劉瑩

睪丸內(nèi)不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的妊娠結(jié)局分析

劉瑩

目的探討睪丸內(nèi)不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的妊娠結(jié)局。方法132例行睪丸精子抽吸術(shù)和附睪精子抽吸術(shù)取精行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的無(wú)精子癥患者,將行手術(shù)發(fā)現(xiàn)不活動(dòng)精子的29例患者作為觀察組,發(fā)現(xiàn)可活動(dòng)精子的103例患者作為對(duì)照組,兩組均行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射,比較兩組的妊娠結(jié)局。結(jié)果觀察組受精率、正常原核(2PN)受精率、卵裂率以及早期胚胎流產(chǎn)率分別為70.3%、79.5%、93.6%、14.3%,對(duì)照組分別為80.8%、88.1%、97.8%、6.8%,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論通過(guò)選擇睪丸內(nèi)尾端柔軟的不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射,雖然受精率有所影響,但臨床妊娠情況良好,是治療睪丸內(nèi)無(wú)活動(dòng)精子患者的有效方法。

不活動(dòng)精子；卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射；妊娠結(jié)局

在育齡夫婦中不育夫婦大約占據(jù)了10%,而其中因?yàn)槟行砸蛩貙?dǎo)致的不育夫婦就占2/5,且有逐年增加趨向。雖然經(jīng)睪丸精子抽吸術(shù)能夠獲取精子實(shí)施卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射讓較多無(wú)精子癥患者順利妊娠,且國(guó)外關(guān)于睪丸內(nèi)不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射也有相關(guān)研究,但是怎樣選擇睪丸不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射,依舊各有說(shuō)辭［1］。本次研究的主要目的是為了探討睪丸內(nèi)不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的妊娠結(jié)局,特選擇本院132例無(wú)精子癥患者的臨床資料予以回顧性分析,詳細(xì)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月～2016年5月于本院行睪丸精子抽吸術(shù)和附睪精子抽吸術(shù)取精行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的132例無(wú)精子癥患者作為此次研究對(duì)象,本次所選患者均通過(guò)2次或以上精液常規(guī)和精液離心沉淀而確診為無(wú)精子癥患者,通過(guò)診斷性睪丸活檢或附睪丸穿刺后證實(shí)睪丸與附睪丸中有成熟精子；且均排除由于內(nèi)科疾病、感染、子宮異物以及卵巢過(guò)度刺激綜合征等因素取消新鮮胚胎移植周期的患者以及患有遺傳性或先天性疾病患者。男性平均年齡(31.6±4.5)歲,女性平均年齡(29.3±4.8)歲；平均不育年數(shù)(4.8±2.5)年。將行睪丸精子抽吸術(shù)發(fā)現(xiàn)不活動(dòng)精子的29例患者作為觀察組,將行睪丸精子抽吸術(shù)和附睪精子抽吸術(shù)后發(fā)現(xiàn)可活動(dòng)精子的103例患者作為對(duì)照組。

1.2 方法

1.2.1 促排卵 兩組女方常規(guī)運(yùn)用促性腺激素釋放激素(GnRH)聯(lián)合促卵泡激素(FSH)或人絕經(jīng)期促性腺激素(HMG)長(zhǎng)或短方案予以控制性超排卵,經(jīng)B超檢查發(fā)現(xiàn)雙側(cè)卵巢內(nèi)有2個(gè)或多個(gè)直徑>18mm的卵泡則表示卵泡發(fā)育成熟,即刻肌內(nèi)注射1萬(wàn)IU人絨毛膜促性腺激素(hCG),36 h后于陰道B超引導(dǎo)下實(shí)施經(jīng)陰道穿刺負(fù)壓抽吸取卵術(shù)。將卵子置于培養(yǎng)箱內(nèi)孵育大約4 h后進(jìn)行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射。

1.2.2 卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的精子選擇 注射時(shí)要仔細(xì)觀察,盡可能選擇活動(dòng)精子,若無(wú)活動(dòng)精子則選擇結(jié)構(gòu)相對(duì)完整且尾端柔軟的不活動(dòng)精子,具體方法是：用注射針輕柔撥動(dòng)精子尾部遠(yuǎn)端,若尾端隨撥動(dòng)移動(dòng)且頭部未大幅度移動(dòng)或翻轉(zhuǎn)則表示尾部柔軟；或用注射針從精子尾部吸入針管再逐漸推出,若精子尾部和頭部出入針管的位置能夠因注射針的推出吸入而發(fā)生變化則說(shuō)明尾部柔軟；或用注射針從精子頭部吸入針管,將尾端留于針外,若精子尾端因注射針擺動(dòng)而變換位置則說(shuō)明尾部柔軟。注意不活動(dòng)精子的制動(dòng)要給予機(jī)械性刺激,保證刮擦有效。若精子黏附微小顆粒較多時(shí),要反復(fù)沖洗精子,防止卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射中把不明顆粒帶入卵細(xì)胞內(nèi)。

