李兵　羅利玲　賴大年

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不同TNM分期胃癌組織中S100P、CD147及OCT4的表達(dá)及意義研究

李兵羅利玲賴大年

【摘要】目的探討不同TNM分期胃癌組織中S100P、CD147及OCT4的表達(dá)及臨床意義。方法通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)54例胃癌組織、40例慢性胃炎和20例正常胃組織的S100P、CD147及OCT4的表達(dá)情況，并比較胃癌組織不同TNM分期的表達(dá)水平。結(jié)果胃癌組織中S100P表達(dá)陽(yáng)性率顯著低于正常組織和慢性胃炎組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ;胃癌組織中CD147、OCT4表達(dá)陽(yáng)性率均高于正常組織和慢性胃炎組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ; S100PⅤ期陽(yáng)性率顯著低于Ⅰ、Ⅱ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ; CD147各分期陽(yáng)性率均為100%，其中強(qiáng)陽(yáng)性率顯著高于弱陽(yáng)性和中等陽(yáng)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ; OCT4Ⅲ期、Ⅴ期陽(yáng)性率均高于Ⅰ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ;有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者S100P、表達(dá)陽(yáng)性率顯著低于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ;有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者OCT4表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。不同分化程度胃癌患者S100P、CD147、OCT4表達(dá)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論胃癌組織中S100P顯著降低，CD147、OCT4表達(dá)顯著升高，與胃癌患者TNM分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，與腫瘤分化程度無(wú)關(guān)。

【關(guān)鍵詞】胃癌; TNM分期; S100P; CD147; OCT4;表達(dá);臨床意義

胃癌屬于臨床常見(jiàn)惡性腫瘤之一，由于人們飲食習(xí)慣、生活習(xí)慣的改變，該病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年遞增的趨勢(shì)。近幾年，隨著免疫學(xué)和分子生物學(xué)的快速發(fā)展，腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤腫瘤的鑒別診斷、預(yù)后評(píng)估及隨診等方面起著重要作用［1］。胃癌患者的生存率和治療方案與腫瘤分期密切相關(guān)，及早發(fā)現(xiàn)及早治療有助于改善患者預(yù)后［2］。本研究分析了不同TNM分期胃癌組織中S100P、CD147及OCT4的陽(yáng)性表達(dá)情況，旨在為臨床治療和診斷提供參考依據(jù)。報(bào)告如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇我院2012年4月至2014年1月經(jīng)病理確診存檔的54例胃癌組織、40例慢性胃炎組織和20例正常胃組織作為研究對(duì)象，均為男性，54例胃癌患者年齡37～77歲，平均年齡(58±4)歲;根據(jù)美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)制定的TNM分期分為［3］:Ⅰ期8例，Ⅱ期14例，Ⅲ期15例，Ⅴ期17例;遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移25例，無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移29例;分化程度根據(jù)Gleason評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)分為［4］:低分化21例，中分化24例，高分化9例。40例慢性胃炎患者年齡35～79歲，平均年齡(58±4) 歲;20例門(mén)診健康體檢者均為男性，年齡30～75歲，平均年齡(57±5)歲。

1.2入選與排除標(biāo)準(zhǔn)(1)入選標(biāo)準(zhǔn):①取組織前未進(jìn)行放療、化療或者激素治療;②患者臨床分期、病理分級(jí)等一般資料齊全;③經(jīng)術(shù)后病理報(bào)告確認(rèn)為胃癌。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他器官惡性腫瘤;②病例資料不完整者。

1.3方法

1.3.1實(shí)驗(yàn)材料: SP免疫組化試劑盒、顯色試劑盒購(gòu)自美國(guó)GIBCO公司，鼠抗人CD147單抗、兔抗人S100P單抗和兔抗人OCT4單抗均購(gòu)自北京百晶生物技術(shù)有限公司;胃癌組織、慢性胃炎組織及正常胃組織標(biāo)本均來(lái)自本院病理科。

1.3.2檢測(cè)方法:54例胃癌組織、40例慢性胃炎組織和20例正常胃組織進(jìn)行常規(guī)HE染色和免疫組化分析，操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.3陽(yáng)性判斷:將胃癌陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。每張切片隨機(jī)選取5個(gè)不同視野計(jì)數(shù)，并進(jìn)行平均值計(jì)算，所得結(jié)果為染色結(jié)果。染色結(jié)果評(píng)分采取陽(yáng)性細(xì)胞百分比和染色強(qiáng)度評(píng)分進(jìn)行計(jì)算。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞占切片內(nèi)正常細(xì)胞或者全部腫瘤細(xì)胞的比例，其中陽(yáng)性著色細(xì)胞數(shù)＜5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，＞50%為3 分;細(xì)胞著色強(qiáng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):未著色為0分，中度著色為1分，高度著色為2分。染色結(jié)果評(píng)分的總分值為陽(yáng)性細(xì)胞百分比和染色強(qiáng)度評(píng)分的乘積，其中0～1分為陰性(－)，2～分為弱陽(yáng)性(+ )，3～4分為中等陽(yáng)性(++ )，5～6分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++ )。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，不同組別比較采用方差分析，兩兩比較采用Bonferroni法，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.13組對(duì)象S100P、CD147、OCT4陽(yáng)性表達(dá)情況胃癌組織中S100P表達(dá)陽(yáng)性率為18.52%，顯著低于正常組織和慢性胃炎組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ;胃癌組織中CD147表達(dá)陽(yáng)性率為100%，顯著高于正常組織和慢性胃炎組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05 ) ;胃癌組織中OCT4表達(dá)陽(yáng)性率為77.38%，顯著高于正常組織和慢性胃炎組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。S100P陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色顆粒，主要集中在癌細(xì)胞胞質(zhì)和胞核內(nèi)中; CD147蛋白陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色顆粒，集中分布在癌細(xì)胞胞核當(dāng)中，胞漿表達(dá)少見(jiàn); OCT4陽(yáng)性表達(dá)呈棕深棕色顆粒，主要集中在癌細(xì)胞胞核當(dāng)中，少量表達(dá)于胞漿中。見(jiàn)表1，圖1～3。

