葉萃英 洪書遲 趙昕峰? 吳亦棟

·檢測診斷·

腸道病毒EV71和CA16感染患兒的體液免疫功能分析

葉萃英 洪書遲 趙昕峰? 吳亦棟

目的 探討腸道病毒EV71和CA16感染患兒的體液免疫功能與臨床病情的關(guān)系。方法 對2014年10月至2015年7月260例手足口病患兒資料進(jìn)行回顧性分析，其中CA16陽性80例，EV71陽性180例，EV71陽性根據(jù)病情分為重癥組80例和輕癥型100例，以同期健康體檢的兒童100例作為健康對照組。用免疫比濁法測定免疫球蛋白lgG、IgM、IgA及補(bǔ)體C3、C4水平，采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)。結(jié)果 EV71感染手足口病重癥組患兒的IgG、lgM、IgA、C3、C4水平的中位數(shù)分別為7.510、1.295、0.520、1.170、0.410 g/L，輕癥組患兒的IgG、lgM、IgA、C3、C4水平的中位數(shù)分別為7.985、1.460、0.580、1.120、0.420，分別與對照組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。其中重癥組IgG、lgA低于輕癥組，lgM、C3、C4高于輕癥組。EV71感染手足口病組血清免疫球蛋白lgM高于CA16感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 EV71感染手足口病患兒的體液免疫功能受到了影響，導(dǎo)致免疫球蛋白lgG和IgA降低，IgM及補(bǔ)體C3、C4水平增高，且與病情的輕重相關(guān)。

EV71 CA16 體液免疫

手足口?。╤and，foot and mouth disease，HFMD）是由腸道病毒引起，兒童的常見急性傳染病，主要經(jīng)糞-口和呼吸道途徑傳播。多數(shù)患兒臨床癥狀輕微，以發(fā)熱和手、足、口腔、臀部等部位的皮疹或皰疹為主要臨床表現(xiàn)，少數(shù)重癥患兒則可累及神經(jīng)系統(tǒng)并出現(xiàn)心肺癥狀，甚至導(dǎo)致死亡［1］。臨床上以腸道病毒71型（enterovirus 71，EV71）和柯薩奇病毒CA16（coxsackievirus A16，CoxA16）感染最為常見，其中EV71感染引起的HFMD病情進(jìn)展迅速，易合并中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，是重癥HFMD的最主要致病病原體［2-3］。本文就本院2014年10月至2015年7月收治的180例EV71陽性，80例CA16陽性HFMD患兒的免疫球蛋白IgG、lgA、IgM及補(bǔ)體C3、C4水平進(jìn)行分析，探討EV71感染后患兒體液免疫功能的變化。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2014年10月至2015年7月本院收治的手足口患兒260例，其中男158例，女102例，年齡8個(gè)月至8歲。260例患兒中CA16陽性80例，EV71陽性180例，EV71陽性根據(jù)病情分為重癥組（伴腦炎型）80例和輕癥型（無腦炎型）100例，診斷及分度標(biāo)準(zhǔn)均符合衛(wèi)生部頒布的手足口病預(yù)防控制指南（2010 年版）［4］。同時(shí)選取同期在本院健康體檢的兒童100例作為正常對照組，其中男55例，女45例，年齡10個(gè)月至9歲，近期無免疫性疾病，近1個(gè)月無免疫球蛋白使用史。4組患兒的性別和年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 手足口病患兒入院后分別采集清晨空腹靜脈血3 ml，離心后取血清，用免疫比濁法檢測免疫球蛋白IgG、lgA、IgM及補(bǔ)體C3、C4。檢測儀為日立7600型全自動(dòng)生化分析儀：試劑為進(jìn)口德國diasys diagnostic systems gmb（IgG、lgA、IgM）和芬蘭orion診斷公司（C3、C4）公司提供，所有操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，試劑且均在有效期內(nèi)使用。定標(biāo)液均由各自品牌提供原裝進(jìn)口自帶定標(biāo)液，質(zhì)控品均由各自品牌提供原裝進(jìn)口定值質(zhì)控。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS l9.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以“M（P25，P75）”表示，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EV71感染手足口病重癥組、輕癥組和正常組的體液免疫的結(jié)果分析 EV71感染手足口病重癥組患兒的IgG、lgM、IgA、C3、C4水平的中位數(shù)分別為7.510、1.295、0.520、1.170、0.410 g/L，輕癥組患兒的IgG、lgM、IgA、C3、C4水平的中位數(shù)分別為7.985、1.460、0.580、1.120、0.420 g/L，分別與對照組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。其中重癥組血清免疫球蛋白IgG、lgA低于輕癥組，血清免疫球蛋白lgM、補(bǔ)體C3、C4高于輕癥組。見表1。

表1 EV71感染手足口病重癥組、輕癥組和正常組的體液免疫結(jié)果分析［g/L，M（P25，P75）］

2.2 手足口病EV71感染組與CA16感染組的體液免疫的結(jié)果分析 EV71感染手足口病患兒的免疫球蛋白IgM的中位數(shù)（1.340g/L）高于CA16感染組（1.040 g/L），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其他項(xiàng)目水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 手足口病EV71感染組與CA16感染組的體液免疫的結(jié)果分析［g/L，M（P25，P75）］

