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胃癌組織中維生素D受體表達(dá)觀察

肖小琴，程文德，王偉源，冷敏芳

(深圳市龍華新區(qū)中心醫(yī)院，廣東深圳518110)

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.39.041

基金項(xiàng)目：深圳市龍華新區(qū)科技計(jì)劃社會公益創(chuàng)新基金資助項(xiàng)目(2013116)。

胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，病死率居全身惡性腫瘤第二位[1]。研究[2]表明，維生素D有抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞分化及免疫調(diào)節(jié)等功能。我們觀察了胃癌組織中維生素D受體(VDR)的表達(dá)變化，并分析其與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

臨床資料：行手術(shù)治療的胃癌患者45例，男27例、女18例，年齡25~80歲。管狀腺癌14例，黏液腺癌7例，印戒細(xì)胞癌21例；高分化腺癌6例，中分化腺癌11例，低分化腺癌28例。所有患者術(shù)前均未接受放療或化療。術(shù)中取腫瘤組織及癌旁正常組織。

VDR檢測方法：采用免疫組化法檢測VDR。切片常規(guī)脫蠟；將檸檬酸鹽溶液加熱至96~98 ℃，放入切片加熱15 min后室溫下冷卻，PBS沖洗；滴加3%H2O2，10 min后PBS沖洗；滴加一抗VDR，室溫放置60 min，PBS沖洗；滴加二抗，室溫10~15 min，PBS沖洗；滴加DAB溶液，顯微鏡下觀察3~5 min；流水沖洗，蘇木素復(fù)染，梯度乙醇脫水，中性樹膠封固。光鏡下觀察，每例隨機(jī)選擇10個(gè)高倍視野，計(jì)算陽性細(xì)胞(細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒)百分比，結(jié)合染色強(qiáng)度進(jìn)行結(jié)果判定。陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度按無著色、淡黃色、棕褐色分別計(jì)0、1、2分；陽性細(xì)胞百分比0~5%計(jì)0分，6%~25%計(jì)1分，26%~50%計(jì)2分，51%~75%計(jì)3分，76%~100%計(jì)4分；兩項(xiàng)得分相乘，0為VDR表達(dá)陰性，≥1為VDR表達(dá)陽性。采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果：VDR表達(dá)于腺體細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞核或細(xì)胞膜基本無表達(dá)。正常胃黏膜組織中VDR陽性表達(dá)率為100%，胃癌組織中VDR陽性表達(dá)率為56%，二者相比，P<0.05。不同腫瘤分化程度、分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的患者胃癌組織中VDR陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。

表1　VDR表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

注：與高分化者相比，*P<0.05；與中分化者相比，#P<0.05；與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者相比，△P<0.05；與Ⅰ+Ⅱ期者相比，☆P<0.05。

討論：胃癌的確切病因尚不清楚，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為胃癌發(fā)病是飲食營養(yǎng)、HP感染、飲食習(xí)慣、環(huán)境、精神心理、遺傳等多種因素綜合作用的結(jié)果。國內(nèi)外大量流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，飲食因素為胃癌發(fā)病最直接的因素[3]，如某些營養(yǎng)素(動(dòng)物蛋白、維生素)缺乏、抗氧化劑減少等[4]。維生素D可在體內(nèi)活化為類固醇激素1，25-二羥基維生素D3，通過與其受體VDR結(jié)合發(fā)生作用。

本研究結(jié)果顯示，胃癌和正常胃黏膜組織中均有VDR表達(dá)，且均定位于胞質(zhì)，這與VDR在乳腺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌、膀胱癌等腫瘤中的表達(dá)分布一致[5~10]。有學(xué)者認(rèn)為維生素D-VDR通路與Wnt/β-catenin/TCF通路相交匯[11]。VDR的抗腫瘤作用可能與下調(diào)TNF-α表達(dá)有關(guān)[12]。VDR在胃癌組織中的陽性表達(dá)率低于正常胃黏膜組織，提示VDR表達(dá)減少與胃癌的發(fā)病有關(guān)。

我們進(jìn)一步研究VDR表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，隨著腫瘤分化程度降低，VDR表達(dá)也逐漸降低，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者VDR陽性表達(dá)率低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者胃癌組織中VDR陽性表達(dá)率低于Ⅰ+Ⅱ期者。上述研究結(jié)果提示VDR表達(dá)降低可能促進(jìn)胃癌的發(fā)生、發(fā)展。但VDR是直接或間接參與胃癌的發(fā)生發(fā)展，仍有待進(jìn)一步確認(rèn)。

綜上所述，胃癌組織中VDR的表達(dá)低于胃正常組織，且其表達(dá)程度與胃癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分期有關(guān)，VDR可能在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮一定作用。研究VDR的作用機(jī)制，尋求類似的抗腫瘤藥物，將為胃癌的治療提供幫助。

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收稿日期：(2015-05-14)