何朝樹(shù)

（汾陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，山西032200）

不同方法檢測(cè)尿液中紅細(xì)胞結(jié)果分析

何朝樹(shù)

（汾陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，山西032200）

目的探討3種方法檢測(cè)尿液紅細(xì)胞的作用和價(jià)值。方法收集該院2014年3～4月住院及門(mén)診400例患者的晨尿標(biāo)本400份于一次性尿管中，并在2 h內(nèi)進(jìn)行干化學(xué)分析儀及顯微鏡檢測(cè)、UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀。結(jié)果以尿沉渣顯微鏡檢測(cè)結(jié)果為診斷標(biāo)準(zhǔn)，尿干化學(xué)法假陽(yáng)性24例（6%），假陰性8例（2%）；UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析假陽(yáng)性1例（0.3%）；假陰性14例（3.5%）。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀對(duì)尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果與干化學(xué)分析儀比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論3種方法對(duì)尿中紅細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果存在差異，流式細(xì)胞分析法和干化學(xué)法易出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性，建議3種方法聯(lián)合應(yīng)用，以提高尿中紅細(xì)胞的陽(yáng)性檢出率。

紅細(xì)胞；尿分析/儀器和設(shè)備；顯微鏡檢查；流式細(xì)胞術(shù)；化學(xué)，分析；對(duì)比研究

尿液常規(guī)分析是臨床上常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目之一。尿液中紅細(xì)胞的準(zhǔn)確分析，可以對(duì)泌尿生殖、消化等系統(tǒng)的疾病提供診斷和鑒別診斷依據(jù)。目前臨床上對(duì)尿液常規(guī)分析主要采取干化學(xué)分析法、流式細(xì)胞分析術(shù)及尿沉渣顯微鏡檢查。干化學(xué)分析法標(biāo)本用量少，操作簡(jiǎn)便，項(xiàng)目較多，檢測(cè)速度快，而且重復(fù)性好，適用于大批量標(biāo)本的健康體檢，但其結(jié)果容易受藥物、外源性物質(zhì)和人為因素的干擾，可出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀采用流式細(xì)胞技術(shù)，核酸染色，具有快速、誤差小、精密度高的特點(diǎn)，而且可以對(duì)尿液中有形成分進(jìn)行檢測(cè)分析。尿沉渣顯微鏡檢可以真實(shí)展現(xiàn)細(xì)胞等有形成分的形態(tài)，直觀、可靠，是尿中紅細(xì)胞檢查的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但逐一鏡檢，檢測(cè)速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能適應(yīng)臨床上日益增多的尿液標(biāo)本的要求，況且沒(méi)有統(tǒng)一質(zhì)控物，難以實(shí)現(xiàn)室內(nèi)質(zhì)控。根據(jù)上述3種尿液分析常用方法各自的優(yōu)缺點(diǎn)，本研究對(duì)400份尿液標(biāo)本進(jìn)行尿液干化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)及顯微鏡聯(lián)合檢測(cè)，并對(duì)其檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析和比較。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集本院2014年3～4月住院及門(mén)診400例患者的晨尿標(biāo)本（清晨起床后未進(jìn)食早餐和做運(yùn)動(dòng)之前排泄的尿液標(biāo)本），采集標(biāo)本前應(yīng)清潔生殖器，并留取中段尿于一次性無(wú)菌尿管中，接收標(biāo)本時(shí)應(yīng)嚴(yán)格核對(duì)患者姓名、性別、化驗(yàn)單與標(biāo)本容器標(biāo)號(hào)是否一致。400例患者中男297例，女103例；年齡16～79歲；內(nèi)科306例，外科、婦產(chǎn)科各47例。所有標(biāo)本均要求在2 h內(nèi)完成尿液干化學(xué)、UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析和尿沉渣顯微鏡檢查，避免細(xì)菌繁殖、細(xì)胞溶解等諸多因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。

