張衛(wèi)敏

菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校藥學(xué)教研室，山東菏澤274000

葡萄皮紫色素的穩(wěn)定性研究

張衛(wèi)敏

菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校藥學(xué)教研室，山東菏澤274000

目的研究葡萄皮紫色素的提取及其穩(wěn)定性。方法以葡萄皮為原料，采用80%乙醇提取，并對(duì)其穩(wěn)定性做較深入研究。結(jié)果葡萄皮紫色素為紫色膏狀，不溶于氯仿，難溶于丙酮、乙醚、乙酸乙酯，溶于甲醇、乙醇，易溶于水；在pH=3～6時(shí)，穩(wěn)定性好；Fe3+、Cu2+、Fe2+對(duì)其有一定影響；光照對(duì)紫色素有降解作用；防腐劑對(duì)其影響不顯著；紫色素清除DPPH的能力比Vc弱。結(jié)論葡萄皮紫色素在應(yīng)用過(guò)程中應(yīng)注意調(diào)節(jié)pH值，避光貯存，避免使用鐵制容器；防腐劑對(duì)紫色素?zé)o顯著影響；紫色素具有一定的抗氧化性。

葡萄皮紫色素；提?。环€(wěn)定性

科技發(fā)展使人們認(rèn)識(shí)到合成色素多為含有苯環(huán)或萘環(huán)的焦油類(lèi)物質(zhì)，有致癌、誘發(fā)染色體變異的危害[1-2]。天然色素安全無(wú)毒、色澤自然且多具有生理活性，在食品、化妝品、醫(yī)藥保健等領(lǐng)域有巨大的應(yīng)用潛力[3-4]。

紫色素有保健功能且應(yīng)用廣泛。世界上葡萄產(chǎn)量很大，產(chǎn)生大量的葡萄皮渣，從中可提取葡萄皮紫色素。而在提取過(guò)程中，保持化學(xué)性質(zhì)的穩(wěn)定較為關(guān)鍵[5-6]。因此，通過(guò)對(duì)天然色素性質(zhì)的研究可以更好地指導(dǎo)其在食品生產(chǎn)中的應(yīng)用[7]。本實(shí)驗(yàn)以葡萄皮為原料，采用80%乙醇提取葡萄皮紫色素，并測(cè)定PH、光照、金屬離子、食品添加劑對(duì)其穩(wěn)定性的影響，為其在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)與利用提供理論依據(jù)[8]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

U-3900紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)；HH-W600數(shù)顯三用恒溫水箱；SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵；DZ-1BC型真空干燥箱；PHS-3B型PH計(jì)；ACCULAB ALC-210.4電子天平。

不同PH值緩沖體系（pH=2.0～8.0）、0.100mol·L-1的HCl和NaOH溶液，實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純，所用水為三蒸水，所用葡萄采自張家口宣化。

1.2 方法

1.2.1 提取方法取鮮葡萄，洗凈剝皮，去除皮上果肉，取適量葡萄皮放入1000 mL錐形瓶中，加入80%乙醇，用0.5%的檸檬酸調(diào)節(jié)至酸性，振蕩攪拌，浸提5 h，浸提3次，收集并合并浸提液，抽濾，濾液經(jīng)減壓濃縮、冷凍干燥后得到紫色素浸膏。

1.2.2 紫色素溶液的制備稱取葡萄皮紫色素0.2021 g，置于100 mL容量瓶中，加水溶解并定容，即得溶液。

1.3 紫色素的主要物理化學(xué)性質(zhì)

1.3.1 紫色素的外觀、溶解性及吸收光譜特性觀察紫色素的外觀，測(cè)定其在水、甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯和氯仿中的溶解性。取紫色素溶液5.0 mL，采用紫外可見(jiàn)分光光度法在λ=200～600 nm范圍內(nèi)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描。

1.3.2 pH值和光照對(duì)紫色素的影響取25 mL比色管8支，均加入紫色素溶液5.0 mL，依次加入pH=2.0～8.0的緩沖溶液至刻度，搖勻，室溫放置30min，測(cè)吸光度。取50 mL容量瓶2支，編號(hào)為a、b，均加入紫色素溶液至刻度，a管避光放置，b管置于室內(nèi)光線下，隔12 h取樣一次，測(cè)吸光度。

1.3.3 金屬離子對(duì)紫色素的影響取10 mL比色管21支，分成7組，每組3支，均加入紫色素溶液5.0 mL，依次加入0.500 mol·L-1、0.250 mol·L-1和0.100 mol·L-1的含有Cu2+、Ba2+、Mn2+、Ca2+、K+、Fe2+、和Fe3+的溶液至刻度。室溫放置30min，測(cè)吸光度。

1.3.4 食品添加劑對(duì)紫色素的影響取10 mL比色管7支，編號(hào)為1-7號(hào)，均加入紫色素溶液3.0 mL,1-6號(hào)管分別加1.00×10-3mol·L-1、5.00×10-3mol·L-1、1.00×10-2mol·L-1、5.00×10-2mol·L-1、0.150 mol·L-1和0.200 mol·L-1的苯甲酸鈉溶液至5.0 mL，7號(hào)管加水至5 mL，放置2 h測(cè)吸光度。再取10 mL比色管6支，分別加入0.15 mol·L-1苯甲酸鈉溶液和紫色素溶液，放置2 h測(cè)吸光度。

