段樹鵬 朱利紅453100新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院

IL-17在自身免疫性肝炎中的作用

段樹鵬 朱利紅
453100新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院

目的：研究IL-17在自身免疫性肝炎肝組織中的表達(dá)及意義。方法：選取自身免疫性肝炎患者45例，經(jīng)肝穿收集其肝組織，對照組選取正常肝組織10例，采用免疫組化的方法檢測肝組織中的IL-17的表達(dá)情況，并探討IL-17與自身免疫性肝炎纖維化分期相關(guān)性。結(jié)果：自身免疫性肝炎患者肝組織IL-17陽性的表達(dá)量高于對照組（P＜0.01），IL-17和自身免疫性肝炎肝纖維化程度相關(guān)。結(jié)論：IL-17可能參與了自身免疫性肝病的發(fā)病過程，降低IL-17活性程度，可能會(huì)減輕自身免疫性肝炎發(fā)病和纖維化程度。

IL-17；自身免疫性肝炎；肝纖維化

我國為肝炎大國，其中包括自身免疫性肝炎（Autoimmune hepatitis，AIH），其發(fā)病機(jī)制不明，目前研究以免疫方面居多。以往診斷較少，隨著診療技術(shù)的不斷發(fā)展，近年來自身免疫性肝炎發(fā)病率呈上升趨勢，其發(fā)病以女性多見，可發(fā)展為肝硬化，我國人群中AIH的發(fā)病率尚無相關(guān)確切的數(shù)字[1]。目前，關(guān)于白介素-17（Interleukin 17，IL-17）與自身免疫性疾病國內(nèi)外已有不少報(bào)道，但與自身免疫性肝炎相關(guān)性的報(bào)道較少，本研究旨在探討IL-17在自身免疫性肝炎中的作用。

資料與方法

2012年1月-2014年8月收治AIH患者45例，AIH診斷標(biāo)準(zhǔn)參考美國肝病學(xué)會(huì)（American association for the Study of liver disease，AASLD）2010年的AIH診療指南[2]，其中男7例，女38例，平均年齡（43.83±6.18）歲。所選病例均經(jīng)肝臟穿刺活檢確診，并排除乙、丙等病毒性及酒精性、藥物誘導(dǎo)、代謝性、遺傳性因素等。對照組為10例正常肝組織（外傷手術(shù)切除），排除病毒性及酒精性、自身免疫性肝病等。兔抗人IL-17多克隆抗體來自美國Santa cruz公司。

實(shí)驗(yàn)方法：根據(jù)Metavir合作研究小組提出的慢性肝病纖維化評分標(biāo)準(zhǔn)對AIH患者進(jìn)行纖維化評分。纖維化評分：①F0：無纖維化細(xì)胞增生；②F1：匯管區(qū)成纖維細(xì)胞增生并向小葉內(nèi)延伸；③F2：匯管區(qū)周圍或匯管區(qū)成纖維細(xì)胞大量增生并向小葉內(nèi)大量延伸；④F3：分隔性纖維化期，表現(xiàn)為纖維間隔伴結(jié)構(gòu)破壞，無明顯硬化；⑤F4：即硬化期，纖維間隔形成伴有小葉結(jié)構(gòu)紊亂。根據(jù)評分確定F0期l1例、F1期9例、F2期8例、F3期10例、F4期7例。采用免疫組化的方法檢測肝組織中的IL-17的表達(dá)情況，同時(shí)檢測不同病理分期肝組織中的IL-17的表達(dá)情況，探討IL-17意義及相關(guān)性。

免疫組化染色結(jié)果判定：用高數(shù)碼顯微圖像分析系統(tǒng)測定IL-17的陽性細(xì)胞數(shù)，每張切片分別取5個(gè)鏡下（10×10）倍視野，讀取陽性細(xì)胞數(shù)，取其平均值，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

結(jié)果

光鏡下正常肝組織的HE染色可見肝細(xì)胞索排列正常有序，肝板呈放射狀整齊排列，肝竇與匯管區(qū)未見纖維組織增生，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，AIH患者的病理損害多表現(xiàn)為匯管區(qū)漿細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤，典型特征為界面性肝炎和肝細(xì)胞玫瑰花樣改變，IL-17主要表達(dá)于炎性細(xì)胞浸潤明顯的匯管區(qū)，肝細(xì)胞中無表達(dá)，主要在單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的胞漿中，均質(zhì)狀，呈棕色。病理結(jié)果顯示，AIH患者的IL-17陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)明顯增加，10例對照組正常肝臟組織中可見IL-17陽性少量細(xì)胞表達(dá)，見圖1。而且AIH患者肝臟組織中IL-17的表達(dá)強(qiáng)度與肝臟組織學(xué)纖維化程度相關(guān)，病理圖片顯示，肝組織纖維化分期早期時(shí)可見少量肝小葉中央靜脈周圍的肝細(xì)胞漿有陽性表達(dá)，隨肝纖維化分期的增加，棕褐色物質(zhì)較前增多，著色程度亦較前加深，到最后呈強(qiáng)陽性分布于纖維化區(qū)、肝竇區(qū)、血管壁及膽管細(xì)胞，顯示AIH患者肝臟組織中IL-17的表達(dá)強(qiáng)度與肝臟組織學(xué)纖維化程度相關(guān)，纖維化程度越重則表達(dá)越多，見圖2。比較各組陽性細(xì)胞數(shù)，AIH患者肝臟組織表達(dá)IL-17均明顯高于對照組（P＜0.01），見表1。

