陳偉文 鄭錦陽 沈冰寒 徐 萌 郭偉峰 王志剛

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，福建 泉州 362000)

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泉州地區(qū)非小細胞肺癌人群中表皮生長因子受體基因突變分析

陳偉文 鄭錦陽1沈冰寒2徐 萌2郭偉峰2王志剛3

(福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，福建 泉州 362000)

目的 探討泉州地區(qū)非小細胞肺癌(NSCLC)患者表皮生長因子受體(EGFR)基因突變的情況。方法 收集130例泉州地區(qū)NSCLC組織或胸腔積液，用ADx-ARMS技術(shù)檢測NSCLC患者石蠟組織標本EGFR DNA突變19、20及21的突變，同時分析其突變與臨床特征的關(guān)系。結(jié)果 130例NSCLC中共檢出37例EGFR基因突變，EGFR突變陽性率為28.46 %(37/130)，女性EGFR基因突變率(26/54)48.15%，顯著高于男性(12/78)15.4%(P<0.05)；EGFR突變外顯子19和21突變占總突變的100.0 %；腺癌突變發(fā)生率為89.19%(33/37)。結(jié)果 泉州地區(qū)NSCLC患者EGFR基因突變以外顯子19和21突變?yōu)橹鳌＝Y(jié)論 臨床上對未進行EGFR檢測的晚期NSCLC腺癌女性患者，可考慮先予EGFR酪氨酸激酶抑制劑進行診斷性治療。

非小細胞肺癌；表皮生長因子受體；基因突變

目前腫瘤治療主要依據(jù)患者的分期、病理類型等臨床特點，對一個特定群體中的所有患者給予同一種治療，其標準化方案確立主要是以高質(zhì)量循證醫(yī)學(xué)證據(jù)為基礎(chǔ)。要想進一步提高晚期非小細胞肺癌(NSCLC)一線治療的療效，以分子指標為導(dǎo)向的個體化治療可能是一個突破口。但是由于基因突變檢測費用昂貴，很多病人因不愿承擔(dān)高昂檢測費用，而放棄檢測?；谏鲜鲈颍疚脑O(shè)計如果能夠初步了解本地區(qū)人群的基因突變情況，根據(jù)人群中的表皮生長因子受體(EGFR)基因突變情況，指導(dǎo)選擇相應(yīng)的初步個體化治療方案，將有助于進一步提高晚期非小細胞肺癌一線治療的療效，改善患者的生活質(zhì)量，延長生存期。

1 材料與方法

1.1 對象 收集2012年3月至2014年8月在本院經(jīng)病理診斷為NSCLC的病例1 005例，通過隨機表隨機抽取130例病理標本，男76例，女54例；腺癌96例，鱗癌34例。

1.2 方法 采集NSCLC患者病變中心區(qū)樣本，75%乙醇固定后，56℃溫箱中裂解2 h，加入緩沖液和支持探針微球于上述混合液后再將其置于55℃溫箱中震蕩混勻，孵育過夜。棄混合液上清，再洗滌3次后將延伸探針和標記探針加入其內(nèi)，將其置于溫箱中震蕩后將混合液上清棄之，加入鏈霉親和素-藻紅蛋白，洗滌2次，在Luminex儀上讀取數(shù)據(jù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件行χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 130例NSCLC標本中共檢出EGFR基因突變37例(28.5%)，其中19外顯子(Exom-19)突變率為11.5%(15/130)，21外顯子(Exom-21)突變率為16.9%(22/130)。女性基因突變率為46.3%(25/54)，顯著高于男性15.8%(12/76)(P<0.001)。長期吸煙者基因突變率為16.2%(12/74)，顯著低于非吸煙者44.6%(25/56)。腺癌患者基因突變率為34.4%(33/96)，顯著高于鱗癌患者11.8%(4/34)。

2.2 54例女性NSCLC患者中，腺癌患者基因突變率是51.1%(24/47)，顯著高于鱗癌患者14.3%(1/7)。與吸煙組〔33.3%(1/3)〕相比，非吸煙組患者的基因突變率〔47.1%(24/51)〕未見明顯增加(P>0.05)。

2.3 76例男性NSCLC患者中，腺癌〔18.4%(9/49)〕與鱗癌〔11.1%(3/27)〕基因突變率比較無差異(P>0.05)。與非吸煙組〔20.0%(1/5)〕相比，吸煙組基因突變率〔15.5%(11/71)〕未見明顯增加(P>0.05)。

2.4 37例基因突變的NSCLC患者中，E21型突變比例方面，與女性患者〔12例(48.0%)〕比較，男性患者突變率〔10例(83.3%)〕顯著增高(P<0.05)；與非吸煙組NSCLC患者〔12例(48.0%)〕比較，吸煙組NSCLC患者突變率〔10例(83.3%)〕顯著增高(P<0.05)；腺癌〔18例(54.5%)〕和鱗癌〔4例(100.0%)〕患者基因突變類型無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。

