田　力

遼寧調(diào)兵山市鐵法煤集團總院神經(jīng)外科　調(diào)兵山　112700

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不同級別腦膠質(zhì)瘤中TGF-β1 SRF及波形蛋白表達水平及意義

田力

遼寧調(diào)兵山市鐵法煤集團總院神經(jīng)外科調(diào)兵山112700

【摘要】目的探討不同級別腦膠質(zhì)瘤中轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、血清應答因子(SRF)及波形蛋白表達水平及意義。方法分析40例腦膠質(zhì)瘤患者的臨床資料。結果研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達率分別為65.0%(26/40)、45.0%(18/40)、77.5%(31/40)，均顯著高于對照組的26.7%(8/30)、13.3%(4/30)、7.1%(2/30)(P<0.05)，腫瘤級別Ⅲ+Ⅳ級患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率分別為77.3%(17/22)、63.6%(14/22)、86.4%(19/22)，均顯著高于Ⅰ+Ⅱ級患者的50.0%(9/18)、22.2%(4/18)、66.7%(12/18)(P<0.05)，TGF-β1與SRF、SRF與波形蛋白均呈顯著正相關(P<0.05)。結論腦膠質(zhì)瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表達水平顯著提升，與其惡性程度顯著相關。

【關鍵詞】不同級別腦膠質(zhì)瘤；TGF-β1；SRF；波形蛋白

SRF屬于MADS轉(zhuǎn)錄因子家族成員，從進化上來說具有高度保守性。相關研究表明，SRF能夠?qū)α⒃缁?、細胞骨架、黏附相關基因等的表達進行有效調(diào)控。最新研究表明，胃癌、肝癌等多種惡性腫瘤中均具有較高的SRF表達水平，同時還具有較高的間質(zhì)標記物波形蛋白表達水平及較低的上皮標記物E-鈣黏蛋白表達水平，而通常情況下該過程發(fā)生的前提條件為生長因子信號活化和調(diào)控，如TGF-β1。相關研究表明[1]，SRF能夠為腫瘤細胞對間質(zhì)細胞表型的獲取提供良好的前提條件，直接而深刻地影響著腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤。本研究對40例腦膠質(zhì)瘤患者的臨床資料進行分析，探討不同級別腦膠質(zhì)瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表達水平及意義，報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料運用隨機抽樣方法選取我院2011-01—2014-09收治的40例腦膠質(zhì)瘤患者為研究組，均接受手術切除治療，均經(jīng)病理確診為腦膠質(zhì)瘤，均知情同意；男23例，女17例，年齡14～77歲，平均(47.5±10.2)歲；病程1～3 a，平均(1.1±0.4)a。Ⅰ級2例，Ⅱ級16例，Ⅲ級13例，Ⅳ級9例。另選取我院同期收治的30例腦膠質(zhì)瘤患者的膠質(zhì)瘤旁正常腦組織標本為對照組，男18例，女12例，年齡14～77歲，平均(43.6±10.7)歲；病程1～3 a，平均(1.0±0.3)a。2組一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2方法依次常規(guī)石蠟切片、HE染色、組織學觀察。以厚度為5 μm連續(xù)切片，分別將Santa Cruz 公司生產(chǎn)的抗TGF-β1(sc-146)、SRF(sc-335)及EPITOMICS 公司生產(chǎn)的波形蛋白抗體(2707-1)加入其中，采用SP法試劑盒(SP-9001，SP-9002)進行免疫組織化學染色，抗體濃度均為1%，對其進行熱修復，修復過程中運用枸鹽酸。購買北京中山金橋生物技術有限公司生產(chǎn)的試劑盒ZLI-9031進行DAB顯色。TGF-β1陽性的標準為有棕黃色顆粒出現(xiàn)在細胞質(zhì)內(nèi)，SRF和波形蛋白表達分別在細胞核定位、主要為胞漿，通常情況下絲狀、索狀條紋為其主要表達[2]。400倍視野下認真細致地觀察10個視野，細胞個數(shù)為100個/視野，計算陽性細胞百分比。依據(jù)4級計分：陽性細胞數(shù)在10%以下，計0分；陽性細胞數(shù)10%～25%，計1分；陽性細胞數(shù)26%～50%，計2分；陽性細胞數(shù)51%～75%，計3分；陽性細胞數(shù)75%以上，計4分[3]。染色強度評分標準：無色、淡黃色、棕黃色、棕色或棕褐色分別為0分、1分、2分、3分。陽性標準為兩者乘積至少為4分[4]。

