薛　露， 單鳴秋， 張　麗， 丁安偉

（南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心，中藥資源產(chǎn)業(yè)化與方劑創(chuàng)新藥物國家地方聯(lián)合工程研究中心，江蘇南京210023）

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側(cè)柏炭的研究進(jìn)展

薛露， 單鳴秋， 張麗， 丁安偉*

（南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心，中藥資源產(chǎn)業(yè)化與方劑創(chuàng)新藥物國家地方聯(lián)合工程研究中心，江蘇南京210023）

摘要：側(cè)柏葉系柏科植物側(cè)柏p latycladus orientalis（L.）Franco的干燥枝梢及葉，經(jīng)炒炭炮制而成側(cè)柏炭，其寒涼之性趨于平和，更勝于收澀止血，效果明顯，被視為中醫(yī)臨床涼血止血之要藥。本文通過對側(cè)柏炭炮制工藝、化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為其深入研究和應(yīng)用開發(fā)提供一定的依據(jù)。

關(guān)鍵詞：側(cè)柏炭；炮制工藝；化學(xué)成分；藥理作用；臨床應(yīng)用

側(cè)柏葉為柏科植物側(cè)柏p latycladus orientalis（L.）Franco的干燥枝梢和葉，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》［1］，其味苦、澀，性寒，歸肺、肝、脾經(jīng)，具有涼血止血、化痰止咳、生發(fā)烏發(fā)等功效，臨床上主要用于治療吐血、衄血、便血、咯血、崩漏下血、血熱脫發(fā)、肺熱咳嗽、須發(fā)早白。側(cè)柏葉炒炭后，其寒涼之性減弱，止血功效增強(qiáng)，主要用于血熱所致的各種出血證。為了更好地開發(fā)利用這一中藥資源，本文從側(cè)柏炭的炮制工藝、化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用等方面進(jìn)行綜述，以期為闡釋炮制機(jī)理及臨床合理應(yīng)用提供參考。

1 炮制工藝

側(cè)柏葉的炮制方法始載于于南北朝的《雷公炮炙論》，主要有單制和輔制兩大類。其中，單制有炒（炙）、蒸、燒、煮、焙等，而輔制有泔制、豆制、礬制、鹽制、酒制等［2］。

唐代除了沿用側(cè)柏葉生品外，在凈制與切制方面也有較大發(fā)展；宋代《太平圣惠方》［3］記載了側(cè)柏葉“微炒”、“微炙”的方法；金元時(shí)期在沿用焙法與蒸法的基礎(chǔ)上，《儒門事親》［4］中新增了煮法，《丹溪心法》中增加了擂、酒制法［5］；明代《丹臺玉案》中記載了“炒黑”［6］；清代《本草綱目拾遺》［7］中新增炮制方法為“米泔水浸，日易水一次，曬干炒黑”，《外科大成》［8］記載了酒浸后九蒸九曬、醋制法及白礬水煎后曬干炒焦枯等方法，并在扁柏丸與柏葉散中運(yùn)用炒焦枯和炒黃的方法。側(cè)柏炒炭法應(yīng)用廣泛，沿用至今，收載于歷版《中國藥典》及《全國中藥炮制規(guī)范》中，《中國藥典》2015版［9］側(cè)柏葉“炮制”項(xiàng)下僅收錄了側(cè)柏葉及側(cè)柏炭兩種炮制品，規(guī)定側(cè)柏葉凈制需“除去硬梗及雜質(zhì)”，而炭品需照炒炭法（附錄ⅡD）炒至表面黑褐色，內(nèi)部焦黃色。

