傅 雷 王珂萌 孫藝平 張冬梅 趙心宇 (大連醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 6044)

鹿茸有提高性功能，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，促進(jìn)骨折愈合，保護(hù)心血管功能等作用。低鈣或高鈣的條件對(duì)中老年人身體極其不利，特別是女性更年期后由于卵巢功能衰退，骨骼缺乏雌激素的保護(hù)不能拮抗甲狀旁腺激素對(duì)骨吸收作用，致使骨礦物質(zhì)迅速流失導(dǎo)致缺鈣，很容易導(dǎo)致骨質(zhì)疏松和心血管疾病。激素替代治療可延緩及阻止與絕經(jīng)相關(guān)疾病的發(fā)生〔1〕，但是又出現(xiàn)許多副作用。研究表明:在低鈣條件下，鹿茸對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力具有保護(hù)作用;但在高鈣的條件下鹿茸對(duì)離體蟾蜍心臟作用如何，以及在低鈣或高鈣的條件下鹿茸對(duì)離體蟾蜍心臟作用機(jī)制是否與β受體有關(guān)，國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)報(bào)道。本文旨在探討鹿茸對(duì)心臟的保護(hù)機(jī)制，為鹿茸合理用藥提供參考依據(jù)。

1 方法與材料

1.1 動(dòng)物及分組 中華蟾蜍90只，體重80～100 g，由大連醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。將蟾蜍隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組又分為正常任氏液組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組和藥品對(duì)照組;正常任氏液組為蟾蜍離體心臟標(biāo)本只灌流正常任氏液，描記正常離體蟾蜍心肌收縮力曲線;陽(yáng)性對(duì)照組為蟾蜍離體心臟標(biāo)本在灌流正常任氏液后改灌流的高鈣任氏液，描記心肌收縮力增強(qiáng)曲線;陰性對(duì)照組為蟾蜍離體心臟標(biāo)本在灌流正常任氏液后改灌流低鈣任氏液，描記心肌收縮力減弱曲線;藥品對(duì)照組為蟾蜍離體心臟標(biāo)本在灌流正常任氏液后改灌流鹿茸(2 g/L)和異丙腎上腺素(I50，10 mg/L)溶液，觀察藥物本身作用。實(shí)驗(yàn)組分為異丙腎上腺素低鈣組和異丙腎上腺素高鈣組，低鈣組或高鈣組又分為鹿茸前及后加鹿茸兩組，每組10只。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器 鹿茸凍干粉由美國(guó)德州大學(xué)圣安東尼奧健康中心霍玉書(shū)教授提供，以純凈蒸餾水稀釋。Iso(上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)110401)，任氏液、低鈣任氏液和高鈣任氏液按照文獻(xiàn)〔2〕配制。BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)和FT-100張力換能器由成都泰盟公司生產(chǎn)。

1.2.2 給藥方法 以任氏液+低鈣任氏液+鹿茸+Iso組為例，離體蟾蜍心臟灌流任氏液，穩(wěn)定后將心室內(nèi)任氏液吸出后的改灌流低鈣任氏液，在該基礎(chǔ)上加入鹿茸稀釋液后再灌流Iso溶液，每次換液穩(wěn)定后觀察40 min。其余組給藥方法與上述基本相同，每次加 20 μl藥之前先吸出 20 μl灌洗液，記錄心搏曲線。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS19.0軟件行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 鹿茸在低鈣和高鈣的條件下對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力的保護(hù)作用 在低鈣狀態(tài)下心室外鹿茸濃度為2 g/L時(shí)，心肌收縮力明顯增強(qiáng)(P＜0.05，見(jiàn)表1);在高鈣狀態(tài)下心室外鹿茸濃度為2 g/L時(shí)，心肌收縮力明顯降低(P＜0.01，見(jiàn)表2)，即在低鈣狀態(tài)下和高鈣狀態(tài)下心室外鹿茸濃度為2 g/L時(shí)，鹿茸對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力具有雙向調(diào)節(jié)保護(hù)作用。

2.2 Iso在低鈣狀態(tài)下對(duì)鹿茸離體蟾蜍心肌收縮力保護(hù)作用的影響 在低鈣狀態(tài)下，灌流液Iso濃度為10 mg/L時(shí)，心肌收縮力明顯增強(qiáng)(P＜0.001);之后加鹿茸，心肌收縮力在相對(duì)較強(qiáng)的狀態(tài)下明顯抑制(P＜0.001);而在低鈣狀態(tài)下先加鹿茸(P＜0.05)再加 Iso，心肌收縮力明顯興奮后再被興奮(P＜0.001)。即在低鈣狀態(tài)下，無(wú)論是在灌流鹿茸凍干粉溶液前或是后只要灌流鹿茸凍干粉溶液，心肌收縮力均明顯興奮，而在離體蟾蜍心肌收縮力下降或上升狀態(tài)下，只要灌流鹿茸凍干粉溶液，心肌收縮力就會(huì)保護(hù)性增強(qiáng)或降低，見(jiàn)表1。