1.3.5 紫色素對(duì)DPPH的影響取10mL比色管7支，均加入52.0μg·mL-1的DPPH 2.0 mL，加入不同量的紫色素溶液用無(wú)水乙醇定容至5 mL，混勻，避光反應(yīng)30min，于517 nm處測(cè)吸光度。以空白試劑作對(duì)照，Vc做陽(yáng)性對(duì)照，計(jì)算紫色素和Vc對(duì)DPPH的清除率。

表4 不同濃度防腐劑對(duì)紫色素的影響

2 結(jié)果

2.1 紫色素的外觀、溶解性及吸收光譜特性

紫色素在室溫下為膏狀，氣芳香，不溶于氯仿，難溶于丙酮、乙醚、乙酸乙酯，溶于乙醇、甲醇，易溶于水。葡萄皮紫色素溶液的最大吸收波長(zhǎng)為279 nm，見(jiàn)圖1。

圖1 葡萄皮紫色素吸收光譜

2.2 pH值及光照對(duì)紫色素的影響

葡萄皮紫色素在pH=3～6范圍內(nèi)吸光度值無(wú)明顯差異,而在pH=7～8范圍內(nèi)吸光度值變化較大，見(jiàn)表1。a管吸光度值無(wú)明顯變化，b管吸光度值減小，結(jié)果表明光照對(duì)紫色素有降解作用，見(jiàn)表2。

表1 pH值對(duì)紫色素溶液吸光度的影響

表2 光照時(shí)間對(duì)紫色素溶液吸光度的影響

2.3 金屬離子對(duì)紫色素的影響

加入Ca2+、Ba2+、Mn2+、K+的紫色素溶液吸光度值無(wú)明顯變化，加入Cu2+、Fe2+、Fe3+的紫色素溶液吸光度值變化較大。結(jié)果表明Fe2+、Fe3+、Cu2+對(duì)色素均有一定影響，見(jiàn)表3。

表3 不同金屬離子濃度對(duì)紫色素溶液吸光度的影響

2.4 防腐劑對(duì)紫色素的影響

加入不同濃度苯甲酸鈉，紫色素吸光度值無(wú)明顯差異，溶液中色素溶液濃度遞增吸光度值增大，呈一定線性關(guān)系，見(jiàn)表4，表5。

表5 同濃度防腐劑對(duì)紫色素的影響

2.5 紫色素對(duì)DPPH的影響

紫色素清除DPPH的IC50=331 μg·mL-1，VC清除DPPH的IC50=20.8 μg·mL-1,由此得出，紫色素清除DPPH的能力比VC弱，見(jiàn)表6。

表6 紫色素對(duì)DPPH的影響

3 討論

葡萄皮色素屬芳香族，pH值不同時(shí)，分子結(jié)構(gòu)重排結(jié)構(gòu)形式改變，色澤易發(fā)生改變，主要含有花色素、花色苷等結(jié)構(gòu)，F(xiàn)e3+與花色素形成螯合物。而光照能使紫色素降解，應(yīng)避光貯存。食品添加劑對(duì)色素影響不大，因此可以廣泛應(yīng)用于食品領(lǐng)域中。葡萄皮色素的活性很廣泛，如花色素抗癌、多酚類(lèi)抗衰老、黃酮降血壓，本實(shí)驗(yàn)證明其有一定抗氧化能力。

4 結(jié)語(yǔ)

葡萄皮紫色素在常溫下為紫色膏狀，氣芳香，易溶于水。在pH=3～6范圍內(nèi)穩(wěn)定，長(zhǎng)時(shí)間光照對(duì)其有降解作用。Fe3+、Fe2+、Cu2+對(duì)其有一定影響。苯甲酸鈉對(duì)其穩(wěn)定性無(wú)明顯影響，紫色素能清除DPPH，具有一定的抗氧化性。其他因素如糖類(lèi)等對(duì)其穩(wěn)定性的影響還有待于進(jìn)一步研究。

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Extraction and Stability of the Purple Pigment in Grape Skin

ZHANG Wei-min
Heze Medical College Department of Pharmacy，Heze Shangdong 274000 China

ObjectiveThe extraction and stability of purple pigment in grape skin were studied.MethodsThe grape skin as raw material was extracted with the 80%ethanol,and its stability had been done research.ResultsThe purple pigment is purple cream,not dissolve in chloroform,hardly in acetone,dissolve in methanol,ethanol,easy in water;The stability was good when pH is within 3.0～6.0;Fe3+,Cu2+,Fe2+on the purple is known as a certain impact;The stability got worse under the light;it did not react too much to the preservative;purple pigment removal capacity than Vc weak DPPH.ConclusionPurple pigment during the application should pay attention to adjust pH,dark storage,avoid to use of iron containers;purple pigment has some antioxidant activity.

Purple pigment of grape skin;Extraction;Stability

R202.3

A

1672-5654（2015）03（c）-0034-02

2015-01-05）

張衛(wèi)敏(1986-)，女，山東菏澤人，助教，碩士研究生，研究方向：藥物新劑型與新技術(shù)。