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        非小細(xì)胞肺癌中nueropilin-1的表達及臨床意義

        2015-11-26 08:03:25第二炮兵總醫(yī)院呼吸內(nèi)科中國人民解放軍6646部隊北京00088
        關(guān)鍵詞:肺癌

        白 珀,董 茜(第二炮兵總醫(yī)院呼吸內(nèi)科,中國人民解放軍6646部隊,北京 00088)

        非小細(xì)胞肺癌中nueropilin-1的表達及臨床意義

        白 珀1,董 茜2(1第二炮兵總醫(yī)院呼吸內(nèi)科,2中國人民解放軍61646部隊,北京 100088)

        目的:探討 neropilin-1(NRP-1)在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中的表達及臨床意義.方法:應(yīng)用免疫組化 SP法檢測68例NSCLC及癌旁組織中 NRP1的表達,分析其表達與NSCLC臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系.結(jié)果:NSCLC組織中 NRP-1陽性表達率明顯高于癌旁組織(P<0.05).NRP-1在NSCLC組織中的表達與腫瘤直徑、P-TNM分期及里淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05).結(jié)論:NRP-1過度表達在NSCLC發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用,可能與 NSCLC發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān).

        neropilin-1;非小細(xì)胞肺癌;免疫組織化學(xué)

        0 引言

        非小細(xì) 胞 肺癌 (non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌常見的類型,預(yù)后較差,術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移和侵襲是 NSCLC患者治療失敗和死亡的主要原因.neuropilin-1(NRP-1)是神經(jīng)纖毛蛋白中的一類,神經(jīng)軸突的生長、血管的生長發(fā)育在腫瘤轉(zhuǎn)移中起重要作用.研究發(fā)現(xiàn),NRP-1在胃癌、乳腺癌等多種腫瘤組織及癌細(xì)胞株中表達異常增高,與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[1-3],但 NRP-1在NSCLC中的表達研究少見.本研究中采用免疫組化技術(shù)觀察了組織中的表達情況,并分析其與臨床病理特征的關(guān)系.

        1 材料和方法

        1.1 材料 NSCLC組織及癌旁組織標(biāo)本來源于2012-01/2014-12我院行手術(shù)切除并經(jīng)病理證實的NSCLC患者.癌旁組織取距腫塊邊緣 5 cm以上的組織.所有患者術(shù)前均未接受放療、化療或其他治療.其中男 52例,女 16例;年齡 42.8±6.5歲(29~65歲),中位年齡52歲;低分化26例,中分化24例,高分化18例;臨床分期按1997年修訂的P-TNM分期標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ~Ⅱ期32例,Ⅲ~Ⅳ期36例;腺癌41例,鱗癌20例,大細(xì)胞癌7例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例,無淋巴轉(zhuǎn)移33例.SP免疫組織化學(xué)試劑盒購于福州邁新有限公司.二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑購自北京中杉生物技術(shù)有限公司.兔抗人NRP-1蛋白多克隆抗體購自美國 Santa Cruz公司產(chǎn)品.

        1.2 方法 所有標(biāo)本均經(jīng)過甲醛固定,石蠟包埋,4 μm厚連續(xù)切片.切片脫蠟至水后用0.01 mol/L檸檬酸緩沖液抗原修復(fù);30 mL/L H2O2室溫下孵育 10 min,PBS沖洗5 min×3次;滴加NRP-1(1∶150),4℃過夜,PBS沖洗5 min×3次,滴加生物素化二抗工作液,室溫孵育 20 min,PBS沖洗 5 min×3次;滴加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液,室溫孵育30 min,PBS沖洗5 min×3次;DAB顯色,顯微鏡下觀察,適時終止反應(yīng),自來水充分沖洗;蘇木素復(fù)染,脫水透明,中性樹脂封片.用已知的 NRP-1陽性片做陽性對照,用PBS代替一抗做陰性對照.NRP-1表達一腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性.每張切片在高倍鏡下隨機選取10個視野,按陽性細(xì)胞占同類細(xì)胞總數(shù)的百分比來計算.≤5為陰性(-),6%~25%為弱陽性(+),25%~75%為表達陽性(++),陽性細(xì)胞數(shù)> 75%為表達強陽性(+++).將陰性和弱陽性合計為陰性總數(shù),陽性和強陽性合計為陽性總數(shù).

        1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用 SPSS13.0統(tǒng)計軟件包,計數(shù)資料運用 χ2檢驗.以 P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義.

        2 結(jié)果

        2.1 NRP-1在 NSCLC和癌旁組織的表達 68例NSCLC組織中有47例NRP-1呈陽性表達(69.1%),而對應(yīng)癌旁組織中NRP-1均呈陰性表達.NSCLC組織中NRP-1陽性表達率明顯高于癌旁組織(P<0.05,表1).

