劉海霞

普伐他汀對高脂血癥小鼠抗疲勞功能的影響

劉海霞

[摘要]目的建立高脂血癥小鼠模型，觀察普伐他汀對高脂血癥小鼠抗疲勞功能的影響。方法取90只昆明雄性清潔級小鼠，隨機(jī)分為正常對照組、高脂模型組和普伐他汀組，每組30只。后2組采用高脂飲食飼料喂養(yǎng)6周制備高脂血癥小鼠模型。造模成功后，普伐他汀組給予普伐他汀10 mg/(kg·d)，對小鼠連續(xù)灌胃6周；對照組、高脂模型組給予蒸餾水灌胃。使用ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀對小鼠進(jìn)行疲勞實(shí)驗(yàn)，分別記錄三組小鼠的落棒時(shí)間。結(jié)果高脂模型組落棒時(shí)間明顯短于正常對照組(P<0.01)，普伐他汀組落棒時(shí)間明顯短于正常對照組和高脂模型組(P<0.01)。結(jié)論普伐他汀在有效降血脂的同時(shí)，可導(dǎo)致小鼠疲倦和勞力性疲勞等不良反應(yīng)。

[關(guān)鍵詞]普伐他??；高脂血癥；抗疲勞

[Abstract]ObjectiveTo establish the hyperlipidemia model mice,observe the effect of pravastatin on the anti-fatigue activity of hyperlipidemia mice.Methods90 male clean level Kunming mice were randomly divided into normal control group (n=30),high fat model group (n=30) and pravastatin group (n=30) respectively.High fat model group and pravastatin group were fed with high fat diet for 6 weeks to establish the hyperlipemia mice model.Then pravastatin group was given pravastatin 10 mg/(kg·d) by intragastric gavage for 6 weeks,control group and high fat model group were given distilled water,ZB-200 rotarod apparatus was used for mice fatigue tests,the rod fall time was recorded in each group respectively.ResultsThe rod drop time of high fat model group was less than that of normal control group (P<0.01),while the rod drop time pravastatin group was less than those of normal control group and high fat group (P<0.01).ConclusionPravastatin could cause the adverse reactions of tired and exertional fatigue in the treatment of hyperlipidemia mice.

收稿日期：2015-03-22

基金項(xiàng)目：湖北省咸寧市科技基金(WJ2015MB229)

通信作者*

DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201510004

Study on antifatigue effect of pravastatin on hyperlipemia miceLIU Hai-xia (Hubei College of Traditional Chinese Medicine,Jingzhou 434020,China)

Key words：Pravastatin;Hyperlipidemia;Fatigue resistance

0引言

普伐他汀屬于他汀類降脂藥物，通過競爭性抑制HMG-CoA還原酶而明顯降低血漿TC水平，加強(qiáng)由受體介導(dǎo)的LDL-c的分解代謝及血液中LDL-c的清除[1]，從而阻滯肝臟大量合成LDL，有效防止LDL-c的產(chǎn)生[2]。但長期使用普伐他汀對患者腦卒中、腫瘤發(fā)生率、總死亡事件的影響及其安全性仍存在爭議[3]。其不良反應(yīng)主要表現(xiàn)在肌病、肝臟安全性、腎臟損害、癌癥風(fēng)險(xiǎn)、新發(fā)糖尿病風(fēng)險(xiǎn)等5個(gè)主要問題上[4]。加州大學(xué)圣迭戈分校的研究顯示，他汀類藥物的使用與疲倦和勞力性疲勞等不良反應(yīng)存在顯著的相關(guān)性，女性比男性更常見[5]。隨著患者年齡的增加，因不良反應(yīng)而中斷他汀類藥物治療的例數(shù)也隨之增加[6]。本研究旨在觀察普伐他汀對高脂血癥小鼠抗疲勞功能的影響，探討普伐他汀可能導(dǎo)致疲倦和勞力性疲勞的不良反應(yīng)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組90只昆明雄性清潔級小鼠，16周齡，體重21~25 g，動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境：溫度20 ℃，相對濕度60 %，12 h周期性光照。實(shí)驗(yàn)過程中對動(dòng)物的處置符合2006年科技部發(fā)布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》[7]。實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為正常對照組、高脂模型組和普伐他汀組，每組30只。

1.2儀器與材料

1.2.1主要實(shí)驗(yàn)儀器成都泰盟公司自主研制開發(fā)的ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀；全自動(dòng)生化儀(TOSHIBA公司)、精密電子天平(型號：T200，G&G)；4 ℃冰箱(BCD-2O5E/Y，海爾集團(tuán))；研磨器等。

1.2.2實(shí)驗(yàn)試劑和藥品TC、TG、HDL-c、LDL-c試劑盒(溫州東甌津瑪生物技術(shù)有限公司)，普伐他汀鈉(美百樂鎮(zhèn)，第一三共制藥上海有限公司)。

1.2.3高脂飼料本試驗(yàn)采用高脂飼料飼喂法，高脂飼料配方組成[8]：膽固醇l%，膽鹽0.1%，豬油10%，蛋黃粉5%，全脂奶粉5%，基礎(chǔ)飼料78.9%?；A(chǔ)飼料各成分含量：水分≤10%，粗蛋白≥22%，粗脂肪≥4%，粗纖維≤5%，粗灰分≤8%，鈣1%~1.8%，磷0.6%~1.2%。普通飼料為標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動(dòng)物飼料(脂肪占總熱量的12%，由湖北中醫(yī)藥高等專科學(xué)校動(dòng)物中心提供)；高脂飼料低溫保存。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1高脂血癥小鼠模型的建立16周齡昆明雄性清潔級小鼠90只，予以適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為3組，每組30只。正常對照組給予普通膳食12周。高脂模型組、普伐他汀組均給予高脂膳食6周制備高脂血癥小鼠模型。造模后高脂模型組給予普通膳食；普伐他汀組給予普伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃，正常對照組和高脂模型組給予等量蒸餾水灌胃，共6周。

