喻荷淋　吳　艷　陳　雋(遂寧市中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，四川　遂寧　629000)

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冠心病患者熱休克蛋白60濃度及其與胰島素抵抗的相關(guān)性

喻荷淋吳艷陳雋1(遂寧市中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，四川遂寧629000)

〔摘要〕目的探討冠狀動脈粥樣硬性化心臟病(CHD)患者熱休克蛋白(HSP)60濃度的變化及其與胰島素抵抗(IR)的關(guān)系。方法選擇110例行冠脈造影術(shù)的住院患者，分為對照組50例和CHD組60例，測定其血清HSP60、空腹胰島素(FINS)、空腹血糖(FBG)及血脂，計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，并分析CHD組HSP60與HOMA-IR的相關(guān)性。結(jié)果CHD組血清HSP60及FINS、HOMA-IR明顯升高，且HSP60與HOMA-IR呈正相關(guān)。結(jié)論血清HSP60濃度的升高可能是促進(jìn)動脈粥樣硬化(AS)及IR的潛在因素。監(jiān)測人群HSP60的水平對預(yù)測AS及IR有一定意義。

〔關(guān)鍵詞〕冠心病;熱休克蛋白60;胰島素抵抗

1重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院內(nèi)分泌科

第一作者:喻荷淋(1982-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事內(nèi)分泌學(xué)研究。

代謝綜合征(MS)共同的病理基礎(chǔ)是胰島素抵抗(IR)，而IR的發(fā)生主要為應(yīng)激和炎癥所致〔1〕。近年來，隨著對MS的深入研究，其組成成分逐漸擴(kuò)大，除了傳統(tǒng)的成分(高血壓、肥胖、脂代謝異常、糖尿病或糖耐量受損)外，還涉及多種疾病狀態(tài)，如多囊卵巢綜合征、高胰島素血癥、內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂和炎癥反應(yīng)等。而內(nèi)皮細(xì)胞損傷和炎癥反應(yīng)被認(rèn)為是動脈粥樣硬化(AS)的主要發(fā)病機(jī)制。冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(CHD)是AS導(dǎo)致器官病變的最常見類型。熱休克蛋白(HSP)60能誘導(dǎo)如巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞等先天免疫細(xì)胞及脂肪細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)，而且在AS、2型糖尿病及肥胖患者中測得血清HSP60濃度升高〔2〕，因此HSP60可能是促進(jìn)AS及IR的潛在因素。本文研究CHD患者HSP60濃度的變化及其與IR的關(guān)系。

1　資料與方法

1. 1一般資料選擇重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心內(nèi)科2012 年3～11月行冠脈造影的住院患者110例，男56例，女54例。在空腹?fàn)顟B(tài)下測量其身高、體重、腰圍、臀圍，計算體重指數(shù)(BMI)和腰/臀比(WHR)。采用Judkins體位投照法，心外膜下冠狀動脈的四支(左主干、左前降支、左回旋支及右冠狀動脈)至少一支管腔狹窄≥50%，納入CHD組60例，男32例，女28例，年齡(63. 4±11. 92)歲。若冠狀動脈的四支血管管腔狹窄均小于50%，納入對照組50例，男24例，女26例，年齡(60. 21±10. 19)歲。排除條件:有糖尿病、腎上腺疾病、甲狀腺功能紊亂、胰腺疾病及垂體疾病等影響糖代謝的疾病患者;肝、腎功能受損;腫瘤疾病史;既往有支架植入史;感染、急性心肌梗死等應(yīng)激情況的患者。兩組間年齡、BMI、WHR、TG、TC、LDL-C、HDL-C及FBG無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0. 05)。見表1。

