韋冠東，湯德元，曾智勇，王洪光，李 達

（貴州大學動物科學學院，貴州 貴陽 550025）

某豬場4種豬病毒性疫病抗體水平檢測及分析

韋冠東，湯德元*，曾智勇，王洪光，李 達

（貴州大學動物科學學院，貴州 貴陽 550025）

為了解貴州省某規(guī)?；i場4種豬常見病毒性疫病的抗體水平及感染情況，實驗采用ELISA抗體檢測法，對該豬場送檢的370份血清進行了CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 4種抗體水平檢測。實驗結果表明：該豬場種豬CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 抗體陽性率分別為100%、94.74%、100%、5.26%，保育豬CSFV、PRRSV、PCV2和PRV 抗體陽性率分別為94.44%、83.33%、16.7%、5.56%；其中種豬CSF、PRRS、PCV2、PR已接種疫苗；保育豬CSF、PRRS、PR已接種疫苗，未接種PCV2疫苗，上述數(shù)據(jù)說明該豬場種豬CSF、PCV2、PRRS、PR免疫效果較好；保育豬CSF、PRRS、PR免疫效果較好，PCV2有野毒感染現(xiàn)象。該豬場種豬應在保育豬階段做好PCV2的預防接種工作，同時做好豬場的疫病凈化措施。

豬場；病毒性疫??；ELISA；檢測

近年來，貴州省養(yǎng)豬業(yè)的規(guī)?；?、集約化進程發(fā)展迅速，豬場豬的流動和引種工作較過去更加頻繁，而規(guī)?；i場母豬發(fā)生繁殖障礙性疾病的現(xiàn)象日益突出，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴重的經(jīng)濟損失。據(jù)相關報道，豬繁殖障礙性疾病嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)的經(jīng)濟效益，在規(guī)?；i場中的發(fā)病率達15%～35%，已成為豬場中最重要的疾病之一[1]。豬繁殖障礙性疾病主要由營養(yǎng)、管理等非傳染因素和病毒、細菌、寄生蟲等傳染因素獨立或相互作用而引起。其中病毒性疫病因素，如豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬圓環(huán)病毒II型(PCV2)、豬偽狂犬病毒(PRV)等是引起母豬繁殖障礙性疾病的主要原因[2-3]。本試驗對貴州省某規(guī)?；i場送檢的370份血清樣本，應用間接ELISA方法對上述4種病毒性疫病進行了抗體檢測：結果表明該豬場種豬CSF、PCV2、PRRS和PR免疫效果較好；保育豬CSF、PRRS、PR免疫效果較好，PCV2有野毒感染現(xiàn)象。上述數(shù)據(jù)說明該豬場保育豬應做好PCV2的預防接種工作，同時做好豬場的疫病凈化措施。

表1 豬群4種疫病抗體水平的檢測

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品

2015年3月貴州省某規(guī)?；i場送檢的370份血清樣本，其中種豬190份，保育豬180份。

1.1.2 主要試劑

豬瘟病毒ELISA診斷試劑盒(批號：150202)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA診斷試劑盒(批號：140302)、豬圓環(huán)病毒II型ELISA診斷試劑盒(批號：140302)、豬偽狂犬病毒gE蛋白ELISA診斷試劑盒(批號：150101)，均購自武漢科前動物制品有限責任公司。

表2 種豬4種疫病抗體水平的檢測

表3 保育豬4種疫病抗體水平的檢測

1.2 檢測方法

離心分離血清前將血液樣本放置于37 ℃恒溫箱中作用1～1.5 h后，轉移至4 ℃冰箱過夜，在室溫下3 000 r/ min離心5 min，收集血清于EP管中，標記后按照4種豬病毒病ELISA試劑盒操作步驟進行抗體水平檢測并進行分析。

2 結果與分析

2.1 ELISA檢測抗體水平總結果

CSF、 PRRS、 PCV2和PR 4種病毒性疫病抗體水平檢測結果見表1。

從表1中可以看出，CSFV、PRSSV、PCV2和PRV的抗體陽性率分別為97.30%（360/370）、89.19（330/370）、59.73%（221/370）、5.41%（20/370）。由于該豬場種豬和保育豬都接種了CSF、PRSS疫苗，因此該豬場這2種疫病的抗體合格率達到了《2014年國家動物疫病強制免疫計劃》存欄豬抗體合格率≥70%的要求，且免疫效果均較為理想；由于該規(guī)?；i場給種豬、保育豬接種gE基因缺失的PRV疫苗，經(jīng)豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測，陽性率為5.41%。該數(shù)據(jù)說明野毒感染率為5.41%，免疫效果較理想；該豬場保育豬未接種PCV2，致使PCV2的抗體陽性率為59.73%，表明該豬場很可能受到PCV2的野毒感染。