1.3.2血脂測定分別于第1周、第6周、第12周的第1天斷尾取血，用全自動(dòng)生化儀測定TC、TG、HDL-c、LDL-c的含量。

1.3.3抗疲勞試驗(yàn)使用ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀分別于第1周、第6周、第12周的第1天對小鼠進(jìn)行轉(zhuǎn)棒訓(xùn)練2次，使小鼠在5 min內(nèi)基本能夠隨轉(zhuǎn)棒而做相應(yīng)的運(yùn)動(dòng)，避免在轉(zhuǎn)棒上失去平衡而掉落。正式實(shí)驗(yàn)前再進(jìn)行一次訓(xùn)練，隨后將小鼠放在轉(zhuǎn)棒式疲勞儀的轉(zhuǎn)棒上,以30 r/min的速度迫使小鼠在棒上運(yùn)動(dòng)[9]。觀察記錄各組小鼠的落棒時(shí)間。

2結(jié)果

2.1長期高脂飼料喂養(yǎng)對小鼠體重的影響見表1。由表1可見，長期高脂膳食組(高脂模型組、普伐他汀組)小鼠體重明顯高于普通膳食組(正常對照組)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

2.2血脂水平的變化實(shí)驗(yàn)6周后，高脂模型組TC、TG、LDL-c水平均顯著高于正常對照組，HDL-c水平低于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)12周后，普伐他汀組TC、TG、LDL-c水平均低于高脂模型組，HDL-c水平高于高脂模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表1　實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重的變化(g)

注：*與正常對照組比較，P<0.01

表2　血脂水平的變化(mmol/L)

注：#與高脂模型組比較，P<0.01

2.3落棒檢測和計(jì)時(shí)疲勞實(shí)驗(yàn)使用ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀分別于第1周、第6周、第12周的第1天進(jìn)行落棒檢測和計(jì)時(shí)疲勞實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)速：30 r/min。結(jié)果見表3。

表3　三組小鼠落棒時(shí)間比較

結(jié)果顯示，高脂模型組落棒時(shí)間短于正常對照組，普伐他汀組落棒時(shí)間短于正常對照組及高脂模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

3討論

普伐他汀作為臨床上廣泛使用的他汀類降血脂藥，對高脂血癥患者TC、TG、HDL-c的總有效率分別為90.9%、94.4%、85.7%[10]。近年研究發(fā)現(xiàn)，本品對心血管具有良好的保護(hù)作用[11]，能明顯降低血脂異?；颊咝难苁录l(fā)生率及病死率[12]，抑制心肌梗死時(shí)室性心律失常的發(fā)生[13]，防治自身免疫性疾病[14]，臨床推廣應(yīng)用價(jià)值較高。他汀類藥物的總體安全性良好，藥物相關(guān)的不良事件發(fā)生率較低，但不能忽視他汀類藥物潛在的不良反應(yīng)[15]，如肌肉毒性、對肝酶的影響及疲倦和勞力性疲勞等。普伐他汀肌病的發(fā)生率介于氟伐他汀(5.1%)和辛伐他汀(18.2%)之間[16]。服用中等劑量的辛伐他汀和普伐他汀可能導(dǎo)致疲倦和勞力性疲勞，或?yàn)樗☆愃幬锏牧硪活惒涣挤磻?yīng)。

本研究結(jié)果顯示，高脂模型組小鼠體重明顯高于正常對照組，高脂膳食小鼠體重增加的部分原因是脂肪組織在動(dòng)物體內(nèi)的積聚[17]。有研究表明，高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠脂肪組織受體相互作用蛋白140 mRNA表達(dá)增加，可能是誘發(fā)小鼠肥胖及高血脂的重要因素之一[18]。使用ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀對小鼠的抗疲勞試驗(yàn)結(jié)果提示，高脂模型組落棒時(shí)間明顯短于正常對照組，普伐他汀組落棒時(shí)間明顯短于高脂模型組，說明普伐他汀在有效降低血脂的同時(shí)，可導(dǎo)致小鼠疲倦和勞力性疲勞等不良反應(yīng)。產(chǎn)生疲勞的原因很多，而其最直接和最客觀的表現(xiàn)是運(yùn)動(dòng)耐力的下降[19]。期待通過進(jìn)一步大量臨床試驗(yàn)研究，對他汀類藥物可能導(dǎo)致疲倦和勞力性疲勞的不良反應(yīng)做到早期發(fā)現(xiàn)并處理，避免出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)。因此，對高脂血癥患者應(yīng)當(dāng)著重考慮他汀類藥物對體能和生活質(zhì)量的影響，在患者了解藥物不良反應(yīng)的前提下合理應(yīng)用，制定相應(yīng)的治療策略，嚴(yán)密監(jiān)測不良反應(yīng)，保證安全用藥[20]，為臨床高脂血癥患者的治療提供更合理的方案。

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作者單位：咸寧市中心醫(yī)院消化內(nèi)科，咸寧 437100