劉小敏 楊美玲 易甲其 潘旭霞

Sysmex XN-9000多功能全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀體液模式性能驗(yàn)證

劉小敏①楊美玲②易甲其②潘旭霞①

目的：評(píng)價(jià)Sysmex XN-9000多功能全自動(dòng)血液體液分析儀體液模式下細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類的性能。方法：采用XN-9000分析儀，在體液模式下分別檢測(cè)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC-BF)和有核細(xì)胞計(jì)數(shù)(TC-BF)的精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率及線性范圍；使用分析儀和顯微鏡分別檢測(cè)247例體液標(biāo)本的RBC-BF、TC-BF、多個(gè)核細(xì)胞(PMN)及單個(gè)核細(xì)胞(MN)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果：XN-9000分析儀檢測(cè)高值、中值和低值體液中RBC-BF和TC-BF的CV分別為1.72%～5.13%和1.37%～3.65%；TC-BF和RBC-BF的攜帶污染率分別為0.10%和0.06%；線性范圍分別為(0～16.52)×109/L和(0～5.73)×1012/L；XN-9000分析儀和顯微鏡RBC-BF、TC-BF、PMN以及MN計(jì)數(shù)結(jié)果具有高度相關(guān)性(r=0.984，r=0.996，r=0.991，r=0.993；P＜0.01)。結(jié)論：XN-9000多功能全自動(dòng)血液體液分析儀體液模式具有較好的體液細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類功能，可應(yīng)用于臨床。

血液體液分析儀；體液分析；性能評(píng)價(jià)；顯微鏡

[First-author’s address] Clinical Laboratory, Shenzhen Longhua New District Central Hospital, Shenzhen 518110, China.

檢驗(yàn)科常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目已廣泛采用自動(dòng)化檢測(cè)，但體液標(biāo)本因其特殊性尚未能自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化。體液標(biāo)本量雖然少，但操作繁瑣，且不同檢測(cè)者結(jié)果不一，重復(fù)性差。因此，無(wú)論從人員要求、臨床診斷及實(shí)驗(yàn)室管理等方面都對(duì)體液的自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化工作提出了新要求。同時(shí)，儀器的發(fā)展也為這種需求提供了必要基礎(chǔ)。為此，本研究以國(guó)家行業(yè)管理文件“NCCLS EP15-A和CLIS H56-A”為依據(jù)分析實(shí)行體液檢測(cè)自動(dòng)化的可行性，探索標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)的要求。并對(duì)XN-9000血液體液分析儀的體液模式能快速篩選體液樣本，紅細(xì)胞和白細(xì)胞等主要參數(shù)能進(jìn)行定量報(bào)告，旨在了解該儀器的體液檢測(cè)性能狀態(tài)，對(duì)XN-9000分析儀進(jìn)行體液測(cè)定性能評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

收集2013年7月至2014年3月龍華新區(qū)中心醫(yī)院門診和住院患者的247份體液標(biāo)本，其中腦脊液96份，胸水72份，腹水63份，心包積液9份，關(guān)節(jié)腔積液7份；患者年齡為6～79歲，平均年齡為41.6歲。標(biāo)本采集后均置于EDTA-2K抗凝管內(nèi)混勻后及時(shí)送檢，并于1 h內(nèi)計(jì)數(shù)與分類完畢。

1.2 儀器與試劑

Sysmex公司XN-9000多功能血液體液分析儀、配套的原裝試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)量控制品均由希森美康公司提供；CX21顯微鏡和BX50顯微鏡購(gòu)自日本Olympus公司；德國(guó)Brand改良Neubauer計(jì)數(shù)板購(gòu)于上海正慧工貿(mào)有限公司。

1.3 驗(yàn)證方法

1.3.1 精密度

參照NCCLS/CLSI EP5-A2文件，對(duì)XN-9000檢測(cè)體液紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC-BF)和有核細(xì)胞計(jì)數(shù)(TCBF)的精密度進(jìn)行評(píng)價(jià)。在XN-9000專用體液檢測(cè)模式下對(duì)高、中和低3個(gè)水平的體液樣本連續(xù)重復(fù)測(cè)定11次，分別求出體液標(biāo)本中的RBC-BF、TC-BF、多個(gè)核細(xì)胞(PMN)和單個(gè)核細(xì)胞(MN)的變異系數(shù)(CV%)[1]。

