黔東南民族職業(yè)技術(shù)學(xué)院(556001)楊珍
1.1 藥材 藥材鉤藤來(lái)源于貴州省黔東南苗族侗族自治州劍河縣。
1.2 儀器 美國(guó)Supelco公司生產(chǎn)的手動(dòng)固相微萃取裝置,萃取頭是2cm~50/30um DVB/CAR/PDMS StableFlex纖維頭。美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)的HP6890/5975C GC/MS聯(lián)用儀。
1.3 方法
1.3.1 提取方法 取新鮮的鉤藤樣品5g左右,粉碎至0.2cm左右,放入10ml固相微萃取儀采樣瓶中,密封,將裝有2cm~50/30um DVB/CAR/PDMS StableFlex纖維頭的手動(dòng)進(jìn)樣器插入,然后,于約85℃頂空萃取30min,迅速取出,并馬上插進(jìn)氣相色譜儀進(jìn)樣口中,溫度為250℃,熱解析3min,進(jìn)樣。
1.3.2 氣相色譜條件 色譜柱是A B-5 M S彈性石英毛細(xì)管柱5%P h e n y l-9 5%D i M e t h y l p o l y s i l o x a n e(3 0 m×0.25mm×0.25μm),柱溫為40℃,保留時(shí)間是2min,以4℃/min升溫到180℃,維持2min的時(shí)間;汽化室的溫度為250℃;載氣是高純氦(9 9.9 9 9%);柱前壓為7.62psi,載氣流量為1.0mL/min;進(jìn)樣不分流;溶劑的延遲時(shí)間為2.0min。
1.3.3 質(zhì)譜條件 離子源是:EI源;離子源的溫度為:230℃;四極桿的溫度為:150℃;電子能量為:70eV;發(fā)射電流為:34.6μA;倍增器的電壓為:1518V;接口的溫度為:280℃;質(zhì)量范圍是:20~450amu。利用Wiley275和Nist2005標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖進(jìn)行檢索核對(duì)化合物。
1.3.4 定性、定量方法 用質(zhì)譜計(jì)算機(jī)中的數(shù)據(jù)系統(tǒng)對(duì)總離子流圖的各個(gè)峰進(jìn)行檢索,并用Wiley275和Nist2005標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖進(jìn)行核對(duì),分別測(cè)定了各個(gè)樣品中所含的揮發(fā)性化合物,各化合物的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)采用峰面積歸一化法進(jìn)行測(cè)定。
根據(jù)上述檢測(cè)鑒定條件,采用固相微萃取技術(shù)從鉤藤帶鉤莖和鉤藤葉中分別萃取其揮發(fā)性化合物后,采用上述條件下的GC—MS技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分析,得出鉤藤帶鉤莖和鉤藤葉各自的總粒子流圖。各個(gè)色譜峰的揮發(fā)性成分都各有一個(gè)特定的質(zhì)譜峰,運(yùn)用質(zhì)譜計(jì)算機(jī)中的數(shù)據(jù)系統(tǒng)進(jìn)行檢索和標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖Nist2005和Wiley275進(jìn)行解析,分別確定了各個(gè)揮發(fā)性成分,并采用峰面積歸一化法測(cè)定其相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
鉤藤帶鉤莖的揮發(fā)性成分主要為醇、醛、烯類(lèi),主要有:己醇(31.552%)、順-3-己烯-1-醇(10.174%)、1-辛烯-3-醇(8.298%)、反-2-己烯醛(8.91%)、β-石竹烯(2.061%),占其揮發(fā)性成分總量的79.11%。鉤藤葉的揮發(fā)性成分主要為醇類(lèi),主要有:己醇(45.986%)、順-3-己烯-1-醇(22.827%),占其揮發(fā)性成分總量的75.16%。
本次實(shí)驗(yàn)采用固相微萃取技術(shù)(SPME)對(duì)鉤藤帶鉤莖、葉中的揮發(fā)性成分進(jìn)行提取,此提取方法具有不需要溶劑、操作簡(jiǎn)單、效率高等優(yōu)點(diǎn);并通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)其成分進(jìn)行鑒定。鉤藤帶鉤莖中分離鑒定了50種揮發(fā)性成分,葉中分離鑒定了26種揮發(fā)性成分,兩者共有揮發(fā)性成分19種,在共有成分中,己醇、順-3-己烯-1-醇在鉤藤帶鉤莖、葉中的含量均較高,己醇含量分別為31.552%、45.986%,順-3-己烯-1-醇含量分別為10.174%、22.827%;9種成分在葉中的含量高于在帶鉤莖中的含量。以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,鉤藤帶鉤莖和葉中所含揮發(fā)性成分存在差異,為合理應(yīng)用鉤藤莖和葉提供了參考依據(jù)。