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        pH示差法測(cè)定茄子皮中花青苷條件的優(yōu)化

        2015-08-20 12:08:26張艷俠徐超張立華
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年7期
        關(guān)鍵詞:定量分析

        張艷俠 徐超 張立華

        摘要:為探討pH示差法測(cè)定茄子皮中花青苷的含量,用酸性乙醇溶液從茄子皮中提取花青苷,確定提取液的最大吸收波長、pH值的變化及平衡時(shí)間,還做了精密度試驗(yàn)、回收試驗(yàn)。結(jié)果表明,茄子皮提取液的最大吸收波長為530 nm,pH值選定為1.0、4.5,反應(yīng)平衡時(shí)間為90 min,測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.2%(n=6),加標(biāo)回收率為9642%。該方法能有效消除溶液中雜質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響,可用于茄子皮中花青苷的定量分析。

        關(guān)鍵詞:茄子皮;花青苷;pH示差法;定量分析

        中圖分類號(hào):TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):1002-1302(2015)07-0338-02

        花青素是具有2-苯基苯并吡喃陽離子結(jié)構(gòu)的衍生物,是廣泛存在于植物中的水溶性天然色素。自然條件下游離狀態(tài)的花青素極少見,其A環(huán)3-、5-、7-碳位上的羥基以糖苷鍵與一些單糖結(jié)合形成花青苷,因結(jié)合糖基的種類、數(shù)量、結(jié)合位置不同,花青苷的種類有所不同[1]?;ㄇ嘬站哂锌寡趸⑾杂苫?、降低血清膽固醇、抗變異、抗腫瘤、促進(jìn)視網(wǎng)膜上視紅素再合成等生理功能,因而花青苷被作為功能性食品添加劑,具有果香味、水溶性好、安全性高等優(yōu)點(diǎn),已被消費(fèi)者普遍接受[2]。茄子(Solanum melongena L.)果皮多紫紅色,含有豐富的花青苷,且穩(wěn)定性好。我國茄子種植面積大,其皮為副產(chǎn)物,因此茄子皮色素是一種極具開發(fā)前景的天然食用色素[3],但目前對(duì)于其含量的測(cè)定缺少統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

        花青苷的定量分析方法通常有:單一pH法、差減法、高效液相色譜法、pH示差法。其中單一pH法測(cè)定花青苷時(shí)準(zhǔn)確度相對(duì)較低,當(dāng)僅以含量作為指標(biāo)的對(duì)比依據(jù)時(shí),可選用單一pH法,操作簡便;差減法在測(cè)定花青苷含量的過程中,由于干擾組分的吸光度受提取試劑的影響,從而使得理論測(cè)定總花青苷的濃度準(zhǔn)確度降低[4];高效液相色譜技術(shù)雖已廣泛應(yīng)用于菠蘿、柑橘、桃、杏等果實(shí)中的糖、酸組分和含量的測(cè)定,并具備高效、高靈敏度、分析速度快、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn),且方法精密度高、重復(fù)性好,但在測(cè)定花青苷單體含量時(shí),要對(duì)樣品花青苷進(jìn)行分離純化,并需要花青苷單體標(biāo)準(zhǔn)品,而花青苷標(biāo)準(zhǔn)品的不穩(wěn)定,或是不明確樣品中的花青苷單體組成,使該方法的使用受到限制[5]。有人研究pH示差法測(cè)定葡萄[6]、桑椹[7]中花青苷含量,結(jié)果表明該法的準(zhǔn)確度較高、重現(xiàn)性好,而且操作方法簡便、設(shè)備儀器較低廉、便于推廣。本試驗(yàn)進(jìn)行pH示差法測(cè)定茄子皮中花青苷含量的方法學(xué)研究,以期為茄子皮乃至其他植物材料中花青苷的定量分析提供技術(shù)參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        試驗(yàn)材料為在棗莊當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)購買的新鮮成熟的茄子,品種為臺(tái)灣紅茄,用打皮刀削取茄子皮備用。

        試驗(yàn)試劑:無水乙醇(天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司);濃鹽酸、氫氧化鉀(山東省萊陽市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠);乙酸鈉(天津市福晨化學(xué)試劑廠)等。以上試劑均為分析純。

        1.2 儀器與設(shè)備

        主要儀器有:UV-2000型紫外-可見分光光度計(jì)(尤尼科儀器有限公司)、電子分析天平(上海越平科學(xué)儀器有限公司)、pHS-2F型酸度計(jì)(上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司)、RE52CS-1型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)、KS-300EI型超聲波清洗機(jī)(寧波海曙科生超聲設(shè)備有限公司)。

        1.3 技術(shù)路線

        準(zhǔn)備植物材料→花青苷的提取→最大吸收波長的測(cè)定→pH值的確定→反應(yīng)平衡時(shí)間的確定→精密度試驗(yàn)→回收試驗(yàn)。

