吳建清 吳莉萍

卵巢癌患者血清可溶性B7-H4和HE4水平的變化及其臨床意義

吳建清 吳莉萍

目的 探討血清可溶性B7-H4（sB7-H4）和人附睪蛋白-4（HE4）水平在卵巢癌患者中的變化及臨床意義。方法 應用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測50例卵巢癌患者和50例良性上皮性卵巢腫瘤血清sB7-H4和HE4水平，并以50例健康體檢者做對照組。結果 卵巢癌患者組血清中sB7-H4和HE4水平均高于良性上皮性卵巢腫瘤組和正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；隨著病變程度加重，血清中sB7-H4和HE4水平顯著增加；相關性分析表明，血清sB7-H4和HE4水平呈顯著正相關（r=0.633；均P＜0.05）。結論 sB7-H4和HE4在卵巢癌發(fā)生發(fā)展過程中可能起重要作用，且與卵巢癌病變嚴重程度相關，血清sB7-H4和HE4含量檢測有助于判斷病情的程度。

卵巢癌 可溶性B7-H4 人附睪蛋白-4

卵巢癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，病死率居婦科腫瘤之首，嚴重威脅婦女健康。B7-H4是近年來發(fā)現(xiàn)的協(xié)同刺激因子B7家族成員，其在多種腫瘤組織中高表達，與惡性腫瘤尤其是卵巢癌關系密切，可能是卵巢癌的一種新型腫瘤標志物［1］。人附睪蛋白-4（HE4）是新型的腫瘤標志物，用于檢測卵巢癌的診斷已開始引起學者們的關注［2］。作者通過測定卵巢癌患者血清B7-H4和HE4的濃度變化，了解其在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為卵巢癌患者早期診斷和病情監(jiān)測提供實驗依據(jù)。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2013年6月至2014年9月嘉興市婦幼保健院住院的，經(jīng)病理檢查確診的卵巢癌患者50例，入院前患者＜3個月均未應用任何藥物、化療或放療治療，年齡21～68歲，平均年齡（54.5±9.8）歲。納入標準：（1）均為初次手術。（2）經(jīng)臨床、影像學診斷，病理檢查確診。（3）根據(jù)2000年FIGO手術病理分期標準，I期20例、Ⅱ期15例、Ⅲ期9 例、Ⅳ期6例。早期（I/II期）患者行卵巢癌根治術，晚期（III/Ⅳ期）患者行腫瘤細胞減滅術。50例良性上皮性卵巢腫瘤（漿液性囊腺瘤21例、黏液性囊腺瘤29例），年齡23～65歲，平均年齡（52.9±10.6）歲。排除：血小板異常、血栓性疾病、內(nèi)分泌疾病及其他器官腫瘤病史。納入患者采血時均非月經(jīng)期。對照組50例，均為桐鄉(xiāng)市洲泉鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院體檢健康的婦女。年齡20～69歲，平均（52.5±10.2）歲。各組的年齡差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法 所有受檢者清晨空腹抽取靜脈血5ml，離心5min，3000r/min，血清分離后放-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用ELISA測定血清中sB7-H4和HE4，試劑盒購自

2.1 卵巢癌組、良性上皮性卵巢腫瘤組和對照組的血清sB7-H4和HE4 水平比較 見表1。

表1 卵巢癌患者與正常人血清sB7-H4和HE4水平的變化（x±s）

注：與對照組比較，*P＜0.05，與良性上皮性卵巢腫瘤組比較，#P＜0.05

2.2 不同臨床分期卵巢癌組血清sB7-H4和HE4水平比較 見表2。美國ADL公司和上海西唐生物科技有限公司，按試劑盒說明書要求操作。

表2 不同臨床分期卵巢癌患者血清sB7-H4和HE4水平比較（x±s）

1.3 統(tǒng)計學分析 采用的SPSS16.0軟件。數(shù)據(jù)以（x±s）表示，采用t檢驗，相關分析用Person 相關分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.3 卵巢癌患者sB7-H4和HE4相關性分析 sB7-H4水平和HE4水平經(jīng)正態(tài)性檢驗，均屬正態(tài)分布，相關性分析結果顯示：sB7-H4水平和HE4水平呈正相關（r=0.633，P＜0.01）。

3 討論

卵巢癌是女性生殖系常見的三大惡性腫瘤之一，發(fā)病率為 40/10萬，病死率為婦科腫瘤之首，近年來其發(fā)病率不斷升高且有年輕化趨勢。卵巢癌由于其缺乏早期癥狀和體征，故早期診斷困難，病死率較高，如果卵巢癌能在早期發(fā)現(xiàn)，以目前的醫(yī)療水平Ⅰ期卵巢癌患者治愈率達94%［3］，然而大部分卵巢癌發(fā)現(xiàn)于晚期，預知的5年生存率僅為15%左右，因此尋找一種新的特異性強、靈敏性高的有價值的血清腫瘤標志物成為目前卵巢癌的早期診斷亟待解決的課題。B7-H4是最近發(fā)現(xiàn)的一種在卵巢癌早期患者中高表達的負性協(xié)同刺激因子，在卵巢癌中對活化的T細胞起負調節(jié)作用，其機制可能是通過抑制T細胞的增殖、細胞因子的產(chǎn)生和細胞周期的進程來負性調控T細胞的免疫應答，與腫瘤的免疫逃逸有關，很可能是一種新的腫瘤標志物［4］。研究發(fā)現(xiàn)B7-H4在腫瘤細胞中的表達主要有兩種形式，其一是以跨膜形式表達于腫瘤細胞表面，其二是表達于腫瘤細胞胞漿中。與正常組織表達形成對照的是，85%的卵巢癌細胞表面表達B7-H4，這使之有望成為卵巢癌特異性標志物［5］。HE4即人附睪蛋白-4，又名核心表位蛋白，屬于抑蛋白酶家族，最早于1991年由Kirchhoff等從人附睪遠端上皮細胞中發(fā)現(xiàn)，是附睪特異性生育相關蛋白。研究表明，HE4是新近提出的卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌腫瘤標志物，它在卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌高度表達，在患者血清中檢則到HE4水平顯著升高，而在非婦科腫瘤患者血清中未見HE4升高。HE4較癌抗原125靈敏度高、特異性好，可用于患者確診、術后復發(fā)監(jiān)測和治療反應評價等，已經(jīng)成為盆腔腫瘤新的標志物［6］。

