張巖 符春鋒

細胞分裂是高中生物教學中的重難點內(nèi)容，很多學生對于有絲分裂和減數(shù)分裂的圖像辨別不清，在教學實踐中筆者嘗試利用簡易實驗來解決這一問題。

染色體是遺傳物質(zhì)DNA的主要載體，深入研究染色體對于生物的變異、遺傳和進化具有十分重要的意義。蛙類的細胞和染色體都較大，染色體數(shù)目較少，是良好的實驗材料。蛙類染色體的顯示有石蠟切片法和壓片法等。下面介紹一種最簡易的壓片法。

1 取材

取一只成年雄蛙，擊悶、剖腹，取出卵圓形的睪丸。及時剪去連在睪丸前端的脂肪體，再將睪丸放入培養(yǎng)皿內(nèi)。向培養(yǎng)皿倒入質(zhì)量分數(shù)為0.7%的檸檬酸鈉溶液浸沒，并將睪丸旋轉(zhuǎn)滾動，洗去附在表面的血液和脂肪。

睪丸是產(chǎn)生精子的器官，睪丸外面兩層極薄的膜緊緊貼在一起。睪丸內(nèi)有許多曲細精管，管內(nèi)有各個時期發(fā)育的細胞。最外層細胞為精原細胞，進行有絲分裂；內(nèi)層為精母細胞，進行減數(shù)分裂，形成精細胞和精子。

2 前處理

把睪丸移入另一個培養(yǎng)皿里，用針將膜刺破，用小號鑷子將膜剝開，再倒入10 mL質(zhì)量分數(shù)為0.7%的檸檬酸鈉溶液。

質(zhì)量分數(shù)為0.7%的檸檬酸鈉溶液是低滲溶液。睪丸浸入這種低滲溶液里，水分很快通過細胞膜滲入細胞內(nèi)，使細胞膨脹，導致分裂細胞中的染色體更加均勻地分散開來。

3 固定

經(jīng)過10～15 min處理，在低滲溶液中加入4 mL冰醋酸。2 min后，再加2 mL冰醋酸。冰醋酸是固定液，能殺死細胞，并使細胞結(jié)構(gòu)不變形。

4 解離

剪少量曲細精管組織塊，移入1 N鹽酸中，加熱至60 ℃，解離30 min。解離的目的是使組織細胞分離。

5 漂洗

用鑷子將組織塊放在盛有清水的玻璃皿中漂洗10 min。漂洗的目的是洗去解離液，便于染色。

6 染色和壓片

選一條曲細精管，放在干凈載玻片中央，加紫藥水一滴，蓋上蓋玻片。以左手手指壓住蓋片，使蓋玻片不移動，再用橡皮在蓋玻片上輕輕敲幾下，使細胞漸漸分散開。注意所加壓力要適當：過輕染色體不易分散開；過重，易使染色體散于周圍細胞之間，難以獲得完整圖像。

7 觀察

在顯微鏡下觀察制成的裝片，可以看到曲細精管內(nèi)各期發(fā)育的細胞：最外層為精原細胞，呈立方形或不規(guī)則；靠近管腔為精母細胞，呈圓球形，比精原細胞大。選擇精原細胞有絲分裂中期、后期；精母細胞減數(shù)分裂第一次分裂和減數(shù)第二次分裂的前、中、后期，這些分裂期的染色體粗短、清晰，容易計算。青蛙（黑斑蛙）體細胞染色體數(shù)目為26（2n），精細胞染色體數(shù)目為13（n）；中華大蟾蜍體細胞染色體數(shù)目為22（2n），精細胞染色體數(shù)目為11（n）。

教師通過簡易實驗，激發(fā)學生的學習興趣，提高學生的動手能力，有助于對細胞分裂知識的理解和掌握。