張力心

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淺議生化類體外診斷試劑開瓶穩(wěn)定性

張力心

【摘要】目的 探討對檢測結(jié)果的影響，為生化試劑的臨床使用提供必要的參考。方法 選取3種生化試劑盒，以朗道質(zhì)控品為檢測樣本，用深圳邁瑞B(yǎng)S-800全自動生化分析儀進(jìn)行檢測，觀察開瓶時間對檢測結(jié)果的影響。結(jié)果 開瓶時間對總蛋白和肌酐的正確度影響較大。結(jié)論試劑開瓶后應(yīng)密閉低溫儲存，盡快使用，且每次檢測前應(yīng)重新校準(zhǔn)。

【關(guān)健詞】開瓶穩(wěn)定性；體外診斷試劑；正確度

作者單位：401147 重慶醫(yī)療器械質(zhì)量檢驗(yàn)中心；重慶市醫(yī)療器械質(zhì)量與安全控制工程技術(shù)研究中心

隨著我國檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，生化試劑已成為化學(xué)試劑的一大類。目前，我國共有診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)400多家，共生產(chǎn)商品2 000多種［1］?，F(xiàn)階段由于各廠家的生產(chǎn)規(guī)模、技術(shù)水平和產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，且生化試劑受熱、受潮、受光后，試劑中的某些組分易分解、失活，于是造成生化類試劑保存期較短，儲存條件也比較苛刻。然而，基層醫(yī)院由于業(yè)務(wù)量較小，試劑開瓶后往往需要較長時間才能使用完。為了分析試劑在開瓶后放置在全自動生化分析儀中的時間長短對檢測結(jié)果的影響，本文對總蛋白試劑盒（TP）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒（ALT）、肌酐檢測試劑盒（Cre）進(jìn)行了開瓶穩(wěn)定性研究，旨在對生化試劑的臨床使用提供必要的參考。

1　材料與方法

1.1儀器

BS-800全自動生化分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)）。

1.2材料

選取3種劑盒，進(jìn)行開瓶穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，試劑盒信息見表1，校準(zhǔn)品為朗道復(fù)合校準(zhǔn)血清（批號：938UN），質(zhì)控品為朗道復(fù)合質(zhì)控血清（批號：725UE），TP、ALT、Cre的參考值分別為46.0 g/L、 139 U/L、366 μmol/L。

1.3方法［2-5］

將上述試劑置入生化分析儀中，使儀器處于開機(jī)狀態(tài)以保持試劑盤溫度，每天測定質(zhì)控品3次，取平均值作為檢測結(jié)果。觀察試劑檢測結(jié)果的變化，以相對偏差超出10%為失控的判斷標(biāo)準(zhǔn)。相對偏差的計算公式為：

2　結(jié)果

將3種試劑連續(xù)測定21 d，檢測結(jié)果見表2。

3　討論

3.1總蛋白試劑盒

從表2可看出，試劑前7 d的檢測結(jié)果基本無變化；一周后，檢測結(jié)果隨時間的增加開始逐漸減??；到21 d時，檢測結(jié)果的相對偏差達(dá)到約10%的臨界點(diǎn)，說明該TP試劑的開瓶有效期為21 d。分析原因，由于TP試劑盒采用雙縮脲反應(yīng)原理，蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)類似的肽鍵，堿性條件下，雙縮脲可與Cu2+生成紫色的絡(luò)合物，NaOH在反應(yīng)中的作用為營造堿性的反應(yīng)環(huán)境。當(dāng)試劑開瓶后置于生化儀后，空氣中的CO2會不斷溶入試劑，中和其中的NaOH，使試劑的pH值下降，從而影響紫色絡(luò)合物的生成，導(dǎo)致檢測結(jié)果的降低。