1.3.2 攜帶污染率

參照CLSI H26-A2文件，選取高值、低值RBCBF及TC-BF的體液標(biāo)本，先連續(xù)測(cè)定高值標(biāo)本3次(H1、H2和H3)，后連續(xù)測(cè)定低值標(biāo)本3次(L1、L2和L3)。

攜帶污染率(%)＝[(L1-L3)÷(H3-L3)]×100[2]。

1.3.3 線性范圍

參照CLSI/NCCLS EP6-A文件，選取1份RBC、WBC接近預(yù)期上限的高值體液樣本(H)，分別按100%、80%、60%、40%、20%和0%的比例用鞘液進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算均值并與理論值進(jìn)行相關(guān)分析[3]。

1.3.4 準(zhǔn)確性

分別用XN-9000(X)和顯微鏡(Y)，參照《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版[4]檢測(cè)247例體液標(biāo)本中的RBC-BF、TC-BF、PMN和MN，均由經(jīng)驗(yàn)豐富的工作人員進(jìn)行檢測(cè)，各測(cè)3次取均值，求回歸方程及相關(guān)系數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，分別計(jì)算兩種檢測(cè)方法在白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類結(jié)果中的相關(guān)系數(shù)；r＞0時(shí)兩個(gè)變量呈正相關(guān)；r＜0時(shí)兩個(gè)變量呈負(fù)相關(guān)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 精密度

XN-9000測(cè)定高、中和低3個(gè)水平的體液樣本中的TC-BF和RBC-BF精密度分別為3.72%～5.13%和2.37%～3.65%，均符合儀器設(shè)定的體液白細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)的精密度≤30%和體液紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的精密度≤40%。

2.2 攜帶污染率

XN-9000在體液模式下檢測(cè)的TC-BF和RBCBF的攜帶污染率分別為0.10%和0.07%，均小于XN-9000的設(shè)定范圍(0.3%)。

2.3 線性范圍

XN-9000分析儀在體液模式下檢測(cè)體液標(biāo)本中的TC-BF和RBC-BF的線性范圍分別為(0～16.52)×109/ L和(0～5.73)×1012/L，線性范圍很寬。

2.4 相關(guān)性

XN-9000分析儀體液模式下與顯微鏡人工檢測(cè)體液中RBC-BF、TC-BF、PMN和MN計(jì)數(shù)結(jié)果具有高度相關(guān)性(r=0.984，r=0.996，r=0.991，r=0.993；P＜0.01)，其結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 XN-9000與顯微鏡檢測(cè)相關(guān)性比較(n-247)

3 討論

體液標(biāo)本的常規(guī)檢查對(duì)各種體液標(biāo)本性質(zhì)的初步判斷起到非常重要的作用。長(zhǎng)期以來(lái)，體液標(biāo)本的常規(guī)檢測(cè)依賴人工顯微鏡檢測(cè)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，不但費(fèi)時(shí)費(fèi)力而且技術(shù)誤差大，重復(fù)性差，難以進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制。

隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步及對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量要求的不斷提高，實(shí)現(xiàn)體液標(biāo)本的自動(dòng)化檢測(cè)越來(lái)越受到人們的關(guān)注[5]。近年來(lái)，有研究者將血細(xì)胞分析儀及尿沉渣自動(dòng)分析儀應(yīng)用于體液標(biāo)本的檢測(cè)[6-14]。XN-9000分析儀帶有體液檢測(cè)模式，可直接對(duì)各種體液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了體液標(biāo)本的自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化。XN-9000是采用核酸熒光染色技術(shù)和鞘流電子抗原理，采用獨(dú)立的體液模式對(duì)體液細(xì)胞進(jìn)行分析，因此擁有計(jì)數(shù)、分類及腫瘤細(xì)胞的定量提示篩查功能。

