侯偉波，張永國，王穎，王海英，喻田

（遵義醫(yī)學(xué)院麻醉學(xué)系，貴州遵義563003）

硫酸鋅預(yù)處理對成年大鼠缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

侯偉波，張永國，王穎，王海英，喻田

（遵義醫(yī)學(xué)院麻醉學(xué)系，貴州遵義563003）

目的研究硫酸鋅預(yù)處理對成年大鼠缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響。方法分離培養(yǎng)SD成年大鼠心肌細(xì)胞，建立心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型，將細(xì)胞隨機(jī)分為正常組（N組）、缺氧/復(fù)氧組（H/R組）、缺氧預(yù)處理組（HP組）、硫酸鋅（ZnSO4）預(yù)處理組（ZnP組），分別進(jìn)行相應(yīng)處理，然后用透射電鏡對各組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，并進(jìn)行線粒體評分。結(jié)果N組、HP組、ZnP組超微結(jié)構(gòu)優(yōu)于H/R組，且線粒體評分較H/R組低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；HP組、ZnP組超微結(jié)構(gòu)變化相似，且兩組線粒體評分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但均高于N組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論缺氧/復(fù)氧可造成成年大鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的損傷，ZnSO4預(yù)處理、缺氧預(yù)處理均能減輕該損傷，且二者效果相當(dāng)。

肌細(xì)胞，心臟；硫酸鋅；大鼠；線粒體；超微結(jié)構(gòu)；缺氧/復(fù)氧損傷

心肌缺血再灌注損傷（MIRI）是目前影響心臟手術(shù)成功率和患者術(shù)后恢復(fù)的重要因素之一，因此，國內(nèi)外學(xué)者對其研究也出現(xiàn)了多元化、多層次性，使預(yù)防MIRI的措施層出不窮。隨著相關(guān)研究的深入，微量元素鋅在減輕MIRI中的重要作用逐漸被人們所重視。Xu等[1]研究發(fā)現(xiàn)，在大鼠心臟上，鋅可通過增強(qiáng)再灌注損傷補(bǔ)救激酶（RISK）通路活性在后處理保護(hù)心肌作用時(shí)扮演重要角色，但其通過預(yù)處理產(chǎn)生心肌保護(hù)的作用卻少見報(bào)道。因此，本研究擬通過建立大鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型，選擇硫酸鋅（ZnSO4）直接作用于心肌細(xì)胞，觀察微量元素鋅預(yù)處理對缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無特定病原體（SPF）級健康雄性SD大鼠6只，體質(zhì)量250～300 g，16～20周齡，由第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號：SCXK（渝2012-0005）。

1.1.2 主要試劑Hcylon M199培養(yǎng)基、索來寶N-2-羥-酸哌嗪-N-2-乙磺酸（HEPES）、層黏連蛋白、肌酸、?；撬?、牛血清清蛋白（BSA）、乙二醇雙（2-氨基乙醚）四乙酸（EGTA）、Ⅱ型膠原酶等試劑均購自美國Sigma公司，其他均為國產(chǎn)分析純。

1.1.3 主要儀器langendorff離體灌注系統(tǒng)，Thermo CO2培養(yǎng)箱，Thermo CO2缺氧培養(yǎng)箱，H7500透射電子顯微鏡（日立公司），CyberScan310型pH計(jì)（美國優(yōu)特EUTECH），去離子水處理器（美國Mili QA），BS224S電子天平（德國Sartorius），5804R型Eppendorf臺式高速離心機(jī)（德國Eppendorf）。