3.2丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒

從表2可看出，試劑開瓶21 d后，檢測結(jié)果無變化，相對偏差較小，說明開瓶時間對試劑檢測結(jié)果的正確度基本無影響。但將放置21 d后的試劑進(jìn)行線性范圍檢驗(yàn)時發(fā)現(xiàn)，該試劑盒的線性上限由800 U/L下降至300 U/L，線性范圍變小。分析原因，可能是由于試劑中的NADH組分的保存溫度為-20℃，易被空氣中的氧氣氧化，從而導(dǎo)致底物濃度不足，線性范圍變小。

表1　試劑盒的基本信息

表2　試劑盒開瓶穩(wěn)定性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.3肌酐檢測試劑盒

從表2可看出，該試劑盒的檢測結(jié)果隨開瓶時間的增加而逐漸變大，相對偏差在15 d時接近10%的臨界點(diǎn)。分析原因，該肌酐檢測試劑盒采用苦味酸法，在堿性條件下，肌酐與苦味酸生成橘紅色的苦味酸-肌酐復(fù)合物，NaOH在反應(yīng)中的作用為提供堿性的反應(yīng)環(huán)境，使血清樣本中的肌酐和其它干擾物質(zhì)與苦味酸的反應(yīng)速度不同，從而準(zhǔn)確的測定肌酐。當(dāng)試劑開瓶后置于生化儀后，空氣中的CO2與試劑中的NaOH反應(yīng)，使試劑的抗干擾能力下降，測試結(jié)果為肌酐與干擾物濃度之和，因此試劑盒放置時間越長，檢測結(jié)果偏大越明顯。

4　結(jié)論

當(dāng)試劑中含有堿性物質(zhì)時，長時間放置于生化分析儀中，空氣中的CO2會逐漸消耗掉試劑中的堿性成分，從而影響檢測結(jié)果的正確度。因此對此類試劑，每次使用之后應(yīng)蓋緊瓶蓋，避免接觸空氣。由于生化分析儀的試劑盤的溫度范圍一般為5℃～15℃，因此，當(dāng)試劑中含有NADH之類的對溫度敏感的組分時，試劑使用后應(yīng)放置在2℃～8℃冰箱中儲存，并盡快使用。否則試劑在檢測高值樣本時，結(jié)果的正確度將不能保證。試劑開瓶7 d左右，檢測前應(yīng)重新校準(zhǔn)，以提高檢測結(jié)果的正確度。

參考文獻(xiàn)

［1］ 毛省俠，郭準(zhǔn)． 淺談體外診斷試劑質(zhì)量體系中企業(yè)參考品的管理［J］． 中國醫(yī)療器械信息，2011，17（10）: 46-53．

［2］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜． 全國臨床檢驗(yàn)手冊［M］． 南京: 東南大學(xué)出版社，2006: 452-456．

［3］ 王霞文． 臨床生化檢驗(yàn)技術(shù)［M］． 南京：南京大學(xué)出版社，1995: 180-182．

［4］ 陸永綏，李清華，張偉民． 臨床檢驗(yàn)自動化分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程［M］．浙江：浙江大學(xué)出版社，2006: 9．

［5］ GB/T 26124-2011，臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）［S］． 2011．

Analyzing on the Operation Life of Biochemical Diagnostic Kits

ZHANG LixinChongqing Quality Chongqing Quality Testing and Inspection Center for Medical Devices；Chongqing Engineering Research Center For Quality and Safety Control of Medical Devices，Chongqing 401147，China

【Abstract】

Objective By studying on the influence of decapping time on results，this paper offers a guidance on clinical application of biochemical diagnostic kits． Methods With the Randox control serum as the sample，correctness of decapping time on results is tested by mindray’s BS-800 automatic biochemical analyzer． Results Decapping time of total protein and creatinine reagent greatly affect the testing results． Conclusion Having been decapped，the reagent should be stored in low temperature，and a calibration test should be run．

【Key words】Decapping life，In-vitro diagnostic kit，Correctness

通訊作者：張力心，E-mail：372619420@qq．com

doi:10．3969/j．issn．1674-9316．2016．01．099

【中圖分類號】R97

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1674-9316（2016）01-0135-02