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        貴州地產(chǎn)山銀花重金屬分布、富集特性研究

        2015-08-20 12:08:26柳小蘭張清海林紹霞何騰兵林昌虎高安勤
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年7期
        關(guān)鍵詞:富集分布特征相關(guān)性

        柳小蘭 張清海 林紹霞 何騰兵 林昌虎 高安勤

        摘要:以銅(Cu)、鉻(Cr)、砷(As) 、鉛(Pb) 、鎘(Cd) 、汞(Hg)6種重金屬為指標(biāo),采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法對(duì)山銀花重金屬含量進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)不同富集部位重金屬含量進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明,山銀花各部位重金屬含量分布規(guī)律各不相同,莖、葉、花中重金屬含量順序分別為Cr>Cu>Pb>Cd>As>Hg、Cr>Pb>Cu>Cd>As>Hg、Cu>Cr>Cd >Pb>As>Hg;重金屬在山銀花植株不同部位的平均含量順序?yàn)椋篜b:葉>莖>花,Cr:莖>葉>花,As:葉>花>莖,Cu:花>莖>葉,Cd和Hg均為:花>葉>莖;莖與葉中的Cd、莖中的Pb與葉中的As、莖中的Cu與花中的Hg、葉中的Hg與花中的Pb、葉中的Cd與花中的Hg均達(dá)到顯著水平,莖與葉中的Pb、莖中的Cu與葉中的Hg、莖中Cr與花中的Hg、葉中的Hg與花中的As均達(dá)到極顯著水平;山銀花的莖、葉、花對(duì)土壤中重金屬元素的富集能力各不相同,對(duì)Cd的富集能力最強(qiáng),是一種對(duì)Cd具超富集能力的植物。

        關(guān)鍵詞:山銀花;重金屬;分布特征;相關(guān)性;富集

        中圖分類號(hào): X53 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):1002-1302(2015)07-0340-04

        中藥材中重金屬成分直接影響其使用的安全性[1],銅(Cu)、鋅(Zn)、砷(As) 、鉛(Pb) 、鎘(Cd)、鉻(Cr)、汞(Hg)等重金屬元素是中藥材中經(jīng)常被檢測(cè)的元素[2-3]。有研究表明,這些重金屬元素被人體吸收后,逐漸富集在人的體內(nèi)很難排除[4-6]。目前,對(duì)中藥材中重金屬超標(biāo)的問(wèn)題尚缺乏專門、較為系統(tǒng)的研究,尤其對(duì)植株中各部位重金屬元素的分布情況研究鮮有涉及[7-10]。2010年版《中國(guó)藥典(一部)》[11]將忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花單列為金銀花,將忍冬科植物灰氈毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)、紅腺忍冬(Lonicera hypoglauca Miq.)、華南忍冬(Lonicera confusa DC.)和黃褐毛忍冬(Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng)的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花列為山銀花[12]。本試驗(yàn)山銀花為忍冬科植物,主要是灰氈毛忍冬的花蕾或初開(kāi)的花[13],為中醫(yī)大宗用藥,是國(guó)家重點(diǎn)治理的名貴中藥材之一,具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱之功效,主治癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱等癥[14]。山銀花不僅作為藥材用于醫(yī)療,花卉用于綠化觀賞,而且在食品、飼料、香精、化妝品領(lǐng)域具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值[15]。但是,由于山銀花易受重金屬污染,在很大程度上阻礙了山銀花的GAP生產(chǎn),并直接影響到患者的安全[16]。楊春等在對(duì)黔東南州9種藥材重金屬污染評(píng)價(jià)中指出,金銀花未受到Hg和As 的污染,但受到Cd 的中度污染[17];王錦芳等對(duì)金銀花藥材中重金屬鉛、鎘含量進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),金銀花藥材中的鉛、鎘含量雖沒(méi)有超標(biāo),但均有檢出,重金屬對(duì)中藥材的污染相當(dāng)普遍[18]。參考我國(guó)頒布的《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)重金屬的限量,本試驗(yàn)確定As、Hg、Pb、Cu、Cd、Cr 6種重金屬為研究指標(biāo),以貴州省丹寨地產(chǎn)藥材山銀花種植基地為試驗(yàn)區(qū)域,研究重金屬在黔產(chǎn)山銀花莖、葉、花中的含量及富集特性,以期為山銀花優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的無(wú)公害栽培和山銀花種植業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 藥品與試劑