本資料表明，卵巢癌組血清sB7-H4和HE4水平顯著高于良性上皮性卵巢腫瘤組和對照組（P＜0.01），而良性上皮性卵巢腫瘤組和對照組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），與國外學者［7］研究結果相符。這提示血清sB7-H4和HE4水平的高低與卵巢癌的發(fā)生與發(fā)展密切相關，可作為卵巢癌早期診斷的血清標志物，并用于卵巢癌早期輔助診斷、療效評價。有研究顯示與正?；颊吆土夹约膊〉幕颊呦啾?，卵巢癌患者血清中B7-H4的表達顯著升高，血清中B7-H4 在大多數(shù)的卵巢漿液性癌和卵巢子宮內(nèi)膜樣癌血清中的表達較卵巢軸液性癌相對較高表達［8］。與本資料結果相一致。盧仁泉等［9］檢測82例卵巢癌患者、26例卵巢良性疾病患者及40名健康對照者血清HE4水平，發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者HF4水平明顯高于健康者以及卵巢良性疾病患者，差異有統(tǒng)計學意義，通過與傳統(tǒng)的卵巢癌標志CAl25比較發(fā)現(xiàn)，在相同特異度的情況下，兩組HE4的敏感度均稍高于CAl25，進一步確認了HE4對早期診斷卵巢癌的價值，與本資料相符。進一步研究結果顯示不同臨床分期宮頸癌患者隨著病情加重血清sB7-H4和HE4水平有增高趨勢，但I期和II期比較差異無顯著性（P＞0.05），I、II期卵巢癌患者血清sB7-H4水平顯著低于Ⅲ/Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），這一結果提示sB7-H4和HE4可作為宮頸癌患者的預警分子，可能對宮頸癌的早期診斷有提示作用，可以作為判斷宮頸癌病情發(fā)展的標志物。有研究表明血清B7-H4蛋白水平與上皮性卵巢癌患者的臨床FIGO分期（I+II、Ⅲ+Ⅳ）和腫瘤分化程度有關，B7-H4可以較好的反映卵巢癌的嚴重程度，提示其與上皮性卵巢癌的臨床進展密切相關，并可能用于卵巢癌的預后判斷［4］。臨床FIGOⅢ、Ⅳ期患者血清HE4水平明顯高于早期I、II期患者，隨病程進展HE4敏感度逐步升高，Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者＞80%，研究表明其有助于卵巢癌的早期診斷和發(fā)病風險的預測［9］。相關性分析結果顯示sB7-H4和HE4水平呈正相關關系（r=0.633，P＜0.01），表明隨血清sB7-H4水平的提高，HE4水平也隨之升高，兩者協(xié)同表達上調與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展有關。

綜上所述，血清sB7-H4和HE4同卵巢癌的臨床分期和嚴重程度密切相關，可能成為卵巢癌腫瘤標志物的一個新的方向，是診斷卵巢癌的有效工具，檢測血清sB7-H4和HE4水平在卵巢癌的早期診斷、及疾病監(jiān)測方面具有良好的應用前景。

1 Choi IH1, Zhu G,et al. Genomic organization and expression analysis of B7-H4, an immune inhibitory molecule of the B7 family. J Immunol,2003,171(9):4650～4654.

2 李莉,王睿,周欣.血清CA125和HE4水平與卵巢癌病情的相關性研究.中國實驗診斷學,2013,17(5):829～832.

3 Simon I, Liu Y, Krall KL, et al. Evaluation of the novel serum markers B7-H4, Spondin 2, and DcR3 for diagnosis and early detection of ovarian cancer. Gynecol Oncol,2007, 106(1):112～118.

4 趙枰,曹興建,張秀琳,等.上皮性卵巢癌患者血清B7-H4蛋白水平的測定及其臨床意義.中華全科醫(yī)師雜志,2011,10(4):260～262.

5 Tringler B, Liu W, Corral L, et al. B7-H4 overexpression in ovarian tumors. Gynecol Oncol,2006, 100(1): 44～52.

6 楊彬,彭林.HE4-卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的標志物.醫(yī)學綜述,2011,20(17):3087～3089.

7 Anderson GL1, McIntosh M, Wu L,et al. Assessing lead time of selected ovarian cancer biomarkers: a nested case-control study.J Natl Cancer Inst,2010,102(1): 26～38.

8 谷文文,杜丹麗. HK6和B7-H4在卵巢癌診斷價值的探討.蚌埠醫(yī)學院學報,2012,37(6):684～686.

9 盧仁泉,郭林,胡娟.人附睪上皮分泌蛋白4在卵巢癌診治中的應用價值. 中華檢驗醫(yī)學雜志,2009,32(12):1379～1383.

314500 浙江省桐鄉(xiāng)市洲泉鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院檢驗科（吳建清）

314051 浙江省嘉興市婦幼保健院檢驗科（吳莉萍）