1.2 方法

1.2.1 心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)心肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)參照文獻(xiàn)[2]進(jìn)行，具體步驟如下：（1）SD大鼠腹腔注射肝素（250 U/kg）、戊巴比妥鈉（40 mg/kg），待大鼠麻醉后將其固定于宰鼠板上，75%乙醇消毒皮膚，沿劍突下肋緣迅速剪開腹壁，剪開膈肌，沿兩側(cè)腋前線剪開胸壁翻向頭側(cè)，于心臟根部保留主動(dòng)脈3～4 mm處剪下心臟，立即放入提前加熱至37℃750 μmol/L Ca2+液中輕輕擠壓心臟2～3次，使心腔殘留的血液排盡。（2）迅速用鑷子于液面下夾起大鼠心臟主動(dòng)脈根部固定于langendorff離體灌注系統(tǒng)的灌注針上（流量設(shè)置為9 mL/g心臟組織）；依次灌注經(jīng)氧和的37℃、750 μmol/L Ca2+液2 min，100 μmol/L EGTA 4 min，心肌細(xì)胞酶消化液7～8 min。（3）灌注完成后于主動(dòng)脈根部剪下心臟，從主動(dòng)脈向心尖剪開心肌，放入無菌燒杯中，加入含有1%BSA的心肌細(xì)胞酶消化液5 mL，于37℃恒溫水浴搖床在氧合情況下手動(dòng)振蕩，每次5 min，200目金屬濾網(wǎng)過濾收集在無菌離心管里，置于37℃恒溫水浴箱內(nèi)自然下沉，重復(fù)4～5次，收集細(xì)胞沉淀，酶洗脫洗滌細(xì)胞沉淀3次，最后用改良型M199培養(yǎng)基洗滌3次。（4）用0.4%臺盼藍(lán)1∶1染色，倒置相差顯微鏡下觀察心肌細(xì)胞形態(tài)，評價(jià)存活率（80%以上），計(jì)數(shù)細(xì)胞，將細(xì)胞以每毫升106個(gè)的密度均勻鋪于6孔板，每孔2 mL。培養(yǎng)3 h后更換培養(yǎng)基，去除未貼壁細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)過夜，然后進(jìn)行隨機(jī)分組處理。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及處理將培養(yǎng)的心肌細(xì)胞隨機(jī)分為四組。（1）正常組（N組）：于37℃中95%空氣和5%CO2正常培養(yǎng)箱中持續(xù)培養(yǎng)105 min；（2）缺氧/復(fù)氧組（H/R組）：將正常培養(yǎng)的心肌細(xì)胞置于95%N2和5%O2缺氧培養(yǎng)箱中缺氧45 min后重新置于正常培養(yǎng)箱中培養(yǎng)60min；（3）缺氧預(yù)處理組（HP組）：首先將細(xì)胞進(jìn)行3次短時(shí)間缺氧（每次2 min），然后在每次短時(shí)間缺氧后分別復(fù)氧2、3、5 min，缺氧復(fù)氧處理同H/R組；（4）ZnSO4預(yù)處理組（ZnP組）：先給正常培養(yǎng)的細(xì)胞中加入終濃度為10μmol/L的ZnSO4水溶液，正常培養(yǎng)30min，其余處理同H/R組。

1.2.3 取材及透射電鏡觀察各組細(xì)胞在培養(yǎng)結(jié)束之后立即用細(xì)胞刮輕輕將細(xì)胞刮下，收集于1.5 mL EP管中，1 200 r/min、4℃離心10 min，棄上層培養(yǎng)基，沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的4%戊二醛溶液，對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)固定，然后送至重慶醫(yī)科大學(xué)電鏡室進(jìn)行后續(xù)的后固定、脫水、包埋、聚合、切片、染色、觀察。每個(gè)標(biāo)本觀察6～10個(gè)視野，對每個(gè)標(biāo)本的超微結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行比較，并且每個(gè)標(biāo)本選取100個(gè)線粒體進(jìn)行評分。線粒體評分標(biāo)準(zhǔn)參照Flameng分級分為0～4級，分別為0～4分。見表1。

表1 線粒體Flameng評分標(biāo)準(zhǔn)

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以±s表示，組間采用單因素方差（ANOVA）分析，方差齊選用LSD法，方差不齊選用Dunnett T3法行組間兩兩多重比較，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察電鏡下心肌細(xì)胞的損傷主要?dú)w納為以下4點(diǎn)：（1）膜系統(tǒng)損傷（線粒體、肌漿網(wǎng)腫脹、肌膜破裂）；（2）收縮成分破壞；（3）細(xì)胞內(nèi)水腫；（4）糖原顆粒減少。

2.1.1 N組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)描述N組細(xì)胞質(zhì)中有豐富的線粒體，呈圓形或橢圓形，且排列整齊。線粒體嵴密集，充滿整個(gè)線粒體腔，嵴上附著大量基質(zhì)顆粒；細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，呈長桿狀，核膜完整，兩層核膜清晰可辨；細(xì)胞縱切面可見細(xì)胞質(zhì)充滿縱行排列的肌原纖維：I帶、A帶、H帶與M線均清晰可辨，形成明暗相間的肌節(jié)結(jié)構(gòu)；核周與肌絲間有少量糖原顆粒；其他細(xì)胞器改變均不明顯。見圖1A。