在側(cè)柏炭的炮制工藝研究過程中，學(xué)者大多以制炭溫度、時(shí)間為考察因素。曹峰等［10］根據(jù)人工燒炭原理，將悶法與炒法結(jié)合制炭，省略了成炭以后需噴少許水熄滅火星，繼續(xù)翻炒至干的步驟，縮短了翻炒時(shí)間，成品率可提高3％左右。丁安偉等［11］認(rèn)為，側(cè)柏炭的炮制溫度與時(shí)間對醇、水浸出物含有量的影響較大，側(cè)柏葉經(jīng)長時(shí)間高溫炮制后，所得側(cè)柏炭浸出物的含有量降低，而經(jīng)低溫炮制后略有升高，因此測定側(cè)柏炭浸出物的含有量可為制定相關(guān)飲片標(biāo)準(zhǔn)提供了一定依據(jù)。蔣紀(jì)洋［12］研究發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉以悶煅法制炭時(shí)，能降低揮發(fā)油損失，同時(shí)增加鈣含有量，增強(qiáng)止血功效。張華［13］以鞣質(zhì)為含有量指標(biāo)，凝血時(shí)間作為藥理指標(biāo)，確定側(cè)柏葉炒炭應(yīng)炒至表面焦褐色，內(nèi)部褐色，或者表面黑褐色，內(nèi)部焦褐色。高靜等［14］以槲皮苷為指標(biāo)成分，經(jīng)正交試驗(yàn)優(yōu)選出側(cè)柏炭炮制的最佳工藝為炒制溫度280℃，炒制時(shí)間5 min。單鳴秋［15-16］等基于UPLC指紋圖譜相似度結(jié)合外觀形狀考察側(cè)柏炭烘制工藝，提出最佳炮制工藝為230℃烘制20 min。由此可知，炮制方式不同，炮制的時(shí)間和溫度也會(huì)有所差異。

2 化學(xué)成分和質(zhì)量分析

2.1 揮發(fā)油 側(cè)柏葉中的揮發(fā)油成分主要有α-蒎烯、順-羅勒烯、β-蒎烯、1，8 -萜二烯、γ-萜品烯、萜品油烯、喇叭茶醇、芳樟醇、α-吡喃酮烯、4-萜品油、丙醇鹽里哪酯、乙酸冰片酯、乙酸里哪酯、香橙烯、β-攬香烯、異石竹烯、α-乙酸萜酯、α-葎草烯、大根香葉烯、新松香醇、α-杜松醇等。制炭后，則主要新增了N-二十二烷（2.46％）和γ-桉葉油醇（9.26％），并且1，8-萜二烯和香橙烯的含有量較生側(cè)柏葉顯著增加。然而，其他揮發(fā)油成分的含有量較生品均有不同程度的降低，其中異石竹烯和雪松醇尤為嚴(yán)重。

制炭后，側(cè)柏葉中48.99％的揮發(fā)油成分消失，主要有3，7-二甲基1，3，6-辛三烯（4.95％）、莰烯（5.24％）、β-葎草烯（7.67％）、δ-杜松烯（2.86％）等［17］。

2.2 黃酮類 側(cè)柏葉中的黃酮類成分主要包括蘆丁、槲皮素、槲皮苷、香橙素、芹菜素、楊梅素、山柰酚、扁柏雙黃酮、穗花杉雙黃酮等［18-20］。于生等［21］比較側(cè)柏葉和側(cè)柏炭總黃酮的含有量時(shí)發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉中為5.9％［22］，而炒炭后明顯降低［21］，其中槲皮苷降低較多，而槲皮素有所增加［23］。單鳴秋等［24-25］利用超高效液相色譜法同時(shí)測定側(cè)柏炭中槲皮苷、槲皮素、楊梅素、山柰酚及穗花杉雙黃酮的含有量，發(fā)現(xiàn)槲皮素、穗花杉雙黃酮較高，而槲皮苷較低。姚曉東等［26］發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏炭總黃酮含有量較側(cè)柏葉下降了26.57％，而槲皮素升高了37.27％。譚曉亮等［27］采用高效液相色譜法，比較炮制前后側(cè)柏葉中黃酮類成分的含有量，發(fā)現(xiàn)著成分轉(zhuǎn)化的過程，側(cè)柏葉經(jīng)炒炭后，槲皮苷、楊梅苷、扁柏雙黃酮和穗花杉雙黃酮含有量顯著降低，而楊梅素顯著升高，并且出現(xiàn)了槲皮素和山柰酚。

