霍 立　劉艷妮（.福安藥業(yè)集團(tuán)重慶禮邦藥物開發(fā)有限公司，重慶　40；.成都金百裕醫(yī)藥有限責(zé)任公司，四川　成都　630）

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氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)檢測對(duì)甲苯磺酸酯類雜質(zhì)

霍 立1劉艷妮2
（1.福安藥業(yè)集團(tuán)重慶禮邦藥物開發(fā)有限公司，重慶401121；2.成都金百裕醫(yī)藥有限責(zé)任公司，四川成都611130）

摘要：建立了氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定對(duì)甲苯磺酸拉帕替尼中的對(duì)甲苯磺酸甲酯、對(duì)甲苯磺酸乙酯和對(duì)甲苯磺酸異丙酯。采用6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細(xì)管柱，以衍生技術(shù)和頂空進(jìn)行技術(shù)相結(jié)合，質(zhì)譜法檢測。對(duì)甲苯磺酸甲酯、對(duì)甲苯磺酸乙酯和對(duì)甲苯磺酸異丙酯分別在0.040μg/mL～2.203μg/mL、0.125μg/mL～6.877μg/mL和0.002μg/mL～0.109μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為99.6%、98.2%和103.8%，定量限均為0.001μg/mL。

關(guān)鍵詞：對(duì)甲苯磺酸甲酯；對(duì)甲苯磺酸乙酯；對(duì)甲苯磺酸異丙酯；氣相色譜；對(duì)甲苯磺酸拉帕替尼

對(duì)甲苯磺酸烷基酯，如對(duì)甲苯磺酸甲酯和對(duì)甲苯磺酸乙酯，是對(duì)甲苯磺酸與甲醇，乙醇，或其它低級(jí)醇形成的酯。對(duì)甲苯磺酸烷基酯會(huì)被視為潛在基因毒性雜質(zhì)，這些物質(zhì)可與DNA發(fā)生烷基化反應(yīng)，從而可能成為引發(fā)癌癥的誘因。由于拉帕替尼在生產(chǎn)過程中使用了對(duì)甲苯磺酸、甲醇、乙醇和異丙醇，反應(yīng)過程中易生成對(duì)甲苯磺酸甲酯，對(duì)甲苯磺酸乙酯，對(duì)甲苯磺酸異丙酯。本試驗(yàn)采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測檢測這三種雜質(zhì)。

1 儀器

Agilent6890-5973GC/MS氣質(zhì)聯(lián)用儀。

2 對(duì)照品

對(duì)甲苯磺酸甲酯（分析純），對(duì)甲苯磺酸乙酯（分析純），對(duì)甲苯磺酸異丙酯（分析純），對(duì)甲苯磺酸丁酯（分析純）。

3 色譜條件

色譜柱：以6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細(xì)管柱（長：30m，內(nèi)徑：0.32mm，膜厚：1μm）。

載氣：氦氣。

流速：2.0mL/min。

進(jìn)樣口溫度：220℃。

頂空條件：平衡溫度60℃；平衡時(shí)間30min。

柱程序升溫：初始柱溫40℃，保持3分鐘，以每分鐘5℃的速度升到220℃，保持5分鐘。

質(zhì)譜檢測參數(shù)：電子轟擊（EI）離子源，電離能量70eV，離子源溫度230℃，SIM掃描模式，分別選擇質(zhì)荷比（m/z）為142、156、170、184的離子進(jìn)行檢測。

4 溶液配制

稀釋劑：水—乙腈（50∶50）。

溶液A：稱取120g碘化鈉，60mg無水硫代硫酸鈉溶于少量水中，再用水定容至100mL量瓶中。

內(nèi)標(biāo)液：精密量取100μL對(duì)甲苯磺酸正丁酯用稀釋劑稀釋至100mL，搖勻，精密量取該液20μL用稀釋劑稀釋至100.0mL，搖勻即得。

供試品溶液：取本品適量（約相當(dāng)于拉帕替尼25mg），精密稱定，置于20mL頂空瓶，加入0.50mL溶液A和0.50mL內(nèi)標(biāo)液，密封，搖勻。