2.1.2 H/R組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化H/R組心肌細(xì)胞線粒體排列紊亂，基膜基板不清楚，線粒體普遍腫脹、外膜不完整，嵴減少、不規(guī)則或斷裂成絮狀，部分線粒體損傷嚴(yán)重、破裂、溶解，甚至空泡或囊泡化；細(xì)胞核形狀不規(guī)則，核內(nèi)染色質(zhì)凝集，核膜溶解消失；心肌肌原纖維排列紊亂，大面積斷裂融解消失，肌節(jié)結(jié)構(gòu)不清，肌絲溶解減少，Z線可見異常收縮帶；肌漿網(wǎng)橫小管擴(kuò)張，偶見胞內(nèi)脂滴形成。見圖1B。

2.1.3 HP組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化HP組心肌細(xì)胞線粒體大部分輕度腫脹，嵴模糊，嵴間出現(xiàn)透亮低密度影，線粒體膜完整，細(xì)胞核輕度皺縮，核膜完整；肌絲輕度稀疏，偶見斷裂溶解，肌絲排列基本整齊，Z線較清；肌漿網(wǎng)橫小管輕度擴(kuò)張。見圖1C。

2.1.4 ZnP組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化ZnP組心肌細(xì)胞線粒體大部分輕度腫脹，嵴排列稀疏，嵴間可見輕度透亮區(qū)，肌絲改變不明顯，細(xì)胞核輕度改變，肌漿網(wǎng)橫小管輕度擴(kuò)張。見圖1D。

圖1 各組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)電鏡觀察

2.2 大鼠心肌細(xì)胞線粒體評分結(jié)果根據(jù)Flameng評分標(biāo)準(zhǔn)對各組線粒體進(jìn)行評分，N組心肌細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)正常，評分以0分為主；H/R組心肌線粒體損傷以3～4分為主，損傷最嚴(yán)重；HP組和ZnP組評分以2～3分為主，損傷程度介于N組和H/R組之間。N組、HP組、ZnP組線粒體評分[（0.25±0.44）、（1.13±0.44）、（1.23±0.45）分]較H/R組[（3.33±0.65）分]低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；HP組與ZnP組線粒體評分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但均高于N組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

目前研究認(rèn)為，缺血/藥物預(yù)處理是缺血心臟強(qiáng)而有效的內(nèi)源性保護(hù)現(xiàn)象，可以減輕缺血再灌注后心肌壞死與心肌功能障礙，減少惡性心律失常的發(fā)生，促進(jìn)血管再生[3]。內(nèi)源性心臟保護(hù)的機(jī)制主要是通過誘導(dǎo)觸發(fā)多種內(nèi)因子釋放，經(jīng)多條細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的介導(dǎo)[如：由磷脂酰3激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）、P38、c-Jun氨基末端激酶（JNK）及細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）等組成的RISK及蛋白激酶C（PKC）等途徑]，作用于多種效應(yīng)器，影響氧自由基產(chǎn)生、鈣超載、心肌細(xì)胞凋亡等缺血再灌注損傷的關(guān)鍵環(huán)節(jié)而發(fā)揮心肌細(xì)胞保護(hù)作用[4]。近年來外源性鋅預(yù)處理用于對抗缺血再灌注對心肌損傷的研究越來越多，鋅在藥物預(yù)處理中的顯著效果越來越受到重視。

鋅作為人體內(nèi)重要的微量元素，在人體各項(xiàng)生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要作用。鋅離子是構(gòu)成機(jī)體各種酶、蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)[5]，鋅與生物膜的穩(wěn)定性、抗氧化活性、基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞免疫、細(xì)胞凋亡及其毒性作用等相關(guān)[6]。因此，鋅離子在體內(nèi)的失衡和紊亂都會(huì)對機(jī)體產(chǎn)生嚴(yán)重?fù)p害。目前隨著研究的深入，有研究者發(fā)現(xiàn)鋅預(yù)處理心肌可對缺血再灌注心肌產(chǎn)生改善心肌能量代謝、減輕鈣超載，抑制炎性反應(yīng)的作用[7]；鋅與維生素E同食可抑制抗凋亡基因Survivin[8]、Caspase-3[9]與心肌凋亡促進(jìn)因子Smac[10]的表達(dá)，從而達(dá)到抑制心肌細(xì)胞凋亡的作用。鋅指蛋白ZFP580[11]、心肌缺血預(yù)適應(yīng)上調(diào)蛋白1（Mipu1）[12]等鋅依賴蛋白的上調(diào)均可在MIRI修復(fù)過程中發(fā)揮心肌保護(hù)作用。在臨床醫(yī)療中，宋瑞等[13]研究發(fā)現(xiàn)，使用葡萄糖酸鋅片進(jìn)行術(shù)前補(bǔ)鋅能減輕先天性心臟病患兒體外循環(huán)心內(nèi)直視手術(shù)MIRI。以上幾項(xiàng)研究結(jié)果的發(fā)現(xiàn)都與微量元素鋅的存在密不可分，可見鋅在對抗MIRI過程中有著舉足輕重的地位。