1.2 儀器與試劑干化學(xué)分析使用山西亞森FA-100及其配套試紙條；尿液流式細(xì)胞分析儀為日本Sysme的UF-1000i，試劑為配套試劑；顯微鏡使用日本奧林巴斯雙目顯微鏡，離心機(jī)使用長(zhǎng)沙平凡儀器儀表公司生產(chǎn)的TD-5I型水平式離心機(jī)。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法

1.2.1.1 尿干化學(xué)分析儀每天開(kāi)機(jī)后先用質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，確定質(zhì)控通過(guò)后，取試紙條浸入盛有患者尿液標(biāo)本的一次性尿管中數(shù)秒，然后取出放置于儀器試帶槽，然后按儀器操作步驟進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)記錄結(jié)果。

1.2.1.2 UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀每天開(kāi)機(jī)后，先分別使用高低2種質(zhì)控物對(duì)儀器進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，在確保質(zhì)控通過(guò)后，按照儀器操作步驟，開(kāi)始對(duì)尿液標(biāo)本上機(jī)檢測(cè)，并上傳數(shù)據(jù)，記錄保存。

1.2.1.3 尿沉渣顯微鏡檢查取混勻尿液標(biāo)本10 mL于刻度離心管中以1 500 r/min離心5 min，棄去上清液，留取沉淀物0.2 mL，滴于潔凈的載玻片上鏡檢，先以低倍鏡（100×）觀察，再以高倍鏡（400×）觀察，分別以10個(gè)高倍視野下的紅細(xì)胞取平均值，并記錄結(jié)果。

1.2.2 判定標(biāo)準(zhǔn)以尿沉渣顯微鏡檢查結(jié)果為待檢尿液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)的“金標(biāo)準(zhǔn)”：以每個(gè)高倍視野下紅細(xì)胞超過(guò)3個(gè)為陽(yáng)性，對(duì)UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀和干化學(xué)分析法的檢測(cè)結(jié)果作評(píng)價(jià)。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀的紅細(xì)胞正常參考范圍為每微升0～25個(gè)，干化學(xué)分析法以試紙條出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3種方法檢測(cè)尿中紅細(xì)胞結(jié)果比較400例患者尿液標(biāo)本中紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果有7種情況，尿干化學(xué)法假陽(yáng)性24例（6%），假陰性8例（2%）；UF-1000i尿流式細(xì)胞分析假陽(yáng)性1例（0.3%）；假陰性14例（3.5%）。見(jiàn)表1。

表1 3種方法檢測(cè)尿中紅細(xì)胞結(jié)果比較

2.2 干化學(xué)分析法和UF-1000i檢測(cè)結(jié)果比較干化學(xué)分析法和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀2種方法檢測(cè)尿液中紅細(xì)胞結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=17.8，P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 干化學(xué)分析和UF-1000i檢測(cè)結(jié)果比較（n）

3 討論

本研究中表1結(jié)果顯示，出現(xiàn)檢測(cè)情況1和7時(shí)，干化學(xué)分析和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀都為陰性結(jié)果261例，尿沉渣鏡檢也是陰性260例，3種方法檢查都為陰性的符合率為99.6%。故可以建議當(dāng)尿干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀聯(lián)合檢測(cè)尿中紅細(xì)胞都出現(xiàn)陰性結(jié)果時(shí)，可不用顯微鏡鏡檢進(jìn)一步檢查尿沉渣中的紅細(xì)胞，而直接出示報(bào)告[1]。將2種方法聯(lián)合應(yīng)用，綜合分析可提高尿液中紅細(xì)胞檢測(cè)的準(zhǔn)確度，可適用于大批量的健康體檢標(biāo)本檢測(cè)。