2.3 鞣質(zhì) 曾祥麗等［28］測得側(cè)柏葉和側(cè)柏炭中鞣質(zhì)含有量分別為0.27％和0.14％。姚曉東等［29］發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉炒炭后鞣質(zhì)含有量下降了48.15％。丁安偉等［30］報(bào)道，側(cè)柏炭中的鞣質(zhì)含有量與炮制溫度有關(guān)，180℃下炮制時(shí)其含有量明顯升高，而270℃時(shí)明顯降低。對符合最佳炮制工藝的側(cè)柏炭而言，鞣質(zhì)含有量較生側(cè)柏葉明顯下降，但可顯著縮短凝血時(shí)間，可見鞣質(zhì)可能并非其主要的止血活性成分。

2.4 微量元素 孫立靖等［31］分析發(fā)現(xiàn)，生側(cè)柏葉和側(cè)柏炭中均含7種人體所必需的微量元素，即Zn、Fe、Cu、Mn、Ni、Co，以及4種人體所必需的常量元素，即Ca、K、Na、Mg，其中Mg、Ca含有量豐富。與側(cè)柏葉比較，側(cè)柏炭中大部分元素含有量均有不同程度的增加，其中常量元素Ca、Mg更為明顯，而且與制炭程度成正比，推測無機(jī)元素的升高可能與炒炭后產(chǎn)生的化學(xué)變化以及元素富集有關(guān)。

3 藥理作用

3.1 止血作用 家兔體外血小板實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉具有較強(qiáng)的血小板活化因子（PAF）抑制作用，其所含的雪松醇、pinusolide及pinusolide acid均呈現(xiàn)出PAF抑制活性，其中pinusolide的拮抗活性與銀杏苦內(nèi)酯B相當(dāng)［32 -33］。趙欽祥等［34］采用小鼠剪尾法研究側(cè)柏葉及不同炮制品的止血作用，發(fā)現(xiàn)燜煅炭和炒炭的止血作用均強(qiáng)于生品，說明側(cè)柏炭口服給藥的止血作用強(qiáng)于側(cè)柏葉，而且側(cè)柏炭水煎劑的止血作用強(qiáng)于側(cè)柏葉。陳超等［35］認(rèn)為，側(cè)柏炭止血功效更強(qiáng)的原因可能與其炒炭后吸附力增加有關(guān)。有報(bào)道稱，槲皮素和槲皮苷是側(cè)柏葉主要的止血活性成分，現(xiàn)代研究亦證實(shí)，槲皮苷具良好的止血和抗毛細(xì)血管脆性的作用［36］。柳佳等［37］對側(cè)柏炭涼血止血的功效進(jìn)行了驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)其可抑制大鼠甲狀腺功能，糾正血液流變學(xué)以及凝血功能異常，從而發(fā)揮這一功效。劉晨等［38 -39］考察了側(cè)柏炭炮制前后及各極性部位對干酵母致血熱復(fù)合出血模型的止血作用，發(fā)現(xiàn)均強(qiáng)于生側(cè)柏葉，其中乙酸乙酯部位主要通過降低全血和血漿低切黏度、促進(jìn)血小板聚集功能及改善內(nèi)源性凝血功能來發(fā)揮其止血作用，是側(cè)柏炭止血的有效部位。周麗娜等［40］體外培養(yǎng)HUVECs，然后采用LPS誘導(dǎo)制備人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型，考察側(cè)柏炭不同提取部位對血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位可顯著拮抗LPS對HUVECs的損傷，有效保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞。