        硝酸(GR級(jí)),德國(guó)Merck公司生產(chǎn);重金屬標(biāo)準(zhǔn)溶液Agilent part #5183-4688,為Cu、Pb、As、Cd、Cr、Hg(單標(biāo)),濃度梯度均為1、2、5、10、20 ng/mL;內(nèi)標(biāo)液Agilent part #5188-6525,以10%硝酸為介質(zhì)的100 mg/L Li、Sc、Ge、Lu、Bi、Rn、In、Tb;調(diào)諧液Agilent part #5184-3566,以2%硝酸為介質(zhì)的100 mg/L Li、Ge、Y、Co、Ti。超純水,電阻率>18.25 MΩ·cm。

        1.2 儀器設(shè)備

        AL204-IC電子天平,瑞士梅特勒-托利多公司生產(chǎn);Agilent 7500 a 型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS),美國(guó)安捷倫科技公司生產(chǎn);Milli-Q Synthesis超純水系統(tǒng),美國(guó)MILLIPORE公司生產(chǎn)。

        1.3 樣品采集及處理

        1.3.1 樣品采集 2013年6月,根據(jù)黔東南州丹寨縣興仁鎮(zhèn)告左萬(wàn)村山銀花基地樣區(qū)地形地貌特點(diǎn),采用GPS定位,采樣點(diǎn)呈“S”形分布,均勻選取具有代表性的山銀花植株;均勻采集有代表性的山銀花莖、葉、花樣品,分別裝袋標(biāo)記,同時(shí),對(duì)應(yīng)山銀花植株下方距樹(shù)干0.2~0.5 m,利用木制工具采集深度為0~30 cm的土壤樣品l kg左右,裝入潔凈聚乙烯塑料袋封裝,寫上編號(hào),做好采樣記錄。每個(gè)樣點(diǎn)采集樣本4份,共采集44個(gè)樣本。

        1.3.2 樣品的制備 采回的莖、葉、花以90 ℃高溫殺青 30 min,再以60 ℃恒溫烘干至恒質(zhì)量;玻璃研缽磨碎,過(guò)0.25 mm尼龍篩;將過(guò)篩樣品充分混勻,儲(chǔ)存于塑料袋中備用。將采集的土壤樣品剔除植物根、葉、石塊等異物,置于通風(fēng)處自然風(fēng)干,研磨,分別過(guò)0.25、2 mm 篩,儲(chǔ)存于塑料袋中備用。

        1.4 樣品消化

        土壤樣品采用美國(guó)國(guó)家環(huán)保局標(biāo)準(zhǔn)方法(USEPA-3050B)消解,定容;植株樣品分別加入5 mL硝酸、2mL雙氧水,置于170 ℃恒溫干燥箱中加熱3 h,冷卻、定容。以國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)土壤樣品(GSS-2、GSS-5)及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)植株樣品(GSV-2)進(jìn)行質(zhì)量分析控制,設(shè)定樣品重復(fù)數(shù)10%~15%,每批樣品設(shè)2個(gè)空白。

        1.5 樣品測(cè)定

        采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進(jìn)行測(cè)定,相關(guān)操作及條件參數(shù)為:載氣流速1.17 L/min,無(wú)輔助氣流;采樣深度 8.0 L/min,蠕動(dòng)泵采樣轉(zhuǎn)速0.1 r/s,積分時(shí)間2 s;重復(fù)3次。

        1.6 數(shù)據(jù)處理

        用Excel、DPS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)算各指標(biāo)數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)及誤差等。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 山銀花不同部位重金屬含量分布