1. 2標(biāo)本采集及測定所有患者夜間均禁食、禁飲8 h以上，采集次日空腹靜脈血2份，各5 ml，離心后取上層血清，一份立即檢測空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。另一份存于－70℃的冰箱，用于檢測HSP60及空腹胰島素(FINS)。HSP60測定采用酶聯(lián)免疫吸附法(奧地利TECAN公司)，試劑盒購自武漢基因美生物有限公司。血清胰島素測定采用放射免疫分析法(上海日環(huán)技術(shù)開發(fā)公司)，試劑盒購自原子高科股份有限公司?？崭寡?FBG)采用氧化酶法測定。TC、TG、HDL-C、LDL-C采用日本日立7020全自動生化分析儀測定。計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，作為IR的評價指標(biāo)。1. 3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS17. 0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，相關(guān)性采用多元線性回歸分析。

表1　兩組患者一般臨床資料比較(x ±s)

2　結(jié)果

2. 1兩組間FINs、HOMA-IR及HSP60水平比較CHD組的FINs、HOMA-IR及HSP60水平明顯高于對照組(P＜0. 01)。見表2。

2. 2相關(guān)分析對CHD組以HSP60為因變量，其余指標(biāo)為自變量，進(jìn)行多元線性回歸分析，顯示: FINS、HOMA-IR與HSP60呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r分別為0. 707，0. 640，P＜0. 01)。

表2　兩組HOMA-IR、FINS及HSP60比較(x±s)

3　討論

HSP60作為一種自身抗原，可引起機(jī)體產(chǎn)生交叉免疫反應(yīng)。同時HSP60能被免疫系統(tǒng)細(xì)胞表面TLR-4/CD14受體復(fù)合物識別，在不同的細(xì)胞中啟動不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，促進(jìn)多種炎癥因子、細(xì)胞因子的釋放。這表明HSP60在免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。據(jù)報道，HSP60水平升高與炎癥性疾病，如AS、2型糖尿病相關(guān)〔3〕。

AS的機(jī)制被認(rèn)為是一種慢性炎癥性疾病，其中還涉及自身免疫反應(yīng)〔4〕，并且內(nèi)皮細(xì)胞的損傷是促使AS形成的關(guān)鍵因素。HSP60的過度表達(dá)可能會刺激某些先天免疫和炎癥反應(yīng)的細(xì)胞增生，包括內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞(SMCS)、巨噬細(xì)胞，活化抗原提呈細(xì)胞，調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能，促進(jìn)炎癥介質(zhì)的釋放，造成血管內(nèi)皮細(xì)胞的進(jìn)一步損傷，促進(jìn)AS的發(fā)生、發(fā)展〔5〕。在本研究中，在排除傳統(tǒng)危險因素影響后，CHD組血清HSP60濃度水平明顯高于對照組，說明在CHD患者中確實(shí)存在HSP60的過度表達(dá)。過度表達(dá)的HSP60可被機(jī)體免疫系統(tǒng)的細(xì)胞表面受體識別。在人類巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，HSP60可結(jié)合到TLR4/CD14復(fù)合體，激活MyD88-NF-κB途徑〔6〕。而核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB是調(diào)節(jié)大量AS相關(guān)基因的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，一旦被激活，它能介導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生各種細(xì)胞因子、黏附分子和生長因子，影響細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡，并促使平滑肌細(xì)胞增生及移行到內(nèi)膜促進(jìn)AS發(fā)展。同時平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的激活也導(dǎo)致水解酶、細(xì)胞因子、趨化因子和生長因子的釋放，可誘發(fā)血管壁進(jìn)一步的損害及促使局部斑塊的破裂。動物實(shí)驗(yàn)表明HSP60能誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞腫瘤壞死因子(TNF)-α、NO－2的合成增加，誘導(dǎo)白細(xì)胞介系(IL)-12、IL-15等細(xì)胞因子的合成增加。進(jìn)一步研究證實(shí)，人HSP60可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)TNF-α、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9、IL-6，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生E2選擇素、細(xì)胞內(nèi)黏附分子(ICAM)-1及血管細(xì)胞黏附分子(VCAM)-1。這些促炎癥因子在促AS的形成中發(fā)揮重要作用。血循環(huán)中抗HSP60的抗體亦會引起P-選擇素的增加〔7〕，P-選擇素介導(dǎo)的白細(xì)胞、血小板能促進(jìn)炎癥反應(yīng)和血栓形成。