2.2 種豬群4種抗體水平檢測結果

CSF、PRSS、PCV2和PR 4種病毒性疫病在種豬群的檢測的抗體水平結果見表2。

由于該豬場種豬免疫接種CSF、PRSS、PCV2和PRVgE基因缺失疫苗，對豬場送檢的免疫豬群血清抗體ELISA檢測結果顯示，種豬CSFV、PRSSV、PCV2的抗體陽性率為100%（190/190）、94.74%（180/190）、100%（190/190），免疫情況較理想，均達到了農(nóng)業(yè)部《2014年國家動物疫病強制免疫計劃》抗體合格率≥70%的規(guī)定。種豬接種免疫PRVgE基因缺失疫苗，豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測PRV的陽性率為5.26%（10/190），免疫效果較理想。

2.3 保育豬群4種抗體水平檢測結果

CSF、PRSSV、PCV2和PR 4種病毒性疫病在保育豬群檢測的抗體水平結果見表3。

由于該豬場保育豬免疫接種過CSF、PRSS、PRVgE基 因 缺 失 疫苗，對豬場送檢的免疫豬群血清抗體ELISA檢測結果顯示，保育豬CSF和PRSSV的抗體陽性率分別為94.44%（170/180）、83.3%（150/180），免疫情況較理想，均達到了農(nóng)業(yè)部《2014年國家動物疫病強制免疫計劃》抗體合格率≥70%的規(guī)定。保育豬接種免疫PRVgE基因缺失疫苗，豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測PRV的陽性率為5.56%（10/180），免疫效果較理想。該豬場保育豬由于未接種免疫PCV2疫苗，抗體水平檢測PCV2的陽性率為16.7%（30/180），可能為PCV2的野毒感染，應引起重視。

3 結論與討論

檢測結果表明，該豬場種豬CSF、PRSS、PCV2和PRV的防控因接種了疫苗，其抗體陽性率均達到國家免疫要求，免疫效果較理想；但豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測結果表明有5.26%的種豬有野毒感染，建議該豬場淘汰有野毒感染的種豬，做好PR的凈化工作。該豬場保育豬疫苗接種了CSF、PRSS和PR疫苗，其抗體陽性率均達到國家免疫要求，免疫效果較理想；但豬偽狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗體檢測試劑盒檢測結果表明有5.56%的保育豬有野毒感染，建議該豬場淘汰有野毒感染的保育豬，做好PR的凈化工作；未接種PCV2疫苗的保育豬抗體陽性檢測率為16.7%，存在野毒感染，建議該豬場做好PCV2的防控工作，同時采取措施對豬群進行凈化。

國內(nèi)規(guī)模化豬場PCV2感染的血清學調(diào)查結果顯示，國內(nèi)豬場中普遍存在PCV2野毒感染。本次檢測結果表明，該豬場中也存在PCV2野毒感染。PCV2主要干擾和破壞機體抗體的產(chǎn)生和維持，從而破壞豬的免疫系統(tǒng)，致使豬群抵抗力下降，易繼發(fā)或并發(fā)其他疾病。目前認為接種疫苗是防制PCV2野毒感染的最好方法。大量的試驗己證實，接種免疫PCV2疫苗的豬群發(fā)病率和死亡率明顯降低，且飼料轉化率、胴體品質(zhì)等明顯優(yōu)于未接種PCV2疫苗的豬群。

鑒于該豬場的設施及環(huán)境，筆者建議該豬場應制定免疫前抗體水平的檢測和免疫后抗體水平的監(jiān)測，從而可通過病原檢測或抗體監(jiān)測淘汰亞臨床感染或隱形感染豬群，以期凈化豬場的相關疫病。由于血清學檢測不能準確說明機體病原的感染現(xiàn)狀，對于該豬場的疫病情況應結合流行病學、臨診癥狀、病原學及PCR等檢測技術，以期提高檢測的準確性，為豬場疫病的防控提供重要依據(jù)。此外，還應注重加強飼養(yǎng)管理，做好消毒，滅鼠等工作和建立完善的免疫程序，從而為有效控制和逐步凈化豬繁殖障礙性疫病提供有力的保障。

[1] 李永志.影響豬繁殖障礙的因素及防治措施[J].中國畜禽種業(yè)，2009(11)：58-59.

[2] 蔣春燕，何海健，葉秀娟，等.集約化豬場主要疾病及防控對策[J].動物醫(yī)學進展，2012，33(8)：101-104.

[3] 劉建，湯德元，羅險峰，等.規(guī)?；i場主要病毒性疫病的診斷技術研究進展[J].中國動物保健，2012，14 (1)：18-24.

2015-04-30）

韋冠東（1990-），男，碩士研究生，主要從事動物傳染病病原分子生物學的科研學習。

*通訊作者：湯德元（1964-），男，教授，博士，碩士生導師，主要從事動物傳染病病原分子生物學和中西獸醫(yī)結合的教學科研工作。E-mail: tdyuan@163.com