細(xì)胞的超微病理改變是反映細(xì)胞損傷和修復(fù)最直觀、最有效的指標(biāo)[14-15]。本研究電鏡超微結(jié)構(gòu)變化顯示，H/R組心肌細(xì)胞出現(xiàn)線粒體排列紊亂，基膜基板不清楚，線粒體普遍腫脹，空泡或囊泡化，外膜不完整，嵴減少、不規(guī)則或斷裂成絮狀，部分線粒體損傷嚴(yán)重、破裂、溶解；細(xì)胞核形狀不規(guī)則，核內(nèi)染色質(zhì)凝集，核膜溶解消失，心肌肌原纖維排列紊亂且大面積斷裂融合消失，肌節(jié)結(jié)構(gòu)不清，肌絲溶解減少，Z線可見異常收縮帶，肌漿網(wǎng)擴(kuò)張等一系列的損傷表現(xiàn)。這一結(jié)果與徐鵬等[16]的研究結(jié)果相似，說明本實(shí)驗(yàn)的缺氧/復(fù)氧模型成功建立。ZnSO4預(yù)處理之后的心肌細(xì)胞在進(jìn)行缺氧/復(fù)氧以后，心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的損傷程度較單純H/R組輕。說明本實(shí)驗(yàn)從形態(tài)學(xué)角度證明硫酸鋅預(yù)處理對原代培養(yǎng)成年大鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷具有一定的保護(hù)作用。

缺血再灌注可通過多種途徑造成心肌細(xì)胞線粒體損傷，線粒體在細(xì)胞凋亡的過程中起著樞紐作用[17]。因此，線粒體超微結(jié)構(gòu)的改變在心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷中是評判心肌細(xì)胞損傷程度的重要指標(biāo)。而線粒體Flameng評分正是對線粒體超微結(jié)構(gòu)改變的半定量評定。本研究結(jié)果中ZnP組線粒體Flameng評分明顯低于H/R組。這一結(jié)果從形態(tài)學(xué)角度證明了鋅預(yù)處理對心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧造成的線粒體損傷具有一定的保護(hù)作用。然而其具體保護(hù)機(jī)制卻錯(cuò)綜復(fù)雜，本研究未對其作用機(jī)制進(jìn)行研究分析，因此，還需要在以后的科研工作中進(jìn)一步挖掘探索。

與HP組比較，ZnSO4對心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了與其相當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)效果。因此，從形態(tài)學(xué)角度推測，ZnSO4預(yù)處理可替代缺氧預(yù)處理，對缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)作用。但是這2種預(yù)處理方式之間是否通過共同的作用機(jī)制產(chǎn)生保護(hù)作用還有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，缺氧/復(fù)氧可造成成年大鼠心肌細(xì)胞和線粒體超微結(jié)構(gòu)的損傷，ZnSO4預(yù)處理能夠明顯減輕缺氧/復(fù)氧對心肌細(xì)胞及線粒體超微結(jié)構(gòu)的損傷，而且保護(hù)效果與缺氧預(yù)處理效果相似，證實(shí)微量元素鋅可改善缺氧復(fù)氧對心肌細(xì)胞產(chǎn)生的損傷，具有保護(hù)心肌的作用。

[1]Xu Z，Kim S，Huh J.Zinc plays a critical role in the cardioprotective effect of postconditioning by enhancing the activation of theRISK pathway in rat hearts[J].J Mol Cell Cardiol，2014，66：12-17.

[2]喻守佳，王海英，喻田，等.Nrf2-ARE通路在缺氧/吡那地爾后處理減輕大鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的作用[J].中國病理生理雜志，2013，29（9）：1696-1699.

[3]Sasaki H，F(xiàn)ukuda S，Otani H，et al.Hypoxic preconditioning triggers myocardial angiogenesis：a novel approach to enhance contractile functional reserve in rat with myocardial infarction[J].J Mol Cell Cardiol，2002，34（3）：335-348.

[4]Hausenloy DJ，Yellon DM.Preconditioning and postconditioning：underlying mechanisms and clinical application[J].Atherosclerosis，2009，204（2）：334-341.

[5]Berg JM，Shi Y.The galvanization of biology：a growing appreciation for the roles of zinc[J].Science，1996，271（5252）：1081-1085.