IR是指機(jī)體對胰島素的生理作用的反應(yīng)性或敏感性降低。發(fā)生IR的分子機(jī)制是靶細(xì)胞胰島素受體后信號傳導(dǎo)通路的缺陷及胰島素敏感性降低，而胰島素受體后的信號通路與炎癥因子的信號傳導(dǎo)存在交叉作用，所以認(rèn)為IR是一個慢性亞臨床炎癥過程〔1〕。而HSP60的過度表達(dá)可參與多種炎癥信號的傳遞途徑，因此，推測IR的發(fā)生可能與HSP60有關(guān)。Tina等〔8〕發(fā)現(xiàn)，肥胖者〔BMI(28. 1±1. 1)kg/m2〕血漿中HSP60的水平明顯增高，且其濃度與HOMA-IR呈正相關(guān)，與胰島素敏感性檢測指標(biāo)QUICKI呈負(fù)相關(guān)。表明HSP60與IR和肥胖有一定相關(guān)性。在本實(shí)驗(yàn)中，兩組的FBG無明顯異常，但CHD組患者的FINS及HOMA-IR較對照組已明顯升高，提示在AS的形成過程中也有IR的發(fā)生。而且在排除肥胖因素后，CHD組患者的血清HSP60濃度與FINS及HOMA-IR仍呈正相關(guān)，表明HSP60 與IR密切相關(guān)。HSP60引起IR的機(jī)制可能與下列因素有關(guān): ①HSP60通過與TLR4結(jié)合，激活細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)-1/2，c-Jun-氨基末端激酶(JNK)，NF-κB，使人體脂肪細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞中刺激胰島素分泌的激肽釋放酶(Akt)和糖原合成激酶3(GSK3α/β)磷酸化的信號顯著減少，抑制胰島素受體信號通路，并能抑制骨骼肌細(xì)胞中胰島素刺激的葡萄糖攝取，從而引發(fā)了IR抵抗的發(fā)生。②HSP60參與先天免疫細(xì)胞的活化，導(dǎo)致脂肪組織的巨噬細(xì)胞浸潤，巨噬細(xì)胞可促進(jìn)多種細(xì)胞因子的釋放，如TNF-α、IL-6和單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP)-1〔9〕。TNF-α是由脂肪組織表達(dá)的引起IR的最重要的細(xì)胞因子〔10〕。TNF-α活性的增強(qiáng)可促進(jìn)脂肪分解，引起血漿游離脂肪酸水平增高，抑制肌肉組織胰島素受體的絡(luò)氨酸激酶的活性，抑制胰島素受體底物(IRS)-1和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子(GLUT)-4的表達(dá)，從而導(dǎo)致IR和高胰島素血癥。以上表明，HSP60水平的增高通過影響胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的直接途徑和通過誘導(dǎo)脂肪組織炎癥介質(zhì)釋放的間接途徑，最終導(dǎo)致IR的發(fā)生。

綜上，CHD患者血清HSP60濃度的升高與IR并存，兩者在CHD的發(fā)生發(fā)展過程中均發(fā)揮重要作用，而HSP60可能是機(jī)體產(chǎn)生的誘發(fā)AS及IR形成的重要中介。隨著對HSP60與AS及IR發(fā)病機(jī)制的進(jìn)一步研究，有望使其成為預(yù)測AS及IR發(fā)生的新指標(biāo)，為AS及IR的防治開辟新的思路。

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〔2014-02-11修回〕

(編輯安冉冉/曹夢園)

通訊作者:吳艷(1974-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事內(nèi)分泌學(xué)研究。

〔文章編號〕1005-9202(2015)20-5767-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 038

〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A

〔中圖分類號〕R544. 1