本研究中表1結(jié)果還顯示，出現(xiàn)檢測(cè)情況3時(shí)，有24例尿液標(biāo)本UF-1000i尿液流式細(xì)胞儀和尿沉渣鏡檢均為陰性，而尿液干化學(xué)分析法則為陽(yáng)性，假陽(yáng)性率為6%。干化學(xué)分析法檢測(cè)尿液中紅細(xì)胞的原理是根據(jù)血紅蛋白的亞鐵血紅素具有過(guò)氧化物酶活性，可以催化分解過(guò)氧化物，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化而呈色。其顏色深淺與血紅蛋白水平有關(guān)[2]。多數(shù)情況下可以反映尿液中紅細(xì)胞的有無(wú)，但不能分析其形態(tài)。一般造成干化學(xué)分析法出現(xiàn)假陽(yáng)性的因素有：（1）某些腎臟疾?。唬?）低比重尿；（3）低pH值尿；（4）放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)引起尿中紅細(xì)胞破壞，釋放出血紅蛋白而出現(xiàn)假陽(yáng)性[3]。表1出現(xiàn)情況4可見(jiàn)，8例患者尿標(biāo)本紅細(xì)胞檢測(cè)UF-1000i流式細(xì)胞分析儀和沉渣鏡檢均為陽(yáng)性，而干化學(xué)分析法則為假陰性，占2%。引起假陰性的結(jié)果可能是尿液中含有維生素C等還原性物質(zhì)干擾所致[4]。

本研究中表1結(jié)果還顯示，出現(xiàn)檢測(cè)情況5時(shí)，有1例患者尿液標(biāo)本其干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢均為陰性，而UF-1000i尿流式細(xì)胞分析儀顯示為陽(yáng)性。UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀用紅色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過(guò)核酸熒光染色后的尿液標(biāo)本在鞘液分析池中形成鞘液樣本，并通過(guò)各粒子產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向熒光信號(hào)轉(zhuǎn)換成的光電信號(hào)進(jìn)行分析和識(shí)別，并通過(guò)計(jì)算得到相應(yīng)細(xì)胞的大小、長(zhǎng)度、體積等，同時(shí)得到有形成分的直方圖和散點(diǎn)圖[5]，而尿液中出現(xiàn)草酸鈣結(jié)晶、酵母菌時(shí)，由于其大小和紅細(xì)胞接近，可以干擾紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，造成假陽(yáng)性結(jié)果[6]。表1出現(xiàn)情況6可見(jiàn)，有14例尿液標(biāo)本干化學(xué)分析儀和沉渣鏡檢紅細(xì)胞均為陽(yáng)性，而UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀則顯示為陰性，占到總數(shù)的3.5%，UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀只能檢出其中的有形成分，當(dāng)檢測(cè)前患者服用過(guò)能產(chǎn)生熒光染料類(lèi)似作用的藥物時(shí)，或者標(biāo)本留取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，有形成分被破壞，均可導(dǎo)致假陰性結(jié)果的出現(xiàn)[7]。

本研究結(jié)果顯示，干化學(xué)分析儀和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀檢測(cè)尿液中紅細(xì)胞時(shí)均可出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果[5]，而且2種方法檢測(cè)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，顯微鏡檢測(cè)紅細(xì)胞具有直觀、可靠、簡(jiǎn)便、特異度高的特點(diǎn)，但操作繁瑣，精密度差，影響因素也較多。干化學(xué)分析法和UF-1000i尿液流式細(xì)胞分析儀聯(lián)合使用可以提高工作效率，并且避免了單一方法帶來(lái)的假陽(yáng)性和假陰性，降低了人為誤差，當(dāng)二者出現(xiàn)結(jié)果不相符時(shí)，必須結(jié)合臨床并以尿沉渣鏡檢為準(zhǔn)，以提高尿常規(guī)分析中紅細(xì)胞檢測(cè)的準(zhǔn)確度[8]。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2015.05.035

:B

:1009-5519（2015）05-0728-02

2014-07-14

2014-10-06）

何朝樹(shù)（1971-），男，山西汾陽(yáng)人，主管檢驗(yàn)師，主要從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作；E-mail：316696320@qq.com。