本研究對(duì)XN-9000分析儀體液模式所作的性能評(píng)價(jià)顯示，XN-9000分析儀在體液模式下檢測(cè)體液中的TC-BF和RBC-BF計(jì)數(shù)有較高的精密度(1.72%～5.13%和1.37%～3.65%)，均低于儀器設(shè)定的≤30%和≤40%及顯微鏡法CV≥20%。這主要與XN-9000分析儀采用核酸熒光染色技術(shù)和鞘流電子抗檢測(cè)原理有關(guān)，解決了顯微鏡檢測(cè)體液結(jié)果重復(fù)性差的問(wèn)題。XN-9000攜帶污染率TC-BF和RBC-BF分別為0.10和0.06，均低于儀器要求范圍(0.3%)，同時(shí)具有較寬的TC-BF和RBC-BF計(jì)數(shù)檢測(cè)線性(0～16.52)×109/L和(0～5.73)×1012/L。XN-9000分析儀和顯微鏡鏡檢法進(jìn)行TC-BF計(jì)數(shù)和分類，得到兩者TC-BF計(jì)數(shù)與分類的相關(guān)系數(shù)(r=0.984，r=0.996，r=0.991，r=0.993；P＜0.01)。表明XN-9000分析儀與顯微鏡鏡檢TC-BF和RBC-BF計(jì)數(shù)及分類結(jié)果非常接近，具有很高的準(zhǔn)確性，且檢測(cè)速度快，精密度高，適合快速體液細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類，避免了操作人員不同而導(dǎo)致結(jié)果的差異[15]。由于使用XN-9000可以達(dá)到體液檢測(cè)步驟的簡(jiǎn)化和迅速，其作業(yè)時(shí)間顯微鏡法為15～20 min，而XN-9000僅為1～2 min。因此，XN-9000體液模式檢測(cè)功能可在夜間體液急診檢測(cè)項(xiàng)目中發(fā)揮快捷性作用。

4 結(jié)語(yǔ)

XN-9000分析儀是一種性能優(yōu)良的體液分析儀，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，適合在各醫(yī)院中應(yīng)用。但因該儀器尚未實(shí)現(xiàn)對(duì)體液中特殊成分的檢測(cè)，如無(wú)法對(duì)腫瘤細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞和間皮細(xì)胞等準(zhǔn)確識(shí)別，因此在實(shí)際工作中應(yīng)將其檢測(cè)結(jié)果結(jié)合有核細(xì)胞分類散點(diǎn)圖進(jìn)行分析判斷，若發(fā)現(xiàn)散點(diǎn)圖有HF和EO標(biāo)記出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行涂片染色，觀察鑒別異常細(xì)胞，可極大提高腫瘤細(xì)胞檢出率。

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Multifunctional automatic blood cell analyzer Sysmex XN-9000 fluid model performance verification

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LIU Xiao-min, YANG Mei-ling, YI Jia-qi, et al// China Medical Equipment, 2015,12(4):44-46.

Objective: To evaluate Sysmex company latest XN-9000 multi-function automatic blood analyzer of fluid(hereinafter referred to as the XN-9000 analyzer) mode of fluid cell count and classification performance. Methods: The XN-9000 analyzer fluid mode respectively to detect the red blood cell count (RBC-BF) and nucleated cell count (TC-BF) precision and linear range, accuracy, carrying pollution; Use XN-9000 and microscope specimens of 247 cases of fluid was detected in RBC-BF, TC-BF, multiple nuclear cells (PMN) and mononuclear cells (MN), and the results are correlation analysis. Results: XN-9000 meter high, medium and low in the body fluids of TC-BF and RBC-BF CV were 1.72%～5.13% and 1.37%～5.13%; TCBF and RBC-BF carry pollution rate were 0.10% and 0.06% respectively; Linear range(0～16.52 respectively)x109/ L and(0～5.73)x1012/L; XN-9000 analyzer and microscope RBC-BF, TC-BF, PMN and MN counting results with high correlation, (r=0.984, r=0.996, r=0.991, r=0.993; P＜0.01). Conclusion: XN-9000 analyzer fluid model has better fluid cell count and classification function, can be applied to clinical.

Blood fluid analyzer; Analysis of body fluids; Performance evaluation; The microscope

1672-8270(2015)04-0044-03

R197.39

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.04.014

劉小敏,男,(1979- ),本科學(xué)歷，主管技師。深圳市龍華新區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，從事臨床檢驗(yàn)和生化工作。

2014-07-30

①深圳市龍華新區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣東 深圳 518110

②深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣東 深圳 518109