[6]周毅峰，吳永堯，唐巧玉，等.鋅的生物學(xué)功能[J].氨基酸和生物資源，2004，26（2）：11-15.

[7]劉丹，孫品蘭，羅明軍，等.葡萄糖酸鋅對心肌缺血/再灌注損傷保護(hù)作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J].重慶醫(yī)學(xué)，2012，41（5）：461-462.

[8]袁有園.鋅和維生素E對糖尿病大鼠抗凋亡基因survivin表達(dá)的統(tǒng)計(jì)分析[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2011，24（3）：281-283.

[9]袁有園，張端蓮.鋅和維生素E對糖尿病大鼠抗凋亡基因Caspase-3表達(dá)的意義[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2011，24（4）：401-403.

[10]張婷.鋅和維生素E對Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促進(jìn)因子Smac表達(dá)的作用[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2011，24（3）：168-170.

[11]Meng XY，Yu HL，Zhang WC，et al.ZFP580，a novel zinc-finger transcription factor，is involved in cardioprotection of intermittent high-altitude hypoxia against myocardial ischemia-reperfusion injury[J].PLoS One，2014，9（4）：e94635.

[12]Han D，Zhang C，F(xiàn)an WJ，et al.Myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 1（Mipu1）：zinc funger protein 667-a multifunctional KRAB/C2H2 zinc finger protein[J/OL].Braz J Med Biol Res，2014-10-31 [2014-11-20].http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25372717.

[13]宋瑞，高秉仁，趙啟明，等.鋅對體外循環(huán)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].中華小兒外科雜志，2007，28（10）：515-518.

[14]Zhao SM，Han L，Ma LH，et al.Pre-treatment with radix astragali for myocardial cell apoptosis and its relative genes in rats ischemic reperfusion[J]. Chinese J Rehabilit，2005，9（23）226-228.

[15]蘇曉靈，程彥斌，王蠑，等.維拉帕米對缺血再灌注損傷心肌保護(hù)機(jī)制的探討[J].臨床心血管雜志，2003，19（7）：412-415.

[16]徐鵬，喻守佳，陳偉，等.吡那地爾后處理對成年大鼠缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，36（6）：532-535.

[17]Honda HM，Korge P，Weiss JN.Mitochondria and ischemia/reperfusion injury[J].Ann N Y Acad Sci，2005，1047：248-258.

Effects of zinc sulfate pretreatment on cardiomyocytes ultrastructure of adult rats with hypoxia/reoxygenation injury

Hou Weibo，Zhang Yongguo，Wang Ying，Wang Haiying，Yu Tian
（Department of Anesthesiology，Zunyi Medical College，Guizhou，Zunyi 563003，China）

ObjectiveTo approach the effects of zinc sulfate pretreatment on cardiomyocytes ultrastructure of adult rats with hypoxia/reoxygenation injury.MethodsAdult SD rats cardiomyocytes were cultured in vitro and hypoxia/reoxygenation injury models were established，which were randomly divided into 4 groups，including the normal group（group N），the hypoxia/reoxygennation group（group H/R），the hypoxic preconditioning group（group HP）and the znic sulfate（ZnSO4）preconditioning group（group ZnP）.Each group was managed with different intervening measures.In the end，the ultra-structure of cardiomyocytes in each group after hypoxia/reoxygenation could be observed by a transmission electron microscope and scored with mitochondria.ResultsThe ultrastructure of group N，group HP and group ZnP were much better than those of H/R group，and the mitochondria scores of the above-mentioned three groups were lower than those of group H/R whose difference was statistically significant（P＜0.05）.There was no statistical significance in ultrastructure variation and mitochondria score between the group HP and the group ZnP（P＞0.05），but these results were higher than those of group N，whose difference was statistically significant（P＜0.05）. ConclusionHypoxia/reoxygenation is able to cause injury to the cardiomyocytes′ultrastructure of adult rats.ZnSO4precondioning could reduce the cardiomyocytes ultrastructure damage，and the effect is equal to traditional hypoxic preconditioning.

Myocytes，cardiac；Zinc sulfate；Rats；Mitochondria；Ultrastructure；Hypoxia/reoxygennation injury

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.05.007

:A

:1009-5519（2015）05-0657-03

2014-11-25）

貴州省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（黔科合SY[2011]3015）。

侯偉波（1989-），男，陜西咸陽人，碩士研究生，主要從事心肌保護(hù)研究；E-mail：806752595@qq.com。通訊作者：王海英（E-mail：wanghaiting-8901@163.com）。