孫麗麗

哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠 150000

頂空氣相色譜法在中藥檢測中的應(yīng)用分析

孫麗麗

哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠 150000

本文主要對頂空氣相色譜法在重要檢測中的實(shí)際應(yīng)用進(jìn)行分析，并探討頂空氣相色譜法在測定中藥材中揮發(fā)性成分方面的相關(guān)研究，以準(zhǔn)確把握頂空氣相色譜法的實(shí)際作用，僅供醫(yī)藥行業(yè)人士參考。

頂空氣相色譜法；中藥檢測；應(yīng)用

頂空氣相色譜法是當(dāng)前醫(yī)藥學(xué)中比較常見的一種儀器分析方式，其在實(shí)際應(yīng)用中具有高選擇性，分析速度較快，檢測靈敏度較高，有效的減少樣品基質(zhì)對分析的干擾，在重要檢測中具有良好的應(yīng)用價值。因此加大力度探討頂空氣相色譜法在中藥檢測中的實(shí)際應(yīng)用，為中藥安全提供可靠的理論依據(jù)和測定方式。

1 頂空氣相色譜法

頂空氣相色譜法也稱作液上氣相色譜分析，是一種現(xiàn)代化的聯(lián)合操作技術(shù)，在實(shí)際應(yīng)用中，當(dāng)檢測條件和檢測溫度一定時，進(jìn)樣針對固體、氣體和液體進(jìn)行萃取吸附，并在氣相色譜分析儀上進(jìn)行脫附注射，具體的萃取過程基于固相微萃取平臺展開操作。頂空氣相色譜法具有高柱效、高選擇性和高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)，分析速度較快，適應(yīng)范圍廣泛，但其在實(shí)際應(yīng)用中也存在一定不足，其僅適用于可揮發(fā)且熱穩(wěn)定的樣品。在一定條件下，頂空氣相色譜法能夠?qū)崿F(xiàn)上下兩相之間的平衡分配，進(jìn)而對氣相成分進(jìn)行分析和測定，達(dá)到檢測凝聚相中部分組成。頂空分析在氣相色譜法中具有良好的應(yīng)用效果，能夠有效的減少樣品基質(zhì)對分析結(jié)果的干擾。通常情況下，在中藥檢測中，頂空氣相色譜法的應(yīng)用，對平衡溫度、平衡時間、加壓時間和取樣時間等都有著嚴(yán)格的要求。

2 頂空氣相色譜法在中藥安全性檢測中的實(shí)際應(yīng)用

當(dāng)前社會科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，中藥制劑也更具現(xiàn)代化特征，藥品提取方式以及純化手段不斷發(fā)展應(yīng)用，但提取溶劑所帶來的殘留導(dǎo)致中藥藥品面臨著嚴(yán)峻的安全問題。尤其是在中藥材加工過程中，部分不法商家為謀取最大利益，以硫熏蒸的方式保持藥材外觀鮮亮，但藥材內(nèi)部殘留大量的硫，藥物存在嚴(yán)重的安全隱患，嚴(yán)重威脅著社會群體的用藥安全。

2.1 頂空氣相色譜法測定大孔吸附樹脂的殘留物

打孔吸附樹脂是一類有機(jī)高聚物吸附劑，屬于一種分離材料，實(shí)現(xiàn)吸附性與分子篩選性原理的有機(jī)結(jié)合，其物理化學(xué)穩(wěn)定性較高，吸附容量較大，吸附速度快，便于再生處理，使用周期較長。但大孔樹脂是由苯乙烯、二苯乙烯及致孔劑懸浮聚合，最終去孔制劑而成。在實(shí)際合成過程中，孔隙內(nèi)部存在一定量的未聚合單體物質(zhì)和致孔劑等殘留物，影響用藥安全，因此在中藥檢測過程中應(yīng)當(dāng)對藥品中的未聚合單體物質(zhì)等殘留物及裂解產(chǎn)物進(jìn)行限量檢查，這一操作過程中頂空氣相色譜法是最佳的檢測方式，具有精準(zhǔn)可靠的檢測效果。

王焱等研究人員通過溶劑提取方式和頂空法開展中藥檢測實(shí)驗(yàn)，以乙苯為內(nèi)標(biāo)，對中藥復(fù)方制劑加參片中可能村仔的甲苯、二甲苯、苯乙烯等有機(jī)殘留物進(jìn)行測定，測定結(jié)果顯示，HP-INNOWAX色譜柱與弱極性HP-5色譜柱相比，具有良好的應(yīng)用效果，能夠同時對8個殘留物進(jìn)行有序分離，通過對頂空法的合理運(yùn)用，最大程度上避免溶劑及雜質(zhì)峰對測定結(jié)果的影響，并降低了難揮發(fā)性物質(zhì)所造成的污染，提高了中藥樣品的處理效果。

姚干等研究人員采用弱極性HP-5石英毛細(xì)管柱為中藥檢測方式，將頂空溫度控制在85℃，選用二甲亞砜作為實(shí)驗(yàn)溶劑，對大孔吸附數(shù)值分離純化后的梔子提取物中可能含有的苯、甲苯等殘留物進(jìn)行準(zhǔn)確測定，并以極性石英毛細(xì)管柱配合 1%的甲醇溶劑對梔子提取物中的二甲苯、苯乙烯等殘留物進(jìn)行測定。測定結(jié)果顯示，中藥藥品中未檢測出殘留物。

