史冠宇

摘要：目的對(duì)于人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)的檢測(cè)，分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法，并對(duì)兩種方法的檢測(cè)效果進(jìn)行比較。方法研究對(duì)象為來(lái)自國(guó)家臨檢中心乙肝表面抗體質(zhì)控品2份，來(lái)自中國(guó)生物制品檢定所提供的線性參比品的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品3份。分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法對(duì)其血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)兩種方法的檢測(cè)效果進(jìn)行比較。結(jié)果對(duì)于中國(guó)生物制品檢定所提供的3份參比品、國(guó)家臨檢中心2份質(zhì)控品乙肝表面抗體效價(jià)的檢測(cè)，分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)效果無(wú)明顯差異，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，樣本濃度值相關(guān)性良好，相關(guān)系數(shù)r均大于0.95;對(duì)于1-400號(hào)高抗血漿、401-800號(hào)低抗血漿、801-1000號(hào)普通血漿乙肝表面抗體效價(jià)的檢測(cè)，分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)效果無(wú)明顯差異，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，樣本濃度值相關(guān)性良好，相關(guān)系數(shù)r均大于0.95。結(jié)論對(duì)于人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)的檢測(cè)，采用酶聯(lián)免疫法不但檢驗(yàn)成本低、操作簡(jiǎn)單快捷，而且特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高，對(duì)血液制品行業(yè)乙免原料血漿乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)的篩查具有重要的意義，非常值得推廣和應(yīng)用。關(guān)鍵詞：酶聯(lián)免疫法;放射免疫法;乙肝表面抗體效價(jià)

酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法，簡(jiǎn)稱(chēng)酶聯(lián)免疫法，或者ELISA法。它的中心就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合，然后通過(guò)顯色來(lái)檢測(cè)。放射免疫法是利用同位素標(biāo)記的與未標(biāo)記的抗原，同抗體發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)的方法，研究機(jī)體對(duì)抗原物質(zhì)反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)化規(guī)律。本文分析了采用酶聯(lián)免疫法和放射免疫法對(duì)人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)進(jìn)行檢測(cè)的效果。以下是我的報(bào)道：1材料與方法1.1樣品材料研究對(duì)象為來(lái)自國(guó)家臨檢中心乙肝表面抗體質(zhì)控品2份，來(lái)自中國(guó)生物制品檢定所提供的線性參比品的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品3份。?1.2儀器和試劑盒抗-HBs免疫球蛋白國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)示濃度值為2.5lU/支（批號(hào)20041001）。北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司表面抗體酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)試劑盒（批號(hào)R20110503），線性范圍和正常參考范圍分別為10-300mlU/ml，0-10mlU/ml。放免r測(cè)量?jī)x（上海原子核研究所四環(huán)儀器廠生產(chǎn)），放射免疫法試劑盒（北京北方生物技術(shù)研究所提供），表面抗體放射免疫定量檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：110620），線性范圍和正常參考范圍分別為0-1000mlU/ml、0-10mlU/ml。?1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法選取SPSS13.0軟件，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用t檢驗(yàn)。差異明顯具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。2結(jié)果對(duì)于中國(guó)生物制品檢定所提供的3份參比品、國(guó)家臨檢中心2份質(zhì)控品乙肝表面抗體效價(jià)的檢測(cè)，分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)效果無(wú)明顯差異，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，樣本濃度值相關(guān)性良好，相關(guān)系數(shù)r均大于0.95;對(duì)于1-400號(hào)高抗血漿、401-800號(hào)低抗血漿、801-1000號(hào)普通血漿乙肝表面抗體效價(jià)的檢測(cè)，分別采用放射免疫法、酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)效果無(wú)明顯差異，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，樣本濃度值相關(guān)性良好，相關(guān)系數(shù)r均大于0.95。3討論采用放射免疫法對(duì)人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)進(jìn)行檢測(cè)，不但費(fèi)時(shí)、復(fù)雜，而且一次無(wú)法進(jìn)行大量樣品檢測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法，簡(jiǎn)稱(chēng)酶聯(lián)免疫法，或者ELISA法。本文研究了酶聯(lián)免疫法對(duì)乙型肝炎病毒表面抗體效價(jià)的檢測(cè)，其基本原理是使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性;使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi)，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來(lái)進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體②酶標(biāo)記的抗原或抗體③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。采用酶聯(lián)免疫法不但檢驗(yàn)成本低、操作簡(jiǎn)單快捷，而且特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高。參考文獻(xiàn)[1]許麗楓，張效林.酶聯(lián)免疫法和膠體金法對(duì)乙肝病毒表面抗原檢測(cè)的對(duì)比分析[J].疑難病雜志，2010，04：257.?[2]胡曉.乳膠層析法與酶聯(lián)免疫法測(cè)定乙肝病毒標(biāo)志物的相關(guān)性分析[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，05：92-93.?[3]劉秀琴，傅杭州，張曉俐.化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法與酶聯(lián)免疫法測(cè)定乙肝表面抗原的比較[J].海南醫(yī)學(xué)，2010，08：104-105.?[4]孔慶飛，班立芳，王勇鳴.酶聯(lián)免疫法和發(fā)光免疫法測(cè)定乙肝病毒標(biāo)志物比較[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2010，09：65-67.