        1.4 茄子皮中花青苷的浸提

        準(zhǔn)確稱量5 g茄子皮,按照1 g ∶10 mL的料液比加入酸性乙醇溶液,在50 ℃下浸提30 min;將過濾的濾液重復(fù)浸提3~4次;合并濾液并定容至250 mL。

        1.5 測(cè)定花青苷的最大吸收波長

        用酸性乙醇溶液將茄子皮浸提液稀釋至適當(dāng)濃度,在400~600 nm可見波長范圍內(nèi)用紫外-可見分光光度計(jì)進(jìn)行光譜掃描,繪制吸收光譜曲線,并找出峰值。

        1.6 pH值的選定

        以溶液pH值為變量構(gòu)建梯度試驗(yàn),在已測(cè)得的最大吸收波長下測(cè)量茄子皮浸提液的吸光度。繪制pH值-吸光度(D)曲線,選擇最適pH值,要求在選定的2個(gè)pH值左右變動(dòng)時(shí)吸光度變化不大。

        1.7 平衡時(shí)間

        在選定的2個(gè)最適pH值條件下,每隔20 min測(cè)量1次樣品的吸光度,觀察溶液吸光度隨時(shí)間的變化,確定溶液的反應(yīng)平衡時(shí)間。

        1.8 精密度試驗(yàn)

        將浸提液靜置至反應(yīng)平衡后,在已測(cè)得的最適pH值及最大吸收波長下,測(cè)量花青苷的吸光度,平行測(cè)定6次。按照Fuleki等的經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算茄子皮中的花青苷含量[8]:

        X=ΔDVFM×1 000/(εm)。

        式中:X為茄子皮中的花青苷含量,mg/g;ΔD為pH值為1.0、4.5時(shí)吸光度的差值;V為稀釋體積,L;F為稀釋倍數(shù);M為矢車菊素-3-葡萄糖苷的相對(duì)分子質(zhì)量;ε為矢車菊素-3-葡萄糖苷的摩爾消光系數(shù);m為樣品質(zhì)量,g。

        1.9 回收試驗(yàn)

        采用加入回收法,在試樣中加入已知量的被測(cè)組分與等量的另1份相同的平行試樣進(jìn)行分析,求得加入的被測(cè)組分的回收率,根據(jù)回收率檢查系統(tǒng)誤差的大小。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 最大吸收波長

        取一定量的茄子皮浸提液,用酸性乙醇溶液稀釋,在400~600 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行可見光掃描,并繪制吸收光譜圖曲線。由圖1可知,在400~600 nm可見光譜范圍內(nèi),浸提液中花青苷的吸光度變化表現(xiàn)為先增加后減小,即只存在唯一的峰值,可以看出,茄子皮中花青苷的最大吸收波長為530 nm。

        2.2 pH值確定

        為保證pH示差法有較高的的準(zhǔn)確性和靈敏度,在選擇pH值時(shí)應(yīng)考慮以下3點(diǎn):(1)所選擇的2個(gè)pH值處所測(cè)得的花青苷吸光度差異應(yīng)當(dāng)是顯著的;(2)單一pH值的變動(dòng),對(duì)花青苷的吸光度影響應(yīng)是極小的;(3)花青苷在所處的2個(gè)最適pH值條件下,其結(jié)構(gòu)應(yīng)是相當(dāng)穩(wěn)定的。由于花青苷只在酸性介質(zhì)中可以保持穩(wěn)定,因而試驗(yàn)中只測(cè)定酸性介質(zhì)中不同pH值條件下花青苷浸提液最大吸收波長處的吸光度變化,并以pH值為橫坐標(biāo)、吸光度D530 nm為縱坐標(biāo)作圖,詳見圖2。從圖2可以得知,在pH值為0.8~ 1.5、4.0~ 5.0這2個(gè)區(qū)域內(nèi),pH值的輕微變動(dòng)對(duì)吸光度的變化影響較小,并且在這2個(gè)pH值范圍內(nèi),花青苷在酸性介質(zhì)中具有相當(dāng)?shù)姆€(wěn)定性,滿足試驗(yàn)要求。綜上所述,選擇的2個(gè)pH值分別為10、4.5。

        2.3 反應(yīng)平衡時(shí)間

        花青苷在溶液介質(zhì)中存在4種結(jié)構(gòu)形式,這4種結(jié)構(gòu)形式在某一pH值下處于動(dòng)態(tài)平衡,當(dāng)pH值改變時(shí),動(dòng)態(tài)平衡發(fā)生轉(zhuǎn)移,總的趨勢(shì)是pH值降低時(shí),平衡向紅色的2-苯基苯并吡喃陽離子移動(dòng);pH值升高時(shí),平衡向藍(lán)色醌式移動(dòng),并隨時(shí)間的變化達(dá)到一個(gè)新的平衡。因此提取液用緩沖液稀釋后,必須靜置一段時(shí)間,等動(dòng)態(tài)平衡處于穩(wěn)定后,才能測(cè)定吸光度。試驗(yàn)中量取等量的浸提液,分別調(diào)其pH值至1.0、45,每隔20 min測(cè)量其吸光度,觀察溶液吸光度隨時(shí)間的變化,確定溶液平衡的時(shí)間,茄子皮花青苷在不同pH值溶液中的吸光度隨時(shí)間的變化見表1。