3 討 論

EGFR基因的第二至十四外顯子編碼胞外區(qū)，十六至二十二外顯子編碼酪氨酸激酶區(qū)，二十三至二十六外顯子編碼C端至磷酸化部位〔1〕。EGFR的胞外區(qū)在細胞表面與相應(yīng)的配體結(jié)合形成同源或異源二聚體后進入胞內(nèi)特定酪氨酸殘基磷酸化，最終達到活化下游信號通路的目的。這一過程在血管生成、癌細胞增殖中發(fā)揮了重要的調(diào)控作用〔2〕。在EGFR酪氨酸激酶編碼區(qū)(外顯子18-21編碼)多出現(xiàn)框內(nèi)缺失性突變或替代突變等突變，影響腫瘤的生成和發(fā)展〔3〕。當(dāng)EGFR發(fā)生突變后可不依賴配體酪氨酸激酶而發(fā)生活化而異?；罨疎GFR下游信號通路〔4〕。

EGFR酪氨酸激酶抑制劑吉非替尼(又名易瑞沙)在臨床上常用于NSCLC的治療。目前多項臨床試驗結(jié)果表明，該藥物總體治療效果不高，僅為10%～30%〔5〕。因此，在使用酪氨酸激酶抑制劑之前，應(yīng)進行EGFR基因突變檢查。在以2 880例病例為對象的13項研究匯總分析中，東方人EGFR基因突變的頻率為32.0 %，腺癌發(fā)生率達30.0 %，非東方人突變頻率為7.0 %，非腺癌發(fā)生率為2.0%〔6〕。此外，研究發(fā)現(xiàn)，我國腺癌EGFR基因突變率顯著高于非腺癌的(43.1% vs 12.0%)〔7〕，說明EGFR基因突變與肺癌患者的臨床特征及病理呈正相關(guān)性。截至2008年，通過對我國949例非小細胞肺癌患者EGFR基因突變情況進行分析，發(fā)現(xiàn)該基因在女性患者中的突變率為43.4%，而男性患者僅為21%；此外，與吸煙者13.1%比較，非吸煙者EGFR基因突變率明顯增加，為44.1%(P<0.05)〔8〕，從上述數(shù)據(jù)可知：性別和吸煙狀況等臨床背景與EGFR基因突變均存在相關(guān)性。

此外，大量研究表明，我國不同時期、不同區(qū)域肺癌EGFR基因突變率存在一定的差異，如2011年在北京、上海、天津、吉林、廣東、云南、湖南、臺灣選取737例NSCLC患者EGFR突變率為30.0 %；廣西壯族突變率為44.8 %〔9〕。同樣，在2005年北京、上海、廣東、云南及臺灣肺癌患者EGFR突變率為34%〔5〕。本研究選取的對象是泉州地區(qū)的患者，上述結(jié)果能夠為酪氨酸激酶抑制劑分子靶向治療非小細胞肺癌提供參考依據(jù)。在我國，不同地區(qū)民族遺傳背景存在差異，EGFR基因突變率可能也有差異。

上述結(jié)果提示，在女性腺癌的患者中進行酪氨酸激酶抑制劑的治療，可使一部分患者受益。特別對于老年患者，當(dāng)無法接受手術(shù)或化療的情況下，可根據(jù)EGFR突變情況選擇靶向藥物，更有臨床意義。

1 周瑞芳，盧仁泉.EGFR 基因突變檢測的臨床應(yīng)用〔J〕.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013;28(3)：72-4.

2 Cohen S.Purification of the receptor for epicermal growth factor from A-431 cells:its function as a tyrosyl kinase〔J〕.Methocs Enzymol,1983;99(4)：379-87.

3 Kosaka T,Yatabe Y,Encoh H,etal.Mutations of the epidermal growth factor receptor gene in lung cancer:biological and clinical implications〔J〕.Cancer Res,2004;64(24)：8919-23.

4 Shigematsu H,Lin L,Takahashi T,etal.Clinical and biological features associated with epidermal growth factor receptor gene mutations in lung cancers〔J〕.J Natl Cancer Inst,2005;97(5)：339-46.

5 董強剛.肺癌靶向治療研究進展與我國肺癌的EGFR基因突變概況〔J〕.腫瘤，2005;25(6)：625-8.

6 Mitsucomi T,Yatabe Y.Mutations of the epidermal growth factor receptor gene and related genes as determinants of epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors sensitivity in lung cancer〔J〕.Cancer Sci,2007;98(12)：1817-24.

7 王國慶，符雅君，王 蓉，等.中國人非小細胞肺癌EGFR基因突變與患者特征關(guān)系的Meta分析〔J〕.中國醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2009;10(2)：55-60.

8 陳慧娟，喻長順，李洪波，等.廣東地區(qū)非小細胞肺癌EGFR基因的突變研究〔J〕.分子診斷與治療雜志，2011;3(1)：29-32.

9 利基林，林書瀚，唐艷萍，等.廣西壯族非小細胞肺癌患者EGFR基因突變的研究〔J〕.中國癌癥防治雜志，2011;3(3)：200-3.

〔2015-12-31修回〕

(編輯 袁左鳴)

泉州市科技計劃重點項目(No.Z〔2013〕0064)

陳偉文(1971-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事肺部腫瘤的規(guī)范化診療，呼吸系統(tǒng)危重癥診治研究。

R734.2

A

1005-9202(2016)20-5055-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.20.054

1 福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院病理科

2 福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科

3 泉州醫(yī)高專附屬泉州市人民醫(yī)院