夏新萌，劉承軍，李海，車曉囡

（1.聊城市動物疫病與控制中心，山東聊城 252000；2.聊城市動物醫(yī)院）

犬乳腺腫瘤病理學(xué)觀察與分析

夏新萌1，劉承軍2*，李海1，車曉囡2

（1.聊城市動物疫病與控制中心，山東聊城 252000；2.聊城市動物醫(yī)院）

通過利用石蠟切片制作技術(shù)、HE染色技術(shù)及顯微攝影技術(shù)，結(jié)合臨床資料，對犬乳腺腫瘤進(jìn)行病例分析，以期能夠鑒別診斷犬的良性和惡性乳腺腫瘤。將收集到的10個具有典型病理變化乳腺腫瘤組織制作成病理切片，用HE染液進(jìn)行染色，并利用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。結(jié)合臨床資料，對犬乳腺腫瘤進(jìn)行病例分析，并對犬乳腺腫瘤病例的基本信息進(jìn)行歸納，發(fā)現(xiàn)平均患病年齡為8.5歲老犬，然后對術(shù)后切除的腫瘤進(jìn)行了病理基本的鑒別診斷，發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤6例，并對所制作乳腺腫瘤切片中具有典型病理變化的切片作了細(xì)致的觀察和分類描述。

犬；HE染色；組織病理學(xué)；手術(shù)切除

乳腺腫瘤是母犬發(fā)病率最高腫瘤性疾病，約占全部腫瘤性疾病的25%～42%，其中約50%腫瘤是惡性的。惡性腫瘤在母犬乳腺腫瘤疾病中的很大比重使得患犬的健康受到嚴(yán)重威脅，因此需要引起臨床醫(yī)生和動物主人的重視。筆者通過診斷治療的10例患有腫瘤性疾病的典型病例，經(jīng)病理學(xué)觀察，對腫瘤特性及其發(fā)病原因進(jìn)行了分析研究，為臨床診斷治療提供參考。

1 材料和方法

1.1 病例

2014年6月至2014年12月期間，確診的患有典型的乳腺腫瘤母犬10只，年齡4～14歲，平均年齡8.5歲。

1.2 器材與試劑

手動切片機(jī)（英國Shandon）；自動烘片機(jī)（英國Shandon）；恒溫展片機(jī)（英國Shandon）；微波爐（LG公司）；數(shù)碼顯微鏡（Olympus公司）；10%中性福爾馬林；70%酒精；80%酒精；85%酒精；95%酒精；100%酒精；二甲苯I；二甲苯II；石蠟；蒸餾水；1%鹽酸酒精；蘇木素染液；1%伊紅染液；中性樹膠。

1.3 方法

1.3.1 臨床診斷。對患犬進(jìn)行臨床診斷。除了常規(guī)檢查外，對每個乳腺和乳頭、腹股溝淋巴結(jié)、腋窩淋巴結(jié)區(qū)域，及腹部都應(yīng)該進(jìn)行深入的觸診。在病史中，不明原因的跛行、疼痛、神經(jīng)癥狀、呼吸道癥狀、其它細(xì)微的臨床癥狀或者體格檢查都是腫瘤疾病的體現(xiàn)（見圖1）。

圖1 乳腺腫瘤外觀觀察

1.3.2 手術(shù)。初步確定為乳腺腫瘤患犬后，與畜主協(xié)商同意實施乳腺腫瘤摘除手術(shù)。

1.3.2.1 術(shù)前準(zhǔn)備。手術(shù)當(dāng)天禁食禁水，術(shù)前20min注射阿托品及止血敏，術(shù)前15min麻醉。術(shù)前5 min，術(shù)部剃毛清洗消毒（見圖2）。術(shù)部用10mL/L普魯卡因約10mL實施局部浸潤麻醉。

圖2 將破潰的瘤體包扎好

1.3.2.2 實施手術(shù)。選擇血管分布稀疏的皮膚組織，沿腫瘤基部用鑷子夾起皮膚切至所需大小，可做環(huán)形切口，注意止血。然后逐步鈍性分離，直至暴露整個瘤體，并結(jié)扎腫瘤蒂部的供血動靜脈血管。然后完整切除腫瘤（見圖3、圖4），最后對皮膚進(jìn)行結(jié)扎縫合。閉合皮膚前撒布氨芐青霉素，并確認(rèn)傷口里毛細(xì)血管沒有出血后進(jìn)行縫合，整理皮膚，最后一針安排在身體下方，留適當(dāng)長度作為引流口。傷口處再次消毒，涂上碘酊。