1.3統(tǒng)計學分析運用Excel將數(shù)據(jù)庫，采用統(tǒng)計學軟件SPSS 20.0進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用率(%)表示，組間比較行χ2檢驗，相關性分析采用Spearman相關系數(shù)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.12組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達水平比較研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達率均顯著高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1　2組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性

注：與對照組比較，*P<0.05

2.2研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達的影響因素研究組腫瘤級別Ⅲ+Ⅳ級患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率均顯著高于Ⅰ+Ⅱ級(P<0.05)，但不同性別、年齡、腦腫瘤部位、腫瘤大小患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2　研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達

注：與Ⅰ+Ⅱ級比較，*P<0.05

2.3研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白表達的相關性分析研究組TGF-β1與SRF、SRF與波形蛋白均呈顯著正相關(P<0.05)。見表3。

表3　研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白表達的

3討論

膠質(zhì)瘤屬于一種顱內(nèi)腫瘤，臨床極為常見，主要特點為侵襲性生長，手術很難完全切除，同時，放化療會受到膠質(zhì)瘤細胞的抵抗，一定程度上造成患者術后具有較高的復發(fā)率及病死率。相關研究表明[5]，含有血清應答元件的人類基因有300個，占全部基因組的1%左右。可以看出，SRF的作用之一是多種轉(zhuǎn)錄調(diào)控。SRF在細胞內(nèi)結合DNA的CArG-box的形式為同源二聚體。近年來，相關研究表明[6]，SRF在多種腫瘤組織中表達較高?？梢钥闯?，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展進程中，SRF的主要作用為調(diào)控；TGF-β1會為腫瘤進展及侵襲提供良好的前提條件，這一事實已得到臨床普遍認可，其在多種腫瘤細胞及組織中的表達均較高，直接而深刻地影響腫瘤血管的生成、增值及侵襲。Zhang等[7]研究表明，在高級別和低級別腦膠質(zhì)瘤中，TGF-β1分別達到93.8%和43.10%的陽性表達率，高級別腦膠質(zhì)瘤的TGF-β1陽性表達率顯著高于低級別腦膠質(zhì)瘤，同時其表達隨著微血管密度的提升而提升，降低而降低。體外研究也表明[8]，TGF-β1刺激膠質(zhì)瘤SHG-44細胞及U251細胞能夠?qū)毎w移進行明顯誘導；波形蛋白直接而深刻地影響腦膠質(zhì)瘤的增值、轉(zhuǎn)移及患者預后等，因此，臨床普遍認為其可作為一種腫瘤標志物。現(xiàn)階段，其作為一種間質(zhì)標記物得到臨床普遍認可，在腫瘤細胞獲取遷移及侵襲能力過程中發(fā)揮至關重要的作用[9-10]。在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中，神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白表達不同于兩種中間絲結構蛋白波形蛋白，通常情況下，波形蛋白在膠質(zhì)瘤細胞惡性轉(zhuǎn)化的診斷中可能能夠作為一項重要的參考指標[11-12]。本研究表明，研究組TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性表達率均顯著高于對照組(P<0.05)，腫瘤級別Ⅲ+Ⅳ級患者TGF-β1、SRF及波形蛋白陽性率均顯著高于Ⅰ+Ⅱ級(P<0.05)，TGF-β1與SRF、SRF與波形蛋白均呈顯著正相關(P<0.05)，充分說明了腦膠質(zhì)瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表達水平顯著提升，與其惡性程度顯著相關。

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(收稿2015-01-15)

【中圖分類號】R739.41

【文獻標識碼】A

【文章編號】1673-5110(2016)03-0065-02