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(1.深圳市寶安區(qū)疾病預(yù)防控制中心，廣東 深圳 518101；2.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院；3.廣東醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院)

·臨床醫(yī)學(xué)·

加油站職業(yè)人群紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷影響因素分析

楊建平1，林莉萍2，朱志良1，唐煥文3

(1.深圳市寶安區(qū)疾病預(yù)防控制中心，廣東 深圳 518101；2.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院；3.廣東醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院)

目的探討加油站職業(yè)人群外周靜脈血紅細(xì)胞膜丙二醛(MDA)負(fù)荷及其主要影響因素，為加油站職業(yè)人群的疾病預(yù)防和控制工作提供參考。方法本研究運(yùn)用流行病學(xué)整群抽樣研究方法,抽取加油站健康工作人員97名,以肝素鈉抗凝管采集外周靜脈血樣2 mL，實(shí)驗(yàn)室分離出紅細(xì)胞膜，以考馬斯亮藍(lán)染色法作蛋白定量分析，以硫代巴比妥法(TBA法)分析紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷；利用調(diào)查問卷對可能影響MDA負(fù)荷的因素進(jìn)行調(diào)查;以MDA負(fù)荷中位數(shù)作為臨界值，將各樣本紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷實(shí)測值轉(zhuǎn)化為二分變量的應(yīng)變量,以被調(diào)查的可能影響因素為自變量,運(yùn)用單因素和多因素的非條件Logistic回歸分析方法探索影響MDA負(fù)荷的主要因素。結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),在被調(diào)查的9個可能影響因素當(dāng)中，工人的工齡、飲茶習(xí)慣、吸煙情況及工種等4個因素最終進(jìn)入回歸方程。結(jié)論工人的工齡、飲茶習(xí)慣、吸煙情況及工種等是加油站工人紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷的主要影響因素。

加油站； 職業(yè)人群； 紅細(xì)胞膜； MDA； 影響因素； Logistic回歸分析

近年來，隨著機(jī)動車保有量的與日俱增，成品油消耗量急劇增加。按照國家統(tǒng)計(jì)局口徑，2010年中國國內(nèi)三大類成品油(汽油、煤油、柴油)表觀消費(fèi)量為2.46億噸，同比增長11.8%，高于過去10年8%的年均增長水平[1]。成品油的大規(guī)模消耗帶來了十分嚴(yán)峻的環(huán)境與健康問題。汽油中含有大量的甲基叔丁基醚、苯、甲苯、二甲苯等有毒有害成分，其對人群健康的損害倍受廣泛關(guān)注。為探討汽油在職業(yè)環(huán)境條件下對職業(yè)工人脂質(zhì)過氧化損傷現(xiàn)狀,本課題初步調(diào)查了華南地區(qū)加油站工作人員外周靜脈血紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化終產(chǎn)物MDA負(fù)荷情況及其主要影響因素，為加油站職業(yè)人群的疾病預(yù)防與控制工作提供參考。

1 資料與方法

1.1加油站職業(yè)人群流行病學(xué)調(diào)查運(yùn)用流行病學(xué)整群抽樣研究方法,抽取了華南經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)交通干道旁的8家加油站的97名在崗職工，對其基本情況、行為習(xí)慣、職業(yè)有關(guān)因素及既往疾病情況等進(jìn)行了現(xiàn)場調(diào)查；以肝素鈉抗凝管抽取外周靜脈血樣2 mL，4 ℃冷藏，作紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化損傷產(chǎn)物丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量分析。

本次共調(diào)查加油站工作人員97名,獲有效問卷資料97份，其中男性58名，女性39名，平均年齡27.68±6.57歲，平均工齡5.17±3.76年，外周血紅細(xì)胞膜MDA平均負(fù)荷水平為4.79±1.37 μmol/g。以自制的調(diào)查表,對職業(yè)工人的年齡、性別、文化程度、工齡、吸煙情況、飲酒情況、工種、飲茶習(xí)慣、防護(hù)服使用情況等9個因素進(jìn)行了調(diào)查。

1.2主要儀器和試劑Hettich-Universal 32R型臺式低溫高速離心機(jī)(Beckman公司);PU-8800型紫外分光光度計(jì);100、200、1 000 μL可調(diào)移液器(德國Gilson公司);DK-8D型電熱恒溫水槽(上海醫(yī)用恒溫設(shè)備廠);5720型pH計(jì)(美國Beckman公司);PU-8800型紫外分光光度計(jì);-70 ℃超低溫冰箱(日本SANYO);ZK81型微型真空泵(上海浦江分析儀器廠)；FM70型顆粒制冰機(jī)(Grant公司)等。MDA含量測定試劑盒和考馬斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒(南京建成);pH 7.5 Tris-HCl液(自配);冰醋酸,無水乙醇等。