        2.2 NRP-1在 NSCLC臨床病理學(xué)參數(shù)的相關(guān)性

        NRP-1在 NSCLC組織中的表達與腫瘤直徑、P-TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05),而與其他臨床病理學(xué)參數(shù)無關(guān).

        表1 NRP-1的表達與 NSCLC臨床病理學(xué)參數(shù)的相關(guān)性

        3 討論

        肺癌一直是發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一,嚴(yán)重地威脅著人類健康與生命.隨著腫瘤分子生物學(xué)的發(fā)展和化療及分子靶向藥物的開發(fā)應(yīng)用,人們對非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的發(fā)病機制有了進一步的認(rèn)識,其治療效果較前有所改善,但患者總體預(yù)后仍然較差.目前認(rèn)為肺癌發(fā)生發(fā)展是一個多個基因或多個分子水平各自發(fā)揮或相互協(xié)調(diào)作用的復(fù)雜過程,因此尋找、研究和揭示腫瘤的有價值分子標(biāo)志物或標(biāo)志物與腫瘤的關(guān)系將有助于揭示NSCLC發(fā)生與發(fā)展的分子機制,為腫瘤診斷、有效防治、預(yù)測預(yù)后及術(shù)后輔助治療提供科學(xué)依據(jù)[4-5].NRP-1是近年來發(fā)現(xiàn)的VEGF的新型受體,NRP-1在胃癌、乳腺癌、前列腺癌等多種腫瘤中均呈高表達,與腫瘤細(xì)胞生長和腫瘤血管生成密切相關(guān),可能作為許多腫瘤進展的標(biāo)志物之一[6-7].本研究結(jié)果顯示,68例NSCLC組織中NRP-1均呈高表達,而對應(yīng)癌旁組織中 NRP-1呈陰性表達,NSCLC組織中 NRP-1陽性表達率明顯高于癌旁組織(P<0.05).提示NRP-1可能參與了 NSCLC的惡變、發(fā)生過程,在其中可能扮演重要角色.同時本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),NRP-1在 NSCLC組織中的表達與腫瘤直徑、P-TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05),而與組織分化、組織學(xué)類型等臨床病理學(xué)參數(shù)無關(guān),說明NRP-1過度表達在 NSCLC發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用,可能與NSCLC發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),但在不同病理類型和不同分化程度 NSCLC的發(fā)生發(fā)展中可能具有普遍意義.但目前對 NRP-1在 NSCLC發(fā)生、侵潤和轉(zhuǎn)移過程中所發(fā)揮的具體作用機制尚不清楚.

        [1]龔 宇,胡國華,湯為學(xué),等.NRP-1對喉癌Hep-2細(xì)胞增殖侵襲及體外癌細(xì)胞促血管形成的影響[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2008,33(12):1479-1483.

        [2]張 佳,張速勤,董 頻,等.喉鱗癌組織中 NRP-1、VEGF的表達變化及意義[J].山東醫(yī)藥,2010,50(18):95-96.

        [3]Starzec A,Vassy R,Martin A,et al.Antiangiogenic and antitumor activities of peptide inhibiting th vascular endothelial growth factor binding to neuropilin-1[J].Life Sci,2006,79(25):2370-2381.

        [4]哈敏文,李建鵬,鞏克亭,等.BAG-1在非小細(xì)胞肺癌中的表達及意義[J].廣東醫(yī)學(xué),2010,31(12):1552-1554.

        [5]秦旭東,丁 偉,姚祖仁,等.B7-H4分子在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達及臨床意義[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2010,39(1):19-22.

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        Expression of nueropilin-1 in non-small cell lung cancer and its clincal significance

        BAIPo1,DONGQian21Second Artillery General Hospital PLA,2No.61646 PLA,Beijing 100088,China

        AIM:To investigate the expression of nueropilin-1 in non-small cell lung cancer(NSCLC)and its clincal significance.METHODS:The expression of nueropilin-1 protein was detected with immunohistochemical technique in 68 cases of NSCLC and normal lung tissues.RESULTS:The positive expression rates of nueropilin-1 protein in NSCLC was significantly higher than that in normal lung tissues(P<0.05).The expression of nueropilin-1 protein in NSCLC were positively related to tumor diamete,P-TNM stage and lymphnode metastasis(P<0.05).CONCLUSION:Nueropilin-1 may play an improtant role in the oncogenesis and progression of NSCLC,and itmay be relevant to invasion and metastasis of NSCLC.

        nueropilin-1;non-small cell lung;immunohistochemical technique

        R365

        A

        2095-6894(2015)03-032-02

        2015-01-10;接受日期:2015-01-28

        白 珀.碩士.研究方向:呼吸內(nèi)科.E-mail:danger_0_0_0@ sina.com

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