表1　3組對(duì)象S100P、CD147、OCT4陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果比較例(%)

圖1　S100P在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)(SP×400)

圖2　CD147在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)(SP×400)

圖3　OCT4在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)(SP×400)

2.2胃癌組不同TNM分期S100P、CD147、OCT4陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果比較S100PⅤ期陽(yáng)性率為0，顯著低于Ⅰ期(37.50%)和Ⅱ期(35.71%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ; CD147各分期陽(yáng)性率均為100%，其中強(qiáng)陽(yáng)性率為57.41%，顯著高于弱陽(yáng)性和中等陽(yáng)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ; OCT4Ⅲ期、Ⅴ期陽(yáng)性率為86.67%、94.12%，均高于Ⅰ期(37.50%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2　胃癌組不同TNM分期S100P、CD147、OCT4陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果比較　例

2.3胃癌組織遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移S100P、CD147、OCT4陽(yáng)性率比較有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者S100P表達(dá)陽(yáng)性率為4.00%，顯著低于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ;有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者OCT4表達(dá)陽(yáng)性率為92.00%，顯著高于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3　胃癌組織遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移S100P、CD147、OCT4陽(yáng)性率比較例(%)

2.4胃癌組不同分化程度S100P、CD147、OCT4表達(dá)陽(yáng)性率比較不同分化程度胃癌患者S100P、CD147、OCT4表達(dá)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表4。

表4　胃癌組不同分化程度S100P、CD147、OCT4表達(dá)陽(yáng)性率比較例(%)

3　討論

近幾年，胃癌發(fā)病率逐年升高。目前以化療除聯(lián)合根治性胃切除術(shù)的綜合治療方案取得了顯著效果，尤其是一些早期患者的預(yù)后得到明顯改善。但是臨床調(diào)查顯示，17%～51%的胃癌會(huì)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，6%～21%出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)［5］。目前，對(duì)胃癌患者預(yù)后具有評(píng)估價(jià)值的分子標(biāo)記較多，如生長(zhǎng)素、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1等，為胃癌的臨床治療及患者預(yù)后評(píng)估提供了有效參照。

本研究中，筆者重點(diǎn)分析了不同TNM分期胃癌組織中S100P、CD147及OCT4的表達(dá)及臨床意義。Joghetaei等［6］的研究中提示通過(guò)cDNA微陣列技術(shù)檢測(cè)胃癌組織中的基因表達(dá)譜，顯示S100P在胃癌中沒(méi)有表達(dá)。在本研究中發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中S100P表達(dá)陽(yáng)性率為18.52%，顯著低于正常組織和慢性胃炎組織，提示在胃癌中S100P表達(dá)呈明顯下調(diào)現(xiàn)象，與相關(guān)研究結(jié)果［7］基本一致。分析不同TNM分期胃癌組織看出，Ⅴ期S100P陽(yáng)性率為0，顯著低于Ⅰ期(37.50%)和Ⅱ期(35.71%)，提示，S100P表達(dá)與胃癌分期有密切關(guān)系，隨分期增加，其陰性表達(dá)率越來(lái)越高，與臨床研究［8］一致。有研究顯示，過(guò)表達(dá)S100P細(xì)胞中的雄激素受體表達(dá)明顯增加，雄激素受體與細(xì)胞增殖關(guān)系密切，從而促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移［9］。本研究顯示，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者S100P表達(dá)陽(yáng)性率為4.00%，顯著低于無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者S100P下調(diào)現(xiàn)象顯著。