        由表1可知,山銀花植株中Pb、Cr、As、Cd、Cu、Hg含量變化范圍分別在0.00~17.44、0.70~105.77、0.00~0.74、0.73~3.10、3.76~10.01、0.00~1.59 mg/kg之間。山銀花植株不同部位的重金屬分布規(guī)律各不相同,莖中重金屬含量順序?yàn)镃r>Cu>Pb>Cd>As>Hg,其平均含量分別為2549、608、5.47、1.29、0.11、0.001 mg/kg;葉中重金屬含量順序?yàn)镃r>Pb>Cu>Cd>As>Hg,其平均含量分別為1276、7.46、5.03、1.71、0.19、0.13 mg/kg;花中重金屬含量順序?yàn)镃u>Cr>Cd >Pb>As>Hg,其平均含量分別為686、5.19、1.87、039、0.16、0.15 mg/kg; 重金屬在山銀花植株不同部位的平均含量順序?yàn)椋篜b:葉>莖>花;Cr:莖>葉>花;As:葉>花>莖;Cu:花>莖>葉;Cd和Hg均為:花>葉>莖。從變異系數(shù)來(lái)看,山銀花植株中各重金屬含量的變異程度為Hg>Cr>Pb>As>Cd>Cu;莖、葉、花中重金屬變異系數(shù)分別在3397%~331.66%、25.48%~245.21%、1502%~282.70%之間,其中,莖和葉中重金屬變異程度均為Hg>Cr>Pb>As,花中Hg的變異系數(shù)最大,為282.70 %,Pb次之,Cu最小,變異系數(shù)為15.02%,這說(shuō)明山銀花莖和葉中的Hg和Cr及花中的Hg和Pb分布不均勻,可能與植物不同部位對(duì)重金屬的吸附特性有關(guān)。

        根據(jù)《藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》(WM/T 2—2004)對(duì)Cd、Hg、As、Pb、Cu 5種重金屬含量限值的規(guī)定:Cd≤0.3 mg/kg、Hg≤0.2 mg/kg、As≤2.0 mg/kg、Pb≤5.0 mg/kg、Cu≤20.0 mg/kg判斷,山銀花植株花中的Pb含量未超標(biāo),莖和葉中均超過(guò)限定值;莖、葉和花中的As、Cu和Hg含量均未超標(biāo),而Cd都已超標(biāo),這可能與山銀花對(duì)土壤中Cd有較強(qiáng)的吸附能力有關(guān)。

        2.2 山銀花不同部位間重金屬含量的相關(guān)性分析

        由表2、表3和表4可知,山銀花莖中的Hg與葉和花中的6種重金屬均無(wú)線性關(guān)系,莖與葉中的Cd、莖中的Pb與葉中的As均達(dá)到顯著水平,莖與葉中的Pb、莖中的Cu與葉中的Hg均達(dá)到極顯著水平;花中的Hg與莖中的Cu 、Cr分別達(dá)到顯著、極顯著水平;葉中的Hg與花中的Pb、As分別達(dá)到顯著、極顯著水平,葉中的Cd與花中的Hg達(dá)到顯著水平;除此之外,其他元素間呈不同程度的相關(guān)性,這說(shuō)明山銀花在生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)不同重金屬的吸收、遷移及富集等有較大的差異性。山銀花莖、葉、花對(duì)6種重金屬元素有相似的吸附強(qiáng)度,并表現(xiàn)出一定程度的協(xié)同和拮抗作用,其中,莖中的Cr與花中的Hg、葉中的Hg與花中的As協(xié)同作用最強(qiáng),其次為莖與葉中的Pb;拮抗作用最強(qiáng)的是莖中的Cr與葉中的Pb和花中的Cd,莖中的Cu與葉中的Pb次之。

        植物對(duì)某種有毒元素的吸收超過(guò)閾值時(shí),會(huì)導(dǎo)致其體內(nèi)承擔(dān)主動(dòng)運(yùn)輸作用的載體蛋白失活或抑制線粒體產(chǎn)生ATP,并向外分泌螯合劑,導(dǎo)致植物根系對(duì)其他重金屬的吸收減少[19];植物自身的解毒機(jī)制會(huì)將吸收到的一部分有毒元素通過(guò)有機(jī)酸或氨基酸螯合封存在液泡內(nèi)[20-21],另一部分有毒元素則轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞,減少毒害,而大多數(shù)超富集植物將重金屬局限于根部以防止損害光合器官,并通過(guò)增強(qiáng)某些生理作用達(dá)到此目的[22-23]。筆者認(rèn)為,山銀花可能存在某種源-庫(kù)調(diào)節(jié)機(jī)制,如果花或葉中有毒元素含量達(dá)到閾值,則抑制另一種有毒元素向庫(kù)運(yùn)輸,減少毒害,花和葉同時(shí)承擔(dān)礦質(zhì)元素庫(kù)的作用;葉也是光合作用有機(jī)產(chǎn)物的源,減少源的有毒元素積累,利于正常養(yǎng)分和有機(jī)物的積累,符合生物趨利避害的自然規(guī)律。