1.2.3 胚胎移植及黃體支持 在胚胎培養(yǎng)的第3天,選擇1～3個(gè)可利用胚胎予以移植,其余可利用胚胎給予冷凍保存；取卵后第2天給予黃體支持治療。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察并比較兩組平均獲卵數(shù)、獲成熟卵子數(shù)、成熟卵子比例、受精率、2PN受精率、低受精發(fā)生情況、卵裂情況、可利用胚胎率、優(yōu)胚率、移植胚胎數(shù)、移植優(yōu)胚數(shù)、臨床妊娠情況、種植率以及早期胚胎流產(chǎn)率等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床數(shù)據(jù)比較 觀察組平均獲卵數(shù)、獲成熟卵子數(shù)、成熟卵子比例、受精率、2PN受精率、低受精發(fā)生率、卵裂率、可利用胚胎率、優(yōu)胚率、移植胚胎數(shù)、移植優(yōu)胚數(shù)、臨床妊娠率、種植率以及早期胚胎流產(chǎn)率分別為(14.4±7.8)枚、(12.1±7.3)枚、83.2%(313/376)、70.3%(220/313)、79.5%(175/220)、3.4%(1/29)、93.6%(206/220)、66.5%(137/206)、35.4%(73/206)、(2.2±0.7)個(gè)、(1.5±0.9)個(gè)、50.0%(14/28)、24.1%(14/58)、14.3%(2/14)；對(duì)照組分別為(14.2±8.4)枚、(11.9±6.9)枚、83.8%(1885/2249)、80.8%(1524/1885)、88.1%(1342/1524)、1.9%(2/103)、97.8%(1490/1524)、70.9%(1056/1490)、41.5% (618/1490)、(2.2±0.6)個(gè)、(1.7±0.9)個(gè)、43.6%(44/101)、27.2%(55/202)、6.8%(3/44)。兩組平均獲卵數(shù)、獲成熟卵子數(shù)、成熟卵子比例、低受精發(fā)生率、可利用胚胎率、優(yōu)胚率、移植胚胎數(shù)、移植優(yōu)胚數(shù)、臨床妊娠率以及種植率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而受精率、2PN受精率、卵裂率以及早期胚胎流產(chǎn)率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 兩組妊娠結(jié)局比較 觀察組1例由于卵裂失敗無(wú)可利用胚胎移植外,14例(48.3%)移植后均成功妊娠,其中5例足月分娩健康嬰兒,6例仍在妊娠,3例初期胚胎停育。對(duì)照組2例由于無(wú)可利用胚胎取消周期外,44例(42.7%)移植后均成功妊娠,其中25例分娩健康嬰兒,14例仍在妊娠,3例初期胚胎停育,1例在25周流產(chǎn),1例由于胎兒畸形在25周引產(chǎn);兩組成功妊娠率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討論

有研究者表示睪丸精子的活動(dòng)力并不代表授精能力。孫惠君等［2］運(yùn)用a/b/c級(jí)睪丸精子與d級(jí)睪丸精子比較,后者受精率和正常受精率明顯下降,但是在種植率、臨床妊娠率、優(yōu)質(zhì)胚胎率等指標(biāo)上比較無(wú)顯著差異,表示睪丸精子活動(dòng)力對(duì)卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的妊娠結(jié)局無(wú)明顯影響。本次研究發(fā)現(xiàn),不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射后,受精率和正常受精率與活睪丸內(nèi)活動(dòng)精子比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其結(jié)果與上述研究［2］結(jié)論一致。睪丸內(nèi)不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射受精率的影響因素主要是制動(dòng)方法有無(wú)合適以及挑選活性不活動(dòng)精子的方法。有研究顯示,在梗阻性無(wú)精子癥患者中,90%左右的睪丸精子均具有活性,但是活動(dòng)力十分微弱甚至完全不動(dòng)。雖然臨床治療中,在睪丸內(nèi)獲取的不活動(dòng)精子,大多數(shù)屬于活性精子,但也有少數(shù)精子死亡,若睪丸組織具有病理現(xiàn)象,則精子死亡率更高。所以也明顯加大了準(zhǔn)確選擇活性不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射的難度,對(duì)醫(yī)務(wù)人員的標(biāo)準(zhǔn)相當(dāng)高,其需具備豐富經(jīng)驗(yàn),能夠有效提高受精率。

此次研究顯示,觀察組受精率、2PN率、卵裂率要明顯小于對(duì)照組(P<0.05),其原因可能是在選擇活性不活動(dòng)精子時(shí)仍存在錯(cuò)誤選擇,但是在卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射中卵母細(xì)胞受到注射針的機(jī)械刺激后被激活,出現(xiàn)孤雌生殖,使得異常受精胚胎數(shù)加多。此外,觀察組與對(duì)照組早期胚胎流產(chǎn)率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其原因可能是因?yàn)橛^察組患者數(shù)量偏少導(dǎo)致。

綜上所述,通過(guò)選擇睪丸內(nèi)尾端柔軟的不活動(dòng)精子行卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子注射,雖然受精率有所影響,但臨床妊娠情況良好,是治療睪丸內(nèi)無(wú)活動(dòng)精子患者的有效方法。

［1］賈博欽,宋學(xué)茹,趙曉徽,等.預(yù)防性控制血清促甲狀腺素水平對(duì)IVF/ICSI-ET妊娠早期的影響.中國(guó)計(jì)劃生育學(xué)雜志,2014,22(12):830-833,836.

［2］孫惠君,李博,陳書(shū)強(qiáng),等.不同種類精液異常對(duì)輔助生殖臨床結(jié)局的影響.中國(guó)男科學(xué)雜志,2016,30(2):21-25.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.22.045

2016-10-13］

110043 沈陽(yáng)二〇四醫(yī)院輔助生殖實(shí)驗(yàn)室