圖3 手術(shù)切除腫瘤

圖4 摘除的乳腺腫瘤

1.3.3 分別對腫瘤組織病理進(jìn)行切片觀察。將手術(shù)摘除的腫瘤組織切割成大小約1mm3的組織塊；采取的組織塊立即投入10%中性福爾馬林固定，制作成石蠟切片，然后在顯微鏡下觀察，進(jìn)行病理組織學(xué)診斷。

2 結(jié)果與分析

2.1 病理組織學(xué)觀察

病理學(xué)觀察分別如下：腫瘤的組織結(jié)構(gòu)具有多形性，有腺上皮細(xì)胞構(gòu)成的腺管，肌上皮細(xì)胞形成的瘤細(xì)胞團(tuán)塊或條索，還可有分化成熟的鱗狀上皮，間質(zhì)中常見軟骨粘液樣區(qū)和骨化區(qū)，上皮與間質(zhì)分界不清（見圖5、6）。泌乳型腺瘤由密集的、具有妊娠期、哺乳期明顯分泌狀態(tài)的腺泡組成的腺瘤。腺泡腔擴(kuò)張，內(nèi)襯上皮細(xì)胞胞漿呈空泡狀外突，腺泡間質(zhì)極少（見圖7）。腺管上皮因受擠壓而成扁平狀（見圖8）。切面常呈分葉狀，光鏡下可以是管型或圍管型腺纖維瘤的圖像，腫瘤間質(zhì)細(xì)胞有時較豐富，上皮細(xì)胞也可增生（見圖9、10）。乳腺導(dǎo)管上皮增生，形成多個有纖維血管束的乳頭狀結(jié)構(gòu)，乳頭可互相連接成腺樣或網(wǎng)狀（見圖7）。乳頭狀癌乳頭中部常見纖維血管束，表面被覆單層或多層異型上皮細(xì)胞，極其紊亂，肌上皮消失，常見核分裂（見圖11、12）。鱗狀細(xì)胞癌組織絕大部分為典型鱗狀細(xì)胞癌結(jié)構(gòu)，可見細(xì)胞簡橋或角化（見圖13、14）。

圖5 良性混合瘤（HE×200）

圖6 混合瘤－上皮與間質(zhì)分界不清（HE×200）

圖7 泌乳型腺瘤－腫瘤由泌乳腺泡構(gòu)成（HE×200）

圖8 分葉型腺纖維瘤（HE×200）

圖9 圍管型腺纖維瘤（HE×200）

圖10 腺纖維瘤－間質(zhì)細(xì)胞較豐富，偶見核分裂象

圖11 導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤（HE×200）

圖12 乳頭狀癌癌組織局限于囊腔內(nèi)（HE×200）

圖13 鱗狀細(xì)胞癌可見多處角化珠（HE×200）

圖14 鱗狀細(xì)胞癌癌細(xì)胞呈浸潤性生長（HE×200）

2.2 所收集的腫瘤病例組織病理學(xué)分類

根據(jù)WHO（世界衛(wèi)生組織）對腫瘤的分類標(biāo)準(zhǔn)可以將犬乳腺腫瘤分為以下幾類：良性混合瘤、基底細(xì)胞瘤、腺瘤、纖維腺瘤、導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤、腺管乳頭狀癌、浸潤性導(dǎo)管癌、梭形細(xì)胞癌、骨肉瘤及肉瘤樣癌等。其中良性混合瘤、基底細(xì)胞瘤、腺瘤、纖維腺瘤、導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤為良性腫瘤；腺管乳頭狀癌、浸潤性導(dǎo)管癌、梭形細(xì)胞癌、骨肉瘤及肉瘤樣癌為惡性腫瘤。本試驗中良性腫瘤占40%(4/10)，可通過手術(shù)摘除術(shù)進(jìn)行治愈；惡性腫瘤占60%(6/10)，可能發(fā)生轉(zhuǎn)移或侵襲。

