羅愛輝

摘要：目的：采用高效液相色譜（HPLC）法測定纈沙坦氨氯地平片的有關(guān)物質(zhì)。方法：填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相：三乙胺溶液（應(yīng)用磷酸將PH值調(diào)至2.8）-甲醇（A）-乙腈（B），流速1.0ml/min，梯度洗脫，柱溫37℃，檢測波長為239nm，進樣量15μl。結(jié)果：其降解產(chǎn)物與主峰在該色譜條件下能夠有效分離。結(jié)論：應(yīng)用高效液相色譜法可準確、簡便的測定纈沙坦氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)。

關(guān)鍵詞： 高效液相色譜；纈沙坦氨氯地平片；有關(guān)物質(zhì)

纈沙坦氨氯地平片為復方制劑，結(jié)合我國生產(chǎn)的工藝，為控制藥品檢測質(zhì)量，參考美國藥典對纈沙坦、氨氯地平有關(guān)物質(zhì)的測定方法，對纈沙坦氨氯地平片的有關(guān)物質(zhì)進行測定分析[1]。3個已知雜質(zhì)為：纈沙坦的已知雜質(zhì)（S） -N-（1-戊?；?N-[4-[2-（1H-四氮唑-5-基） 苯基]芐基]-L-纈氨酸芐酯（雜質(zhì)C）和（S） -N-（ 1-丁?；?N-[4-[2-（ 1H-四氮唑-5-基） 苯基]芐基]-L-纈氨酸（ 雜質(zhì)B）。氨氯地平的已知雜質(zhì)3-乙基-5-甲基-2-[（ 2-氨基乙氧基） 甲基]-4-（ 2-氯苯基） -6-甲基吡啶-3，5-二羧酸酯（ 雜質(zhì)D）[2]。本實驗采用高效液相色譜法測定纈沙坦氨氯地平片中的有關(guān)物質(zhì)，取得了不錯的效果，該方法可靠、準確、簡便，可用于纈沙坦氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)的測定。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀（生產(chǎn)廠家：美國安捷倫；型號：DE54627713）；電子分析天平（生產(chǎn)廠家：上海精科儀器廠；型號：BP61）；纈沙坦雜質(zhì)C（生產(chǎn)廠家：USP；批號：H1J021）；纈沙坦雜質(zhì)B（生產(chǎn)廠家：USP；批號：HOK089）；氨氯地平雜質(zhì)D（生產(chǎn)廠家：USP；批號：FOI143）；苯磺酸氨氯地平（生產(chǎn)廠家：中國藥品生物制品檢定所；批號：100374-200903）；纈沙坦（生產(chǎn)廠家：中國藥品生物制品檢定所；批號：100651-200902）；水為雙蒸水；乙腈、甲醇為色譜純；其余試劑為分析純。

1.2方法

1.2.1 色譜條件

填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相A：三乙胺10ml加H2O稀釋至1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)PH值至2.8；流動相B：甲醇；流動相C：乙腈，梯度洗脫，檢測波長為239nm；柱溫37℃[3]。見表1

1.2.2 專屬性試驗

（1）光照試驗：取樣品適量，陽光下照射10小時，流動相溶解，搖勻，稀釋定容，抽濾后測定（2）高溫試驗：取樣品適量，加入適量流動相，100℃水浴4小時后冷卻，流動相稀釋定容，搖勻，抽濾后得高溫破壞樣品溶液（3）氧化試驗：取樣品適量，加10%雙氧水10ml，60℃加熱30min后冷卻，流動相稀釋定容，搖勻，抽濾后得氧化破壞樣品溶液（4）堿破壞試驗：取樣品適量，精密稱量，加入5ml氫氧化鈉溶液（1mol/L），60℃加熱25min，加入5ml鹽酸溶液（1mol/L）中和，加流動相稀釋定容，搖勻，抽濾后得堿破壞樣品溶液（5）酸破壞樣品：取樣品適量，精密稱量，加入5ml鹽酸溶液（1mol/L），60℃加熱20min，加入5ml氫氧化鈉溶液（1mol/L）中和，加流動相稀釋定容，搖勻，抽濾后得堿破壞樣品溶液[4]。另取纈沙坦原料樣品適量，氨氯地平原料樣品適量，空白輔料樣品適量進行實驗，方法同上。

