNA(TB-DNA)采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供的結(jié)核分枝桿菌核酸檢測(cè)試劑(PCR-熒光法)，對(duì)胸水中結(jié)核分枝桿菌DNA進(jìn)行分析。

1.2.3酶聯(lián)免疫測(cè)定結(jié)核抗體(TB-SA)成都永安制藥有限公司生產(chǎn)的結(jié)核分枝桿菌抗體(IgG)檢測(cè)試劑盒， 按照說(shuō)明，取患者胸水標(biāo)本檢測(cè)，判定胸水中的TB-SA。

1.3判定標(biāo)準(zhǔn)

a) CEA檢測(cè)范圍0～6 ng·mL-1；b) DA-620儀器：在實(shí)驗(yàn)有效的前提下，樣品Ax>N+0.6×(P1-N)判為陽(yáng)性：如果N+0.6×(P1-N)≥Ax≥N+0.4×(P1-N)則屬于實(shí)驗(yàn)灰度區(qū)，需重復(fù)實(shí)驗(yàn)一次，如重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果Ax值≥N+0.4×(P1-N)判為陽(yáng)性，否則判為陰性；如果Ax值﹤N+0.4×(P1-N)判為陰性；c) 用酶標(biāo)儀在單波長(zhǎng)450 nm(雙波長(zhǎng)450 nm/630 nm)下測(cè)定各孔OD值。OD值應(yīng)大于0.80。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS13.0軟件對(duì)兩組患者的檢查指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1四種方法的陽(yáng)性率在兩組患者中的對(duì)比

經(jīng)比較，結(jié)核性胸膜炎組TB-DNA、TB-SA陽(yáng)性率高于癌性胸膜炎組，癌性胸膜炎組患者癌胚抗原陽(yáng)性率高于結(jié)核性胸膜炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=29.91，P=0.00)。且TB-PCR、TB-SA及CEA方法的陽(yáng)性率最高，與TB-PCR方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.34，P=0.02)，與TB-SA方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.51，P=0.01)，與CEA方法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=35.72，P=0.00)。見(jiàn)表1。

表1　四種方法的陽(yáng)性率在兩組患者中的對(duì)比　　%

注：1)與癌性胸膜炎組比較，P<0.05

2.2四種檢測(cè)方法的靈敏度與特異度對(duì)比

TB-PCR，TB-SA，CEA，TB-PCR、TB-SA及CEA四種檢查方法的靈敏度分別為72.7%、69.7%、87.9%、93.9%，特異度分別為93.8%、68.8%、78.1%、87.5%。其中CEA的靈敏度較高，為87.9%，TB-PCR、TB-SA及CEA的靈敏度最高，為93.9%，與其他單項(xiàng)檢查比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2　四種檢測(cè)方法的靈敏度與特異度對(duì)比　%

3討論

本研究主要討論TB-PCR，TB-SA，CEA及TB-PCR、TB-SA和CEA聯(lián)合檢查對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值，以期對(duì)臨床提供快速、簡(jiǎn)單、有效的幫助。該實(shí)驗(yàn)采用的是熒光定量PCR，體外擴(kuò)增檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌基因。檢測(cè)對(duì)象是結(jié)核分枝桿菌基因保守片段，動(dòng)態(tài)檢查結(jié)核分枝桿菌含量，不受細(xì)胞表型和耐熱性影響[4]。本研究的靈敏度為72.7%，特異度為93.8%，與報(bào)道的靈敏度、特異度相符[4]。出現(xiàn)假陰性的原因可能是胸水中菌量少，胸水中有一些細(xì)菌代謝物，標(biāo)本中含有TaqDNA抑制物[5]，操作過(guò)程有污染，有一些是非結(jié)核分枝桿菌。出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因可能是選擇的研究對(duì)象有關(guān)，抵抗力低原發(fā)病灶受到侵蝕。本法快速，方便，靈敏度，特異度高，對(duì)結(jié)核性胸膜炎有診斷價(jià)值。

結(jié)核分枝桿菌分泌性酸性磷酸酯酶(TB-SA),是由加拿大多倫多劉軍教授發(fā)現(xiàn)。TB-SA只在結(jié)核分枝桿菌中分泌，并且這種抗原在大腸桿菌中大量表達(dá)和提純[6],TB-SA基因的表達(dá)只有進(jìn)入人體巨噬細(xì)胞內(nèi)才能發(fā)生，從而排除卡介苗接種和非結(jié)核分枝桿菌的影響[7]。本研究的靈敏度為69.7%，特異度為68.8%。與報(bào)道的靈敏度、特異度相符[6]。假陰性的原因可能是患者的抵抗力低，抗體滴度低，受免疫復(fù)合物的影響，處于患者窗口期。假陽(yáng)性的原因可能是，患者是攜帶者，無(wú)臨床癥狀，檢測(cè)的人群不一樣。本法快速，方便，簡(jiǎn)單，對(duì)結(jié)核性胸膜炎有一定的診斷價(jià)值。

CEA是一種復(fù)雜的糖蛋白，某些良性疾病(包括結(jié)核病)和正常人只能少量合成或分泌，主要存在于多種腫瘤細(xì)胞表面及體液中[8，9]，其含量的測(cè)定可輔助診斷腫瘤。CEA因其分子量大不易進(jìn)入血液循環(huán)，因此惡性胸腔積液中的CEA水平升高比血清出現(xiàn)得更早、更顯著。從實(shí)驗(yàn)中看出，惡性胸腔積液CEA陽(yáng)性率明顯高于結(jié)核組，有顯著性差異(P<0.05)。該實(shí)驗(yàn)的靈敏度為87.9%，特異度為78.1%。因此，可以認(rèn)為，胸水CEA的增高可以作為惡性胸腔積液的一個(gè)主要診斷標(biāo)準(zhǔn)。

本研究結(jié)果顯示：癌性胸膜炎組患者癌胚抗原表達(dá)明顯高于結(jié)核性胸膜炎組，結(jié)核性胸膜炎組患者的TB-DNA、TA-SA指標(biāo)明顯高于癌性胸膜炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中TB-PCR、TB-SA及CEA聯(lián)合檢查的陽(yáng)性率高達(dá)93.9%，與其他單項(xiàng)檢查比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

綜上所述，TB-PCR、TB-SA及CEA聯(lián)合檢查診斷結(jié)核性胸膜炎有較大臨床意義。

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本文編輯：王知平

[中圖分類(lèi)號(hào)]R446.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1671-0126(2016)01-0029-02

[作者簡(jiǎn)介]張皎月，女，檢驗(yàn)師，從事臨床檢驗(yàn)工作