        由表1可知,在不同的緩沖溶液中隨時(shí)間的變化,花青苷的吸光度不同。隨時(shí)間的延長,在pH值為1.0的緩沖溶液中花青苷的吸光度基本穩(wěn)定;在pH值為4.5的緩沖溶液中花青苷的吸光度隨時(shí)間的延長而升高,90 min時(shí)處于穩(wěn)定狀態(tài)。因此,選擇花青苷在緩沖液中的平衡時(shí)間為90 min。

        2.4 精密度試驗(yàn)

        按照“1.4”節(jié)的提取方法制得茄子皮花青苷浸提液 500 mL,從500 mL提取液中準(zhǔn)確量取2份各25 mL的溶液,分別調(diào)節(jié)pH值至1.0、4.5,在波長530 nm處測(cè)定吸光度D530 nm,平行測(cè)定6次。按照相關(guān)公式計(jì)算樣品中花青苷含量,結(jié)果(表2)可知,茄子皮中花青苷平均含量為0120 mg/g,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.20%。

        2.5 回收試驗(yàn)

        從上述茄子皮花青苷浸提液中準(zhǔn)確量取2份100 mL溶液,分別標(biāo)記為1、2,在50 ℃條件下真空干燥。將材料1溶解于100 mL 1.2 mol/L HCl-70%乙醇溶液中,用本研究的方法測(cè)定酸性乙醇中花青苷的含量,即為加標(biāo)量。將材料2再溶解于100 mL浸提液中, 采用相同方法測(cè)定浸提液中加標(biāo)后花青苷的含量。將材料2試驗(yàn)所測(cè)得的含量減去浸提液中原有花青苷含量,即為加標(biāo)樣的實(shí)際測(cè)得量。由測(cè)定結(jié)果、回收率(表3),可以看出,平均回收率為96.42%,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.49%。

        3 結(jié)論

        本試驗(yàn)結(jié)果表明,茄子皮中花青苷的最大吸收波長為530 nm,與文獻(xiàn)報(bào)道的花青苷最大吸收波長在520~540 nm之間的數(shù)據(jù)相符。而反應(yīng)平衡時(shí)間由于受到溫度、濕度、提取時(shí)間等因素的影響,會(huì)有較大的差別;根據(jù)相關(guān)研究可以看出,反應(yīng)平衡時(shí)間選擇在90~110 min對(duì)試驗(yàn)不會(huì)有影響。通過精密度試驗(yàn)結(jié)果得出,茄子皮中花青苷的含量為 0.120 mg/g,而根據(jù)加入回收法測(cè)得的平均回收率為9642%,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.49%,可知溶液中其他因素對(duì)花青苷含量測(cè)定的影響極小,可以忽略不計(jì)。總之,采用pH示差法對(duì)茄子皮中花青苷的含量進(jìn)行定量分析,能有效地消除溶液中其他有機(jī)雜質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響,可信度較高,為今后的茄子皮及其他植物果實(shí)中花青苷定量分析提供了一定的理論依據(jù)。

        參考文獻(xiàn):

        [1]李興國,于澤源. 花青苷的研究進(jìn)展[J]. 北方園藝,2003(4):6-8.

        [2]李傳欣,張 華,李景琳. 食用天然色素的應(yīng)用及發(fā)展趨勢(shì)[J]. 遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué),2001(1):29-32.

        [3]申愛民. 我國茄子生產(chǎn)概況及發(fā)展趨勢(shì)[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2007(21):64,67.

        [4]霍琳琳,蘇 平,呂英華. 分光光度法測(cè)定桑葚總花色苷含量的研究[J]. 釀酒,2005,32(4):88-89.

        [5]孫婧超,劉玉田,趙玉平,等. pH示差法測(cè)定藍(lán)莓酒中花色苷條件的優(yōu)化[J]. 中國釀造,2011(11):171-174.

        [6]劉洪海,張曉麗,杜 平,等. pH示差法測(cè)定煙73葡萄中花青素含量[J]. 中國調(diào)味品,2009,34(4):110-111,117.

        [7]楊兆艷. pH示差法測(cè)定桑椹紅色素中花青素含量的研究[J]. 食品科技,2007,32(4):201-203.

        [8]Fuleki T,F(xiàn)rancis F J. Quantitative methods for anthocyanins:1. Extraction and determination of total anthocyanins in cranberries[J]. Journal of Food Science,1968,33(1):72-77.

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