1.3紅細(xì)胞膜的抽提與保存按試劑說明操作：取上述冷藏血樣2 mL,轉(zhuǎn)速1 800 g/min離心5 min,棄血漿,加10 mmol/L Tris-HCl(體積比為1∶2)，混勻后以1 800 g/min離心5 min,去上清液及白細(xì)胞,重復(fù)洗滌3次,棄上清,留壓積紅細(xì)胞;以體積比1∶10加預(yù)冷雙蒸水充分溶血;以10 000 g/min于4 ℃低溫離心20 min,棄上清,加10 mmol/L pH7.4 Tris-HCl(體積比為1∶10),反復(fù)混勻洗滌3次,收集紅細(xì)胞膜,以EP管封存,-70℃低溫保存?zhèn)溆肹2]。

1.4考馬斯亮藍(lán)比色法紅細(xì)胞膜蛋白含量的測定按照試劑盒說明書步驟進(jìn)行，使用考馬斯亮藍(lán)比色法。含量計(jì)算公式為:蛋白含量(g/L)=(測定管A值/標(biāo)準(zhǔn)管A值)×標(biāo)準(zhǔn)管濃度(g/L)[2]。

1.5硫代巴比妥法紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷測定按試劑盒說明進(jìn)行：使用硫代巴比妥法(thiobarbituric acid method,TBA法)。負(fù)荷計(jì)算公式為：MDA含量(μmol/g)=[(A測定管-A測定空白管)/(A標(biāo)準(zhǔn)管-A標(biāo)準(zhǔn)空白管)] ×標(biāo)準(zhǔn)品濃度(10 μmol/L)÷蛋白含量(g/L)[2]。

1.6資料的量化處理數(shù)值變量采用原數(shù)值輸入，原變量為分類或等級指標(biāo)者,按一定邏輯關(guān)系進(jìn)行量化處理,輸入量化后的數(shù)值。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析影響MDA負(fù)荷的主要因素運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。MDA負(fù)荷作為應(yīng)變量，以測量值中位數(shù)作為臨界值，小于臨界值者設(shè)為0,大于臨界值者設(shè)為1,構(gòu)成二分變量資料。以被調(diào)查的所有可能影響因素作為自變量，先進(jìn)行單因素Logistic回歸分析，再對差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義的因素進(jìn)行多因素的Logistic回歸分析，α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1資料的量化賦值應(yīng)變量和自變量的量化賦值遵循一定的邏輯關(guān)系，量化賦值情況如表1所示。

表1加油站職業(yè)人群紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷及影響因素量化賦值

變量名賦值方式年齡(y)以原變量值輸入工齡(y)以原變量值輸入性別男=0,女=1教育程度小學(xué)及以下=1,初中=2,高中=3,大專及以上=4飲茶習(xí)慣很少喝=1,偶爾喝=2,經(jīng)常喝=3吸煙情況極少吸煙=1,偶爾吸煙=2,經(jīng)常吸煙=3飲酒情況極少飲酒=1,偶爾飲酒=2,經(jīng)常飲酒=3工種行政、后勤、收銀人員等=1,加油工=2防護(hù)服使用情況從不使用=1,偶爾使用=2,經(jīng)常使用=3MDA負(fù)荷分類小于臨界值=1,大于臨界值=2

2.2單因素Logistic回歸分析結(jié)果以紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷分類賦值二分變量作為應(yīng)變量，以上述9個可能影響因素為自變量，采用強(qiáng)制方式(Enter)進(jìn)行單因素的Logistic回歸分析(表2)。

表2加油站職業(yè)人群紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷影響因素單因素Logistic回歸分析結(jié)果

變量名β值OR值95%CIP值年齡(y)0.0311.0320.901^1.1340.056工齡(y)1.1493.1552.137^3.9450.000性別-0.0140.9860.895^1.1350.059教育程度0.0051.0050.917^1.1580.163飲茶習(xí)慣-0.4510.6370.552^0.7960.017吸煙情況0.8372.3101.896^2.8570.013飲酒情況0.1171.1240.907^1.2650.053工種1.1793.2512.137^4.1200.000防護(hù)服使用情況----

2.3多因素Logistic回歸分析結(jié)果對單因素回歸分析意義顯著的(P<0.05)的工齡、飲茶習(xí)慣、吸煙情況、工種等4個因素進(jìn)行多因素的Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，工齡、飲茶習(xí)慣、吸煙情況及工種均再次進(jìn)入回歸方程(表3)。

表3加油站職業(yè)人群紅細(xì)胞膜MDA負(fù)荷影響因素多因素Logistic回歸分析結(jié)果

變量名β值OR值95%CIP值工齡(y)1.0142.7562.224^3.5010.000飲茶習(xí)慣-0.4080.6650.576^0.7750.002吸煙情況0.6992.0121.745^2.6520.021工種1.0342.8122.223^3.3100.000