表1 結(jié)果統(tǒng)計

預(yù)后：良性病例無死亡。惡性病例死亡5例，死亡率83.33%。

3 討論

根據(jù)犬乳腺組織的病理學(xué)特性，10例典型病例中有4例良性腫瘤。犬的良性乳腺腫瘤常為復(fù)合瘤或混合瘤。由于乳腺被覆上皮細(xì)胞在組織發(fā)生學(xué)過程中可能轉(zhuǎn)化為軟骨或骨成分，導(dǎo)致異常的組織學(xué)表現(xiàn)，腫瘤組織或正常乳腺組織中出現(xiàn)骨細(xì)胞或軟骨細(xì)胞，這是犬乳腺腫瘤的特征性變化之一。6例惡性腫瘤病例中以實體癌發(fā)病率最高，腫瘤常常通過淋巴以及血液通道進(jìn)行擴(kuò)散。組織學(xué)顯示：腫瘤上皮細(xì)胞可能浸潤到各種組織，包括擴(kuò)散到骨組織的小葉腫瘤。在組織病理學(xué)檢查時，由于犬乳腺癌組織的分化程度的差別，所觀察的犬乳腺癌病例幾乎都有一種以上的癌巢結(jié)構(gòu)特征。同一組織病理學(xué)標(biāo)本上常同時出現(xiàn)髓樣癌、乳頭狀腺癌、管狀腺癌等結(jié)構(gòu)特征，并常有壞死、出血等繼發(fā)性改變。從切面上看，犬乳腺癌大多數(shù)不見完整包膜，而向周圍組織侵襲性生長，有時可區(qū)別出白色、灰白色或奶油色的彌漫性或結(jié)節(jié)性腺樣組織和致密的結(jié)締組織間質(zhì)，也常見內(nèi)含黃褐色漿液狀或膠樣分泌物的囊泡和出血壞死區(qū)。犬乳腺腫瘤最常轉(zhuǎn)移到肺部和患部的淋巴結(jié)，但是也能轉(zhuǎn)移到其它任何器官，包括骨、腦、肝、脾、腎以及皮膚。這些轉(zhuǎn)移的部位表明，血液循環(huán)和淋巴循環(huán)都能擴(kuò)散這種疾病。

從患犬的發(fā)病年齡上看：5歲之前的狗，乳腺腫瘤很少發(fā)生。之后隨著年齡的增長發(fā)病率有所增加。筆者通過多年的臨床經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)，犬乳腺腫瘤多發(fā)在10～11歲之間。在本實驗選擇的10例典型病例中，良性腫瘤患犬的平均年齡為8.5歲，惡性腫瘤患犬的年齡為10歲，較資料數(shù)據(jù)有些提前，可能是病例量較小造成的，不過與飲食以及環(huán)境也不無相關(guān)。

孕酮激素的使用、動物發(fā)情期的增加或延長、假孕以及懷孕期的乳腺的變化等均與犬乳腺腫瘤的早期發(fā)生有關(guān)。99.5%的乳腺腫瘤發(fā)生于母犬，其中80%以上的發(fā)生在未去勢母犬。據(jù)統(tǒng)計，在第一次發(fā)情前做了絕育手術(shù)的犬，發(fā)生乳腺腫瘤的危險率為0.5%，但在第一次及第二次發(fā)情以后閹割的母犬，發(fā)生乳腺腫瘤的危險率分別上升至8%和26%，2歲半或4個發(fā)情周期以后閹割的母犬，則無抑制腫瘤發(fā)生的作用。所以，預(yù)防犬乳腺腫瘤的最好辦法就是在犬性成熟前摘除卵巢。

犬乳腺腫瘤是犬常見的腫瘤性疾病，其病因、組織學(xué)特性、藥物及手術(shù)治療等都與人類乳腺腫瘤較為相似，乳腺腫瘤嚴(yán)重威脅著人類和犬類的健康，是犬的一種惡性腫瘤性疾病。常見的犬乳腺腫瘤類型是乳腺浸潤性導(dǎo)管癌、良性混合瘤和乳腺軟骨化化生性癌。浸潤性乳腺癌在人類乳腺癌和犬類的乳腺癌中都是一種自然發(fā)生的預(yù)后最為不良的一種乳腺癌類型，被認(rèn)為是惡性程度極高、臨床病程復(fù)雜、存活率極低。本文中，浸潤性導(dǎo)管癌病例占全部病例的很大比重，其術(shù)后死亡率也較良性腫瘤有所降低。母犬經(jīng)常表現(xiàn)為復(fù)雜的腫瘤結(jié)節(jié)，只有部分母犬的腫瘤結(jié)節(jié)是單一性的。有些腫瘤可能在最近才發(fā)現(xiàn)，而有些已經(jīng)存在了很長時間，乳腺摘除是治療乳腺癌的一種行之有效的方法。因此，獸醫(yī)臨床診療中建議寵物主人定期帶自己的愛寵進(jìn)行常規(guī)體格檢查，及早發(fā)現(xiàn)腫瘤進(jìn)行早期治療為宜。

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1004-2342（2015）01-0032-04

S857.2+6

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2015-01-20）