1.2.3 定量限、檢測限的測定

取纈沙坦對照品、氨氯地平對照品、纈沙坦雜質(zhì)C對照品、纈沙坦雜質(zhì)B對照品、氨氯地平雜質(zhì)D對照品適量，精密稱量，加入流動相溶解，稀釋定容，精密吸取10μl，分別注入液相色譜儀[5]。

1.2.4 線性關(guān)系的考察及校正因子的計算

取纈沙坦雜質(zhì)C對照品、纈沙坦雜質(zhì)B對照品、氨氯地平雜質(zhì)D對照品適量，流動相配液，相應(yīng)物質(zhì)的測定條件下測定，線性回歸，橫坐標：濃度，縱坐標：峰面積A，記錄峰面積，繪制標準曲線，計算線性范圍及校正因子[6]。

1.2.5 溶液精密度、穩(wěn)定性試驗

取自身對照溶液、供試品溶液、纈沙坦雜質(zhì)C對照品溶液、纈沙坦雜質(zhì)B對照品溶液及氨氯地平雜質(zhì)D對照品溶液，對有關(guān)物質(zhì)溶液精密度、穩(wěn)定性進行測定[7]。

1.2.6 樣品測定 取三批供試樣品：精密稱量80mg、5mg，流動相稀釋溶解定容至50ml，搖勻，抽濾后作為供試品溶液；吸取1ml供試品溶液，流動相稀釋溶解定容至100ml，搖勻，抽濾后作為自身對照溶液；雜質(zhì)對照品溶液，對三批溶液進行高效液相色譜儀分析，記錄色譜圖，計算總雜質(zhì)、最大單個雜質(zhì)及單個雜質(zhì)[8]。

2 結(jié)果

2.1 專屬性試驗

結(jié)果顯示，各破壞試驗下，兩個主要成分的原料、制劑的降解物峰均可良好的分離于纈沙坦、氨氯地平的主峰，且未知雜質(zhì)與已知雜質(zhì)的分離度也符合要求。

2.2 定量限、檢測限的測定

分別記錄各儀器色譜圖，使用定量限：S/N約為10時的進樣量，使用檢測限：S/N約為3時的進樣量。見表2

2.3 溶液精密度、穩(wěn)定性試驗

結(jié)果顯示，溶液在8小時內(nèi)穩(wěn)定，RSD=1.37%（n=6）；自身對照溶液、供試品溶液、纈沙坦雜質(zhì)C對照品溶液、纈沙坦雜質(zhì)C對照品溶液及氨氯地平雜質(zhì)D對照品溶液進樣精密度良好，RSD分別為0.68%，1.46%，0.89%，0.78%，0.58%（n=6）。

2.4 樣品測定

對三批樣品的測定，結(jié)果如表3所示。

3 討論

纈沙坦氨氯地平片，生產(chǎn)廠家為瑞士諾華公司，其商品名為倍博特，規(guī)格為纈沙80mg、氨氯地平5mg，在美國于2007年批準上市，在中國于2009年批準進口并上市，主要用于抗高血壓病癥[9]。纈沙坦為血管緊張素ⅡAT1受體拮抗劑、氨氯地平為鈣離子拮抗劑，二者合用作為抗高血壓藥物，具有較好的治療效果。纈沙坦氨氯地平片合用療效比單獨使用療效顯著，且耐藥性、安全性也同樣優(yōu)于單獨使用，擬開發(fā)的產(chǎn)品規(guī)格、劑型與市售品相同，具有很好的市場前景。所以，建立對于纈沙坦氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)的檢測方法來對纈沙坦氨氯地平片質(zhì)量進行控制是十分重要[10]。

本文采用高效液相色譜法檢測纈沙坦氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)，可準確的檢測出纈沙坦氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)，對產(chǎn)品的質(zhì)量加以監(jiān)督。該測定方法操作簡便、準確性高、專屬性強，值得推廣應(yīng)用。

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[10] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].2010 年版.二部.北京： 中國醫(yī)藥科技出版社，2010：1136-1137.