表1 在低鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力保護(hù)作用的影響(±s，g，n=10)

表1 在低鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力保護(hù)作用的影響(±s，g，n=10)

后一列數(shù)據(jù)與前一列數(shù)據(jù)比較:1)P＜0.05;2)P＜0.001;下表同

組別 開(kāi)始狀態(tài) 第1次換灌流液穩(wěn)定后第2次換灌流液穩(wěn)定后正常任氏液組2.90±0.11 2.95±0.07 －任氏液+低鈣組 2.93±0.10 1.71±0.09 －低鈣+鹿茸組 1.71±0.09 3.07±0.811) －低鈣+Iso組 1.71±0.09 5.18±0.172) －低鈣+Iso+鹿茸組 1.71±0.09 5.18±0.172) 1.66±0.142)低鈣+鹿茸+Iso組 1.71±0.09 3.07±0.811) 3.53±0.401)

2.3 Iso在高鈣狀態(tài)下對(duì)鹿茸離體蟾蜍心肌收縮力保護(hù)作用的影響 在高鈣狀態(tài)下，灌流液Iso濃度為10 mg/L時(shí)，心肌收縮力明顯增強(qiáng)(P＜0.01)，之后加鹿茸，心肌收縮力在相對(duì)較強(qiáng)的狀態(tài)下加入鹿茸后心肌收縮力明顯抑制(P＜0.001);而在高鈣狀態(tài)下先加鹿茸再加Iso，心肌收縮力是在先加鹿茸心肌收縮力被抑制后再被明顯被增加(P＜0.001)，見(jiàn)表2。

表2 在高鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力保護(hù)作用的影響(±s，g，n=10)

表2 在高鈣狀態(tài)下Iso和鹿茸對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力保護(hù)作用的影響(±s，g，n=10)

組別 開(kāi)始狀態(tài) 第1次換灌流液穩(wěn)定后第2次換灌流液穩(wěn)定后正常任氏液組2.94±0.05 2.92±0.03 －任氏液+高鈣組 2.95±0.04 5.95±0.05 －高鈣+鹿茸組 5.95±0.05 2.90±0.031) －高鈣+Iso組 5.95±0.05 10.70±0.471) －高鈣+Iso+鹿茸組 5.95±0.05 10.70±0.471) 2.91±0.122)高鈣+鹿茸+Iso組 5.95±0.05 2.90±0.031) 10.91±1.072)

3 討論

鹿茸化學(xué)成分比較復(fù)雜，有機(jī)成分為雌二醇、雌酮、表皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子等〔3〕，無(wú)機(jī)成分為人體必需常量元素Ca、Na、K、P和11種微量元素。馬英淇等〔4〕研究發(fā)現(xiàn):在低鈣條件下，鹿茸提取液對(duì)離體蟾蜍心臟活動(dòng)的興奮作用比在正常任氏液的條件下更容易出現(xiàn)，即在低鈣條件下對(duì)心肌具有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在低鈣條件下，鹿茸凍干粉溶液對(duì)離體蟾蜍心臟的作用與馬英淇等〔4〕發(fā)現(xiàn)基本相同，鹿茸在高鈣條件下，即在心肌收縮力明顯增強(qiáng)的條件下被抑制，是心肌在高鈣條件下的一種保護(hù)作用，這是一種雙向保護(hù)性調(diào)節(jié)〔5〕。一定濃度的睪酮可以維持血管的一定張力，改善心臟傳導(dǎo)或擴(kuò)張冠脈;改善心肌缺血、減少心肌細(xì)胞凋亡及纖維化，保護(hù)心臟〔6〕。人類(lèi)若長(zhǎng)期處在低鈣或高鈣情況下對(duì)心臟非常不利，臨床上有低鈣和高鈣條件下誘發(fā)患者死亡的報(bào)道。

Iso是β受體激動(dòng)劑，β受體分為β1和β2受體，興奮β1腎上腺素受體，增快心率、增強(qiáng)心肌收縮力，增加心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)的傳導(dǎo)速度，縮短竇房結(jié)的不應(yīng)期，還可擴(kuò)張外周血管，減輕心負(fù)荷，以糾正低排血量和血管?chē)?yán)重收縮的休克狀態(tài)。興奮支氣管上β2腎上腺素受體，使支氣管平滑肌松弛，抑制組胺等介質(zhì)的釋放。實(shí)際上β1受體主要分布于心臟，可增加心肌收縮性、自律性和傳導(dǎo)功能。無(wú)論在高鈣或低鈣狀態(tài)下，只要加入Iso離體蟾蜍心肌收縮力就增強(qiáng)，之后加入鹿茸心肌收縮力得以恢復(fù)性保護(hù);然后再加Iso，心肌收縮力再次被興奮，推測(cè)鹿茸的心肌保護(hù)作用與β受體興奮有關(guān)。鹿茸對(duì)心肌收縮影響的具體作用機(jī)制涉及更微觀的領(lǐng)域，仍待進(jìn)一步研究。

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