3 討 論

從2001年到2010年,中國汽車產(chǎn)、銷量劇增近10倍。至2011年末，中國民用汽車保有量首次突破1億輛關(guān)口，達(dá)到10578萬輛，位居世界第二(美國2.85億輛，位居第一)，其中私人汽車保有量7872萬輛，比上年增長 20.4%[3]。隨著汽車保有量的與日俱增，汽油消耗量的急劇增加，帶來了十分嚴(yán)峻的環(huán)境與健康問題。汽油中的苯、甲苯、二甲苯等有毒有害成分對人群健康的損害倍受廣泛關(guān)注，人體的脂質(zhì)過氧化損傷問題就是其中之一[4-5]。苯系物的毒作用與其在體內(nèi)代謝過程中產(chǎn)生的多種自由基密切相關(guān)，如羥基自由基、超氧陰離子自由基等[6-9]。研究發(fā)現(xiàn),苯、甲苯、二甲苯單獨(dú)或聯(lián)合作用，可加劇機(jī)體的脂質(zhì)過氧化反應(yīng),打破生物機(jī)體的氧化與抗氧化防御體系的動態(tài)平衡。MDA是衡量脂質(zhì)過氧化損傷程度的重要指標(biāo)，其在體內(nèi)負(fù)荷的動態(tài)變化反應(yīng)著生物機(jī)體的抗氧化防御體系的功能。加油站職業(yè)人群由于長期接觸石油制品，對苯系物暴露引起的脂質(zhì)過氧化損傷不可避免，因此，加強(qiáng)對職業(yè)工人脂質(zhì)過氧化損傷及其主要影因素的職業(yè)衛(wèi)生調(diào)查監(jiān)測非常重要。本次調(diào)查對8家加油站97名在崗職工的基本情況、行為習(xí)慣、職業(yè)有關(guān)因素等方面的9個可能影響MDA負(fù)荷的因素進(jìn)行了單因素和多因素的Logistic回歸分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)工齡、飲茶習(xí)慣、吸煙情況及工種等4個因素對工人MDA負(fù)荷的影響具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義(P<0.05)，回歸系數(shù)及OR值提示，工齡越長，MDA負(fù)荷水平越高，生產(chǎn)一線的加油工MDA負(fù)荷高于行政、后勤及收銀員等輔助崗位人員，這可能與工人接觸汽油制品的濃度高低和時間長短有關(guān)；飲茶習(xí)慣β值為-0.408，OR值為0.665，提示飲茶習(xí)慣能有效地抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，可能與茶葉中的茶多酚(TP)抗氧化有關(guān)；吸煙情況β值為0.699，OR值為2.012，提示吸煙情況促進(jìn)了MDA負(fù)荷增加,這可能與煙氣毒性成份的聯(lián)合毒作用有關(guān)。因此,在加油站職業(yè)工人的疾病預(yù)防和控制工作實(shí)踐當(dāng)中，上述4個方面的因素應(yīng)引起關(guān)注。

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AnalysisonInfluenceFactorsofMDAinErythrocyteMembraneAmongGasStationAttendants

YANG Jianping，LIN Liping，ZHU Zhiliang，et al

(BranchofOccupationalDiseasePrevention,BaoanCenterforDiseaseControlandPreventionofShenzhen，Shenzhen，Guangdong518101，China)

ObjectiveTo explore the content of malondialdehyde (MDA) in erythrocyte membrane among gas station attendants and its main influence factors.MethodCluster sampling method was conducted to investigate 97 healthy gas station attendants.2ml peripheral venous blood sample from each participant was collected with heparin sodium anticoagulation tubes.Erythrocyte membrane was separated in laboratory.Protein quantitative analysis was done with method of Coomassie blue staining.MDA content in erythrocyte membrane was analyzed by using thiobarbituric method (TBA method).Potential influence factors of MDA were investigated with self-made questionnaires.With the median of MDA content as cut off point,all observed values of MDA were transformed to dichotomized variables,and with MDA as dependent variable,all potential influence factors as independent variables,univariate and multivariate logistic regression analysis were performed to estimate OR and 95%CI.Result4 from 9 potential influence factors including length of service,the habit of tea drinking,smoking and the type of job entered the regression equation.ConclusionLength of service,the habit of tea drinking,smoking and the type of job may be the main influence factors of MDA in erythrocyte membrane among gas station attendants.

gas station attendants; occupational worker; erythrocyte membrane; MDA; influence factors; logistic regression analysis

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.03.013

2015-01-21；

2015-02-02

R135.2

A

(此文編輯：朱雯霞)