        2.3 山銀花不同部位對(duì)重金屬的富集特征

        植物吸收的元素主要來(lái)自土壤,富集系數(shù)(BCF)[24]的大小表明植物對(duì)某種元素富集能力的強(qiáng)弱,富集系數(shù)越高,表明植物對(duì)該元素的吸收能力越強(qiáng),富集系數(shù)大于1是重金屬超富集植物的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)之一[25-26]。由表5可知,山銀花莖、葉、花對(duì)土壤中重金屬元素Cd的富集能力最強(qiáng),富集系數(shù)分別為7.266、10.602、14.772,其次為Cu,莖和花對(duì)Cu的富集系數(shù)分別為1.037、1.634,花對(duì)Hg的富集系數(shù)為1.251,富集系數(shù)均大于1;除Pb和As外,葉和花對(duì)重金屬的吸附能力均表現(xiàn)為:Cd>Cu>Hg>Cr;莖對(duì)重金屬的吸附能力表現(xiàn)為:Cd>Cu>Cr>Pb>As>Hg。Cd在山銀花體中的累積效應(yīng)非常強(qiáng),山銀花是Cd的超富集植物,這與劉周莉等的研究結(jié)果[27]一致,值得進(jìn)一步關(guān)注。

        3 結(jié)論

        (1)山銀花植株不同部位的中重金屬含量分布規(guī)律各不相同。莖、葉、花中的重金屬含量順序分別為Cr>Cu>Pb>Cd>As>Hg、Cr>Pb>Cu>Cd>As>Hg、Cu>Cr>Cd>Pb>As>Hg;重金屬在山銀花植株不同部位的平均含量順序?yàn)椋篜b:葉>莖>花,Cr:莖>葉>花,As:葉>花>莖,Cu:花>莖>葉,Cd和Hg均為:花>葉>莖。

        (2)按照《藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》得出,山銀花花中的Pb未超標(biāo),莖和葉均超過(guò)限定值5.0 mg/kg;莖、葉和花中的As、Cu和Hg均未超標(biāo),而Cd已超標(biāo),這可能與山銀花對(duì)土壤中的Cd有較強(qiáng)的吸附有關(guān)。

        (3)山銀花不同部位的重金屬含量變異程度不同。山銀花植株中各重金屬含量的變異程度為Hg>Cr>Pb>As>Cd>Cu;花中Hg的變異系數(shù)最大,Pb次之,Cu最小,變異系數(shù)分別為282.70 %、187.25 %、15.02%。這說(shuō)明山銀花莖

        (4)山銀花莖中的Hg與葉和花中的6種重金屬均無(wú)線性關(guān)系,莖與葉中的Cd達(dá)到顯著水平、Pb達(dá)到極顯著水平,莖中的Pb與葉中的As達(dá)到顯著水平,莖中的Cu與葉中的Hg達(dá)到極顯著水平;花中的Hg與莖中的Cu 、Cr分別達(dá)到顯著、極顯著水平;葉中的Hg與花中的Pb、As分別達(dá)到顯著、極顯著水平,葉中的Cd與花中的Hg達(dá)到顯著水平,其余元素呈不同程度的相關(guān)性。山銀花莖、葉、花對(duì)具有顯著性相關(guān)的重金屬元素存在相似的吸附強(qiáng)度。

        (5)山銀花莖、葉、花對(duì)土壤中重金屬元素的富集能力不同。除Pb和As外,葉和花對(duì)重金屬的吸附能力均表現(xiàn)為:Cd>Cu>Hg>Cr;莖對(duì)重金屬的吸附能力表現(xiàn)為:Cd>Cu>Cr>Pb>As>Hg;莖、葉、花對(duì)土壤中重金屬元素Cd的富集能力最強(qiáng),富集系數(shù)分別為7.266、10.602、14.772,Cd在山銀花體中的累積效應(yīng)非常強(qiáng),是Cd的超富集植物。

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