2.2 空氣相色譜法在中藥殘留溶劑檢測中的應(yīng)用

張宏等測定水飛薊提取物中的正己烷和醋酸乙酯的殘留量。試驗(yàn)采用FFAT(2-硝基對苯二甲酸封端的聚乙二醇20M柱)石英毛細(xì)管柱，程序升溫方式，頂空條件為平衡溫度為130℃，平衡時間30min，測定結(jié)果表明水飛薊提取物中兩種溶劑殘留量均符合要求。

吳秀蘭等采用HP-5毛細(xì)管柱，柱溫40℃，ECD檢測器，頂空瓶加熱溫度45℃，平衡時間50 min，以0.05 mol／L氫氧化鈉水溶液為溶解介質(zhì)，測定中藥一類新藥大黃酸原料中三氯甲烷及其溶劑雜質(zhì)二氯甲烷、l，2-二氯乙烷與四氯化碳的殘留量。結(jié)果表明：測得各組分在所考查的濃度范圍內(nèi)具有良好線性，三氯甲烷、二氯甲烷、l，2-二氯乙烷與四氯化碳的最低檢出濃度分別為 3.0、24.0、7.5、0.2μ/L。三批大黃酸原料樣品測定結(jié)果符合要求。

鄭金琪等采用HP-INNOWax毛細(xì)管柱，程序升溫方式，頂空瓶加熱溫度105 o C，平衡時間30min，以二甲基甲酰胺為溶劑，測定紫杉醇原料藥中石油醚(60-90℃)、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、甲苯和吡啶的殘留量。結(jié)果表明，8種有機(jī)溶劑完全分離。結(jié)果3批樣品均未檢出丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯和甲苯，僅檢出微量石油醚(60-90℃)、甲醇、二氯甲烷和吡啶，各溶劑殘留量均符合規(guī)定。

2.3 空氣相色譜法在中藥外源性雜質(zhì)引入的檢測

廖遠(yuǎn)熹等采用靜態(tài)頂空氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)鑒別市售柴胡是否經(jīng)硫黃熏制，試驗(yàn)采用HP-5MS毛細(xì)管色譜柱，程序升溫方式，以氦氣為載氣，頂空溫度120℃，預(yù)熱30min，質(zhì)譜條件為EI電離方式，電子能量70eV，離子阱150℃，質(zhì)量掃描范圍41-500ainu。結(jié)果表明：與未經(jīng)硫黃熏制的陰性樣品比較，9種市售柴胡中有7種經(jīng)過了不同程度的熏制，該方法可廣泛應(yīng)用于中藥材硫黃的檢出。

3 空氣相色譜法測定中藥材中揮發(fā)性成分

陳建偉等采用HP—17聚甲基苯基硅氧烷(含50%苯基)石英彈性毛細(xì)管柱，頂空溫度95℃，平衡5-10 min，用以鑒定牡丹皮中丹皮酚。結(jié)果表明，儲藏期對牡丹皮中揮發(fā)性成分丹皮酚含量影響較大，并可采用此方法對牡丹皮同屬芍藥根皮及與牡丹皮氣味相近的徐長卿加以區(qū)分。

FangqiuGuo等采用頂空固相微萃取聯(lián)用氣相色譜-質(zhì)譜法對同科藥用植物白術(shù)及蒼術(shù)的揮發(fā)性成分進(jìn)行比較。試驗(yàn)采用聚二甲基硅氧烷毛細(xì)管柱，提取條件以總峰面積為指標(biāo)進(jìn)行優(yōu)化，試驗(yàn)條件為提取溫度70℃，平衡時間30min，萃取時間30min，解吸附時間4min。試驗(yàn)結(jié)果表明，白術(shù)中36個成分占了總峰面積的 90.72%，其中蒼術(shù)酮含量最高，達(dá)到 40.12%；蒼術(shù)中 56個成分占了總峰面積的 90.38%，其中 eudesma-4(14)，ll-diene最高，達(dá)到16.49%；研究還表明共有23個成分是兩種植物共有的。此方法可用于比較白術(shù)與蒼術(shù)的異同。

隨著中藥的飛速發(fā)展，中藥現(xiàn)代化的實(shí)施，大孔吸附樹脂也越來越多應(yīng)用于中藥提取的分離純化。為保證用藥安全，控制大孔樹脂殘留物及殘留溶劑將是一項(xiàng)重中之重的工作，綜上所述，目前大部分藥品及原料藥中未檢出殘留物，但也有少量殘留物檢出，檢出的殘留應(yīng)符合ICH《藥品注冊的國際技術(shù)要求》規(guī)定。

4 結(jié)束語

總而言之，頂空氣相色譜法在中藥檢測中具有良好的應(yīng)用價值，其能夠有效的減少對毛細(xì)管色譜柱的污染，廣泛應(yīng)用于大孔吸附樹脂殘留物及溶劑殘留等中藥安全性檢查中，應(yīng)用效果明顯，去除樣品中難揮發(fā)性物質(zhì)的干擾，提高中藥安全性檢測的準(zhǔn)確性和可靠性，切實(shí)保障社會群體用藥安全。

[1]劉冰 頂空氣相色譜法在中藥檢測中的應(yīng)用[J].《天津藥學(xué)》2010, 22(4):54-57

[2]周麗麗，陸兔林 頂空氣相色譜法在中藥研究中的應(yīng)用[J].《宜春學(xué)院學(xué)報》, 2010, 32(12):4-5

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1672-5018（2016）11-233-01