3.2 抗氧化作用 側(cè)柏葉精油對低密度脂蛋白氧化反應(yīng)、胰島素及亞油酸過氧化反應(yīng)、血紅蛋白糖基化反應(yīng)等均表現(xiàn)出抗氧化活性［41］。廖輝等［42］以氧自由基吸收能力（ORAC）法測定側(cè)柏葉炒炭前后的抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)側(cè)柏炭抗氧化能力較生品大大減弱。側(cè)柏葉中所含的槲皮素和異槲皮素均具有抗氧化活性，其中前者可抑制人類重組醛糖還原酶以及晚期糖基化終產(chǎn)物AGEs的形成，為臨床用其治療糖尿病并發(fā)癥提供了一定的科學(xué)依據(jù)［43］；后者具有緩解NO誘導(dǎo)大鼠腦組織脂質(zhì)過氧化的作用［44］，其二萜衍生物15-MPA可抑制過氧化物酶體增生物激活受體的表達(dá)［45］。

4 臨床應(yīng)用及其他

側(cè)柏葉炒炭后，其寒涼之性減弱，止血功效增強(qiáng)。元代葛可久的“十灰散”將側(cè)柏葉、荷葉等均燒炭存性，用于治療嗽血、吐血、咯血、嘔血等，是最早將側(cè)柏葉制炭應(yīng)用于血證的記載。后世又出現(xiàn)許多名方，如《奇效良方》［46］中四季側(cè)柏散治療腸風(fēng)藏毒、下血不止；《幼幼集成》［47］中記載側(cè)柏炭治大便瀉血；《吳鞠通醫(yī)案》［48］中記載側(cè)柏炭治咳血?，F(xiàn)代中醫(yī)臨床主要將其應(yīng)用于治療各種出血證，如血痢、咯血、崩漏、尿血等，被視為止血要藥。

4.1 血痢 潰瘍性結(jié)腸炎屬于中醫(yī)“久瀉”、“久痢”的范疇，臨床癥狀表現(xiàn)為腹痛、腹瀉及膿血便。宋代許叔微編撰的《普濟(jì)本事方》中記載了槐花散，其原方為將側(cè)柏葉（搗焙）、槐花（炒）、枳殼（麩炒）、荊芥穗（沙炭）等分?，F(xiàn)代臨床以生側(cè)柏葉和側(cè)柏炭同時(shí)入藥，用于治療潰瘍性結(jié)腸炎大出血，效果顯著［49］。

4.2 咳血 支氣管擴(kuò)張癥屬于中醫(yī)“咯血”、“肺癰”的范疇，臨床癥狀主要表現(xiàn)為咽燥口干、慢性咳嗽，并伴有大量濃痰、反復(fù)咯血。李慧娟［50］選取側(cè)柏炭、茜草炭、大黃炭、白茅根等來止血，或涼血，或化瘀，或收斂，共奏止血之功。

經(jīng)行咳血，即正值經(jīng)期或經(jīng)期前后出現(xiàn)有規(guī)律的咳血，屬于“倒經(jīng)”、“逆經(jīng)”、“經(jīng)行吐衄”等范疇。金季玲等［51］以側(cè)柏炭、仙鶴草、白及、藕節(jié)炭收斂止血，以地榆、側(cè)柏葉涼血止血，療效良好。

4.3 崩漏 崩漏即崩中、漏下，指經(jīng)血非時(shí)暴下不止或淋漓不凈，屬于中醫(yī)疑難病，主要臨床表現(xiàn)是經(jīng)期經(jīng)量嚴(yán)重失常、月經(jīng)周期失調(diào)。崩漏既是多種婦科病的共有癥狀，也可單獨(dú)為病，其病因多端，病機(jī)復(fù)雜，臨床以氣血、臟腑為基礎(chǔ)，將其分成血熱、血瘀、腎虛、脾虛四型施治。黃可佳［52］認(rèn)為，血得熱而流行，熱極則經(jīng)血妄行，治以清熱涼血，固沖止血，以側(cè)柏炭治療脾虛、血熱型崩漏，可起到收斂固攝、涼血止血的功效。