3 討論

手足口病主要是由腸道病毒（以柯薩奇病毒A組16型、腸道病毒71型為主）引起的具有特征性皮疹和口腔黏膜損害的一種臨床綜合征，常引發(fā)重癥危機(jī)患兒的生命。手足口病傳染性強(qiáng)，可在短期內(nèi)造成大流行，該病的傳染源主要是人，包括患者和健康攜帶者，主要通過消化道、呼吸道和密切接觸等途徑傳播。

Liu等［5］認(rèn)為手足口病的轉(zhuǎn)歸與兒童機(jī)體免疫狀況可能存在一定關(guān)系。IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是再次免疫應(yīng)答的主要抗體，具有中和游離外毒素和病毒，調(diào)理吞噬細(xì)胞的吞噬作用，在機(jī)體免疫防護(hù)中起主要作用。IgA是黏膜屏障的重要組成部位，能抑制病原體和有害抗原粘附在黏膜上，阻擋其進(jìn)入體內(nèi)，同時(shí)具有調(diào)理吞噬和溶解作用，對防御病原體入侵起到關(guān)鍵作用。lgM是高效能的抗微生物抗體，可以結(jié)合補(bǔ)體，在抗全身感染中發(fā)揮重要的作用。C3和C4都屬于補(bǔ)體固有成分，通常在于血液或其他體液中以非活性狀態(tài)存在，在感染早期發(fā)揮重要的抗病毒作用。通過對手足口患兒感染發(fā)病后進(jìn)行血清免疫球蛋白及補(bǔ)體水平的檢測，發(fā)現(xiàn)EV71感染手足口患兒重癥組和輕癥組血清免疫球蛋白水平與正常值比較差異具有顯著性，其中血清IgG、IgA水平降低，而IgM，補(bǔ)體C3、C4水平明顯升高，提示腸道病毒感染可以引起機(jī)體體液免疫的改變，這與劉亞敏等［6］報(bào)道一致。重癥組的血清免疫球蛋白IgG、IgA相對輕癥組更低，而IgM，補(bǔ)體C3、C4水平相對更高，提示體液免疫的變化與病情嚴(yán)重與否有關(guān)。

EV71組IgM水平高于CA16組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示EV71感染后免疫系統(tǒng)反應(yīng)較CoxA16感染后明顯活躍。其機(jī)制可能與EV71 具有顯著的嗜神經(jīng)性，可通過神經(jīng)通路侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)分泌肽分泌紊亂，而部分神經(jīng)內(nèi)分泌肽可通過神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)通路，對體液免疫起到調(diào)節(jié)作用有關(guān)［7-8］。

綜上所述，手足口病患兒存在體液免疫功能紊亂，應(yīng)及時(shí)監(jiān)測免疫球蛋白的變化，對于患兒病情判斷、及時(shí)治療具有重要的指導(dǎo)作用。

［1］ Huang CC, Liu CC, Chang YC, et al． Neurologic complications in children with enterovirus 7l infection．N Engl J Med,1999, 341(13): 936-942．

［2］ Solomon T, Lewthwaite P, Perera D, et al． Virology, epidemiology, pathogenesis,and control of entemvirus 71． Lancet Infect Dis,2010, 10(11):778-790．

［3］ 吳亦棟,尚世強(qiáng),陳志敏,等．手足口病病原體流行特征分析及臨床意義．中華兒科雜志,2010,48(7):535-539．

［4］ 中華人民共和國衛(wèi)生部．手足口病診療指南(2010年版),2010．

［5］ Liu SC,Lee PI,Lee CY,et al．Differem cytokine levels ill entemvirus meningitis and encephalitis J． Infect Dis Chn Pract, 2005,13(5):241-246．

［6］ 劉亞敏,王春妍,宋立文,等．手足口病患兒體液免疫檢測分析．臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,8(8):73-74．

［7］ Sun LM,Zheng HY,Zheng HZ,et al．An enterovirus 71 epidemic in Guangdong Province of China,2008:epidemiological,clinical, and virogenic manifestations． Jpn J InfectDis,2011,64(1):13-18．

［8］ 田野,予毅,葉寧,等,手足口病合并病毒性腦膜炎160例臨床分析．江蘇醫(yī)藥,2010,36(2):220-221．

Objective To explore the relationship between humoral immune function and clinical condition in children with intestinal virus EV71 and CA16 infection. Methods Retrospective analysis of July October 2014 to 2015 Hangzhou children's Hospital of 260 cases of hand，foot and mouth disease in children with data，80 cases of positive CA16，180 cases were positive for EV71 EV71 infection according to the illness points severe group（80 cases）and mild type（100 cases），in the same period in 100 cases of children health examination in our hospital as a healthy control group. The levels of immunoglobulin C4，IgM，IgA and complement C3 and lgG were measured by the immune assay，and the data were analyzed by U Mann-Whitney test. Results The humoral immune function in children with hand foot and mouth disease EV71 infection affected，led to the immunoglobulin lgG and IgA decreased，IgM increased and complement C3，C4 level，and related with the severity of disease. Conclusions EV71 infection in children with hand，foot and mouth disease in children's humoral immune function was affected，leading to the immunoglobulin lgG and IgA decreased，IgM and complement C3，C4 level increased，and with the severity of the disease.

EV71 CA16 Humoral immunity

杭州市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（20150633B20）

310014 杭州市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科

*通信作者