圖1 肝纖維化組織不同病理分期IL-17表達(dá)（DAB staining，×200）

表1 IL-17在AIH組與對照組肝組織平均陽性細(xì)胞數(shù)比較（±s）

表1 IL-17在AIH組與對照組肝組織平均陽性細(xì)胞數(shù)比較（±s）

注：AIH與對照組，P＜0.01。

組別 AIH 對照組 t P IL-17 38.33±2.31 5.89±2.92 4.855 ＜0.01

討論

作為CD4+T族群的一種新型Th細(xì)胞，Th17細(xì)胞可以抵抗多種細(xì)胞外細(xì)菌和真菌感染，在機(jī)體防御方面發(fā)揮重要的作用，同時(shí)還參與和介導(dǎo)許多自身免疫性疾病的發(fā)病，已被證實(shí)Th17細(xì)胞分泌重要的炎性因子，其能增強(qiáng)炎性細(xì)胞因子如IL-1、IL-6、IL-23的表達(dá)，使單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞迅速增長，引起機(jī)體組織的損害。研究已經(jīng)證明應(yīng)用IL-17基因的小鼠，自身免疫性疾病進(jìn)程得以延緩，嚴(yán)重程度下降[3]。研究發(fā)現(xiàn)在AIH動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，肝臟門管區(qū)IL-17陽性淋巴細(xì)胞浸潤明顯增多，這提示IL-17細(xì)胞可能參與了自身免疫性肝病的發(fā)病過程，并在其發(fā)生發(fā)展中起調(diào)節(jié)作用。有研究顯示IL-17主要通過刺激多種類型的肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生前炎性介質(zhì)及趨化因子，從而對肝臟造成了損傷。在本研究中，AIH患者肝臟組織中IL-17表達(dá)明顯高于正常對照組，說明AIH患者肝臟炎性浸潤細(xì)胞中，細(xì)胞因子IL-17明顯增多，而且隨著AIH纖維化程度的加重，IL-17的表達(dá)亦增加，顯示在AIH的發(fā)病過程中，IL-17可能介導(dǎo)了肝臟的炎癥及纖維化。

圖2 肝纖維化組織不同病理分期的IL-17平均細(xì)胞值

目前醫(yī)學(xué)界仍未能完全攻克AIH，其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，既往AIH的藥物治療主要著重于抑制肝臟的免疫反應(yīng)，主要有皮質(zhì)類固醇激素，作用于免疫系統(tǒng)，抑制T淋巴細(xì)胞活性，硫唑嘌呤則能阻止淋巴細(xì)胞前體的成熟。研究顯示合理的免疫抑制治療患者的緩解率可達(dá)60％～80％，10年患者生存率達(dá)90％[4]。但自身免疫性肝炎一旦發(fā)展為肝硬化，或?qū)に刂委煵荒苣褪艿幕颊?，或已?jīng)發(fā)展到終末期肝病的患者，預(yù)示著不僅治療效果會(huì)很差，而且需要花費(fèi)巨大的治療費(fèi)用。大量的實(shí)驗(yàn)研究已證明，早期的肝纖維化是唯一可以逆轉(zhuǎn)的階段，本研究顯示IL-17與各AIH患者肝臟組織纖維化分期均呈正相關(guān)（圖2），顯然如果通過早期藥物干預(yù)以降低L-17活性程度，可能會(huì)減輕自身免疫性肝病發(fā)病和纖維化程度，同時(shí)為我們今后臨床上自身免疫性肝炎的防治提供了新的思路。

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[4] Krawitt EL.Autoimmune HepatiIis[J].N Engl J Med，2006，354（1）：54-66.

The role of IL-17 in autoimmune hepatitis

Duan Shupeng，Zhu Lihong
The First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical College 453100

Objective：To study the expression and significance of IL-17 in autoimmune hepatitis liver tissue.Methods：45 patients with autoimmune hepatitis were selected.The liver tissue was selected through liver biopsy.The control group selected 10 cases of normal liver tissues.The IL-17 expression in the liver tissue was detected by immunohistochemical method，and the relevance between IL-17 and autoimmune hepatitis fibrosis staging was explored.Results：The IL-17 positive expression in the liver tissue of patients with autoimmune hepatitis was higher than that of the control group（P＜0.01）.IL-17 had relevance with autoimmune hepatitis fibrosis degree.Conclusion：IL-17 may be involved in the pathogenesis process of autoimmune liver disease.Reducing the activity degree of IL-17 may reduce the incidence of autoimmune hepatitis and fibrosis degree.

IL-17；Autoimmune hepatitis；Hepatic fibrosis

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.19.67