4.4 尿血 尿血是指血液隨小便排出，輕者尿中混有血液，重則伴有血塊、尿出純血，大多無痛感。其常見于IgA腎病、腎病綜合征、泌尿系感染以及全身性疾病（系統(tǒng)性紅斑狼瘡、過敏性紫癜等）繼發(fā)的腎臟損害。沈慶法教授［53］治療紫癜性腎炎血尿患者時(shí)，以清熱涼血止血、化瘀通經(jīng)活絡(luò)為基本原則，用犀角地黃湯合小薊飲子加減，基本方為側(cè)柏炭、紫草、赤芍、生地、丹皮等，方中側(cè)柏炭起到清熱涼血止血的作用。

4.5 便血 十二指腸潰瘍便血屬于消化道出血證，其出血盛大者可危及生命。某一案例中，患者久病，精血已虧，相火妄動(dòng)，灼傷陰絡(luò)而致便血，袁家現(xiàn)教授［54］以地芍阿膠補(bǔ)血養(yǎng)陰，側(cè)柏炭、地榆炭等涼血止血，黃連、山桅炭清熱除煩，療效顯著。止血之后，常服腎養(yǎng)陰丸以緩圖治本。

5 總結(jié)與展望

綜上所述，目前對側(cè)柏炭的研究主要集中于炮制工藝和質(zhì)量研究，以及制炭前后化學(xué)成分、藥理作用以及臨床應(yīng)用的異同。側(cè)柏炭作為中醫(yī)臨床涼血止血要藥，近年來雖有一些相關(guān)報(bào)道，但尚不夠全面系統(tǒng)，尤其是對該藥涼血止血功效及作用機(jī)制的研究較少，并且不夠深入。

側(cè)柏葉炒炭后，其寒涼之性減弱，止血功效增強(qiáng)。其中，48.99％的揮發(fā)油成分消失，鞣質(zhì)含有量有所降低，常量元素Ca、Mg含有量顯著增加，黃酮類成分總含有量有所減少，但其中楊梅素、槲皮素及山柰酚等增加。研究發(fā)現(xiàn)，黃酮類成分對凝血系統(tǒng)以及血管內(nèi)皮系統(tǒng)的多個(gè)環(huán)節(jié)都表現(xiàn)出不同程度的藥理活性。槲皮素、山柰酚可抵抗高糖誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷；穗花杉雙黃酮可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增值，促進(jìn)血管新生，推測側(cè)柏葉炒炭后止血功效的增強(qiáng)可能與這些黃酮類成分含有量的增加有關(guān)。

為了進(jìn)一步揭示側(cè)柏炭涼血止血的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制，從而更好地指導(dǎo)臨床用藥，本研究對相關(guān)活性提取部位進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位具有顯著的止血活性。在此基礎(chǔ)上，應(yīng)用現(xiàn)代色譜分離技術(shù)剔除該部位中的槲皮素、山柰酚及楊梅素等黃酮類成分，利用干酵母致血熱復(fù)合出血大鼠模型來評價(jià)該部位剔除上述成分前后的涼血止血作用。同時(shí)，通過代謝組學(xué)等方面的研究，有望揭示側(cè)柏炭涼血止血的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制，為其臨床安全有效應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，也為深入研究其他涼血止血炭藥物的作用機(jī)制提供嶄新的思路和方法。

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［科研報(bào)道］

*通信作者：丁安偉（1950—），男，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向中藥炮制機(jī)制和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。Tel：（025）85811523，E-mail：awding105@163.com

作者簡介：薛 露（1991—），女，碩士生，研究方向?yàn)橹兴幣谥茩C(jī)制和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。Tel：15951939796，E-mail：937008377@qq.com

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81173547）；江蘇省普通高校研究生創(chuàng)新計(jì)劃（CXZZ12 -0621）

收稿日期：2016-01-04

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.05.034

中圖分類號：R284.1；R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1001-1528（2016）05-1127-05