對(duì)照品溶液（a）：分別精密稱取400mg的對(duì)甲苯磺酸甲酯、1250.0mg的對(duì)甲苯磺酸乙酯和18.0mg的對(duì)甲苯磺酸異丙酯，用甲苯稀釋至10.0mL。精密量取50μL該液用內(nèi)標(biāo)液稀釋定容至25.0mL。

對(duì)照品溶液（b）：精密量取100μL對(duì)照品溶液（a）用內(nèi)標(biāo)液稀釋至100mL，取1.0mL該液和1.0mL溶液A于20mL頂空瓶中，密封，搖勻。

對(duì)照品溶液（c）：精密量取500μl對(duì)照品溶液（a）用內(nèi)標(biāo)液稀釋至20.0mL，取1.0mL該液和1.0mL溶液A于20mL頂空瓶中，密封，搖勻。

表1

5 方法驗(yàn)證

（1）系統(tǒng)適用性考察

①靈敏度試驗(yàn)。取對(duì)照品溶液（b）進(jìn)樣，記錄色譜圖。結(jié)果各目標(biāo)峰的信噪比均遠(yuǎn)大于10。

②進(jìn)樣重復(fù)性試驗(yàn)。取對(duì)照品溶液（c）5份，分別進(jìn)樣檢測，各溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比值的RSD均小于5.0%，各溶劑峰保留時(shí)間均小于1.0%。

（2）專屬性

分別對(duì)甲苯磺酸甲酯、對(duì)甲苯磺酸乙酯、對(duì)甲苯磺酸異丙酯和對(duì)甲苯磺酸正丁酯適量，制得對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣。專屬性考察結(jié)果表明，各目標(biāo)峰之間分離度良好，無其他分子量相同的雜質(zhì)干擾測定，該方法專屬性強(qiáng)。

（3）定量限

試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示：對(duì)甲苯磺酸甲酯、對(duì)甲苯磺酸乙酯和對(duì)甲苯磺酸異丙酯定量限濃度均為0.001μg/mL；即樣品檢測濃度為25mg/mL時(shí)，樣品中含有0.004ppm的對(duì)甲苯磺酸甲酯、對(duì)甲苯磺酸乙酯和對(duì)甲苯磺酸異丙酯均能被定量檢出。

（4）線性范圍

對(duì)甲苯磺酸甲酯在0.040μg/m L ～2.203μg/mL濃度范圍內(nèi)線性方程：y＝9.958x＋0.591，相關(guān)系數(shù)：r＝0.9989；對(duì)甲苯磺酸乙酯在0.125μg/mL～6.877μg/mL濃度范圍內(nèi)線性方程：y＝9.187x＋1.297，相關(guān)系數(shù)：r＝0.9992；對(duì)甲苯磺酸異丙酯在0.002μg/mL～0.109μg/mL濃度范圍內(nèi)線性方程：y＝6.254x＋0.010，相關(guān)系數(shù)：r＝0.9995。

（5）精密度考察

①重復(fù)性考察。分別配制供試品溶液6份，依法檢測。對(duì)甲苯磺酸甲酯平均含量為0.15ppm，RSD為1.8%，對(duì)甲苯磺酸乙酯平均含量為3.42ppm，RSD為2.3%，對(duì)甲苯磺酸異丙酯平均含量為0.06ppm，RSD為4.6%。

②中間精密度考察。在同一實(shí)驗(yàn)室，由不同操作者，于不同日期進(jìn)行檢測。對(duì)甲苯磺酸甲酯平均含量為0.13ppm，RSD 為1.4%，對(duì)甲苯磺酸乙酯3.53ppm，RSD 為3.1%，對(duì)甲苯磺酸異丙酯0.05ppm，RSD為3.4%。

（6）回收率

分別配制相當(dāng)于進(jìn)樣濃度80%、100%、120%的加標(biāo)供試品溶液，每個(gè)濃度配制3份。分別進(jìn)樣檢測，計(jì)算回收率。對(duì)甲苯磺酸甲酯、對(duì)甲苯磺酸乙酯、對(duì)甲苯磺酸異丙酯的回收率分別為99.6%、98.2%、103.8%。

（7）樣品檢測

取樣品，依法測定，結(jié)果見表1。

參考文獻(xiàn)

[1] 2.5.38 methyl,ethyl and isopropyl methanesulfonate in active substances EUROPEAN PHARMACOPOEIA 7.3.

[2]化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S].

中圖分類號(hào)：TQ460.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A