CD147是細(xì)胞表面黏附分子，健康人群中的CD147水平一般較低，常在甲狀腺癌、乳腺癌、喉鱗癌、肝癌以及子宮頸腺癌等惡性腫瘤中表達(dá)，最初主要對(duì)乳腺癌進(jìn)行鑒別診斷，隨著研究的逐步深入發(fā)現(xiàn)，CD147在胃癌中也可表達(dá)，因此對(duì)胃癌患者的診斷和預(yù)后評(píng)估也具有一定價(jià)值。本研究中，胃癌組織中CD147表達(dá)陽(yáng)性率達(dá)到了100%，顯著高于正常組織和慢性胃炎組織。同時(shí)本研究還發(fā)現(xiàn)，CD147以強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)為主，占57.14%。研究發(fā)現(xiàn)，CD147能夠增強(qiáng)基質(zhì)金屬蛋白酶的合成與分泌，而基質(zhì)金屬蛋白酶具有破壞細(xì)胞間質(zhì)成分和細(xì)胞外基底膜的作用，促使腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移及侵襲［10］。本研究中，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移胃癌CD147陽(yáng)性表達(dá)率為100%，表明CD147高表達(dá)率與胃癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。不過(guò)，CD147陽(yáng)性表達(dá)率與分化程度并無(wú)密切關(guān)系，與眾多研究結(jié)果［11］一致。

OCT4為一種POU轉(zhuǎn)錄因子，在未分化胚胎癌、生殖干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞中呈高表達(dá)，對(duì)于保持胚胎干細(xì)胞的自我更新和多潛能性具有極為重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，OCT4健康人群中OCT4陽(yáng)性表達(dá)較低，在膽囊癌、胰腺癌、肝癌等呈高表達(dá)，而且隨著患者臨床分期增加，其陽(yáng)性表達(dá)率顯著升高，尤其是在胰腺癌患者中，OCT4敏感性較高，但其表達(dá)情況與胰腺癌分化程度無(wú)顯著相關(guān)性［12］。本研究顯示，胃癌組織中OCT4表達(dá)陽(yáng)性率為77.38%，顯著高于正常組織和慢性胃炎組織，且OCT4Ⅲ期、Ⅴ期陽(yáng)性率為86.67%、94.12%，顯著高于Ⅰ期。研究結(jié)果表明，OCT4陽(yáng)性表達(dá)率與患者TNM分期有密切關(guān)系，與文獻(xiàn)研究成果［13］一致。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)不同分化程度胃癌患者OCT4表達(dá)陽(yáng)性率較為接近，提示OCT4表達(dá)與胃癌分化程度無(wú)密切關(guān)系，與王克畏等［14］的研究一致。

綜上所述，胃癌組織中S100P顯著降低，CD147、OCT4表達(dá)顯著升高，與患者TNM分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，與分化程度無(wú)關(guān)。受人力、財(cái)力等因素影響，本研究并未分析S100P、CD147、OCT4表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系，在隨后的研究當(dāng)中應(yīng)擴(kuò)大樣本量，明確S100P、CD147、OCT4是否與其他因素共同作用影響患者預(yù)后，從而為臨床治療提供參考依據(jù)。

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·論著·

Expression and significance of S100P，CD147 and OCT4 in different stages of TNM of gastric cancer

LI Bing，LUO Liling，LAI Danian.
Chang’an Hospital of Xi＇an City，Shangxi，Xi’an 710016，China

【Abstract】Objective To investigate the expression and significance of S100P，CD147 and OCT4 in different stages of TNM of gastric cancer.MethodsThe expression levels of S100P，CD147 and OCT4 were detected by immunohistochemistry in 54 cases of gastric cancer，40 cases of chronic gastritis and 20 cases of normal gastric tissues，and the expression levels in different stages of TNM of gastric cancer were observed and compared.Results The positive expression rate (18.52%) of S100P in gastric cancer tissues was significantly lower than that in normal gastric tissues and chronic gastritis tissues (P＜0.05)，however，the positive expression rates (100%) of CD147 and OCT4 (77.38%) were significantly higher than those in normal tissues and chronic gastritis tissues (P＜0.05).The positive rate (0) of S100P in stageⅤwas significantly lower than that in stage I (37.50%) and in stageⅡ(35.71%) (P＜0.05).The positive rates of CD147 in different stages of TNM were all 100%，in which the strong positive rate was significantly higher than weak positive rate and moderate positive rate (P＜0.05).The positive rate of OCT4 in stageⅢand in stageⅤwas significantly higher than that in stageⅠ(P＜0.05).The positive expression rate of S100P in patients with distant metastasis was significantly lower than that of patients without distant metastasis (P＜0.05)，however，the positive expression rate of OCT4 in patients with distant metastasis was significantly higher than that of patients without distant metastasis (P＜0.05).There were no significant differences in positive expression rates of S100P，CD147，OCT4 in patients with different differentiation degrees (P＞0.05).ConclusionThe expression levels of S100P in gastric tissues are significantly decreased，however，the expression levels of OCT4 and CD147 are significantly increased，which is closely correlated to TNM staging and distant metastasis of patients with gastric cancer，but which is not related with tumor’s differentiation degree.

【Key words】gastric cancer; TNM staging; S100P; CD147; OCT4; expression; clinical significance

(收稿日期:2015－09－16)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2016.04.003

【中圖分類號(hào)】R 735.2

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1002－7386(2016) 04－0492－04

作者單位: 710016陜西省西安市長(zhǎng)安醫(yī)院