肖樂(lè)宇 馬振芳 王新梅 李建偉

【摘 要】 目的 觀察ACP 215血細(xì)胞處理機(jī)制備的洗滌紅細(xì)胞和傳統(tǒng)手工法制備的洗滌紅細(xì)胞的質(zhì)量差異。方法 將40袋懸浮紅細(xì)胞隨機(jī)分為2組：機(jī)洗組和手工組，每組各20袋，2U/袋，分別對(duì)兩種方法制備的洗滌紅細(xì)胞的紅細(xì)胞回收率、白細(xì)胞清除率及血漿蛋白清除率進(jìn)行比較。結(jié)果 使用ACP 215血細(xì)胞處理機(jī)制備的洗滌紅細(xì)胞，其紅細(xì)胞回收率及血漿蛋白清除率明顯優(yōu)于傳統(tǒng)手工法制備的洗滌紅細(xì)胞，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而白細(xì)胞清除率差別不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 ACP 215血細(xì)胞處理機(jī)洗滌制備的紅細(xì)胞質(zhì)量好，臨床使用安全可靠，值得推廣和應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 洗滌紅細(xì)胞；ACP215血細(xì)胞處理機(jī)；手工法；制備

【中圖分類號(hào)】 R446.11+3 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A

洗滌紅細(xì)胞是將保存期內(nèi)的濃縮紅細(xì)胞、懸浮紅細(xì)胞、少白細(xì)胞紅細(xì)胞或全血在無(wú)菌條件下用生理鹽水反復(fù)洗滌后制備而成的，其特點(diǎn)是去除了80%以上的白細(xì)胞、98%以上的血漿蛋白，保留了70%以上的紅細(xì)胞。使用該制品可以減少或避免血漿蛋白所致的過(guò)敏反應(yīng)，降低FNHTR的發(fā)生，也適用于IgA缺乏及肝腎功能不全的患者輸用。目前國(guó)內(nèi)制備洗滌紅細(xì)胞的方法有全自動(dòng)血細(xì)胞處理機(jī)洗滌制備和傳統(tǒng)手工法洗滌制備，為進(jìn)一步觀察兩種方法制備的洗滌紅細(xì)胞質(zhì)量的差異，我們于2014年3月將使用全自動(dòng)血細(xì)胞處理機(jī)制備的洗滌紅細(xì)胞和手工法制備的洗滌紅細(xì)胞進(jìn)行比較，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 ACP215血細(xì)胞處理機(jī)及一次性使用附件（美國(guó)血液技術(shù)公司），TSCD-Ⅱ無(wú)菌接管機(jī)（日本泰爾茂公司），CR-7型大容量冷凍離心機(jī)（日本工機(jī)株式會(huì)），全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（日本希森美康公司），Nageotte細(xì)胞計(jì)數(shù)板（HORSHAM公司）；0.9%生理鹽水四聯(lián)袋（上海輸血技術(shù)公司），雙縮脲劑（自配）。

1.2 材料制備 抽取本站于2014年3月采集制備的保存期均在35天內(nèi)的懸浮紅細(xì)胞40袋，2U/袋（每200ml全血制備的紅細(xì)胞為1個(gè)U），隨機(jī)分為2組：機(jī)洗組和手工組，每組各20袋。機(jī)洗組使用ACP215血細(xì)胞處理機(jī)制備，首先用無(wú)菌接管機(jī)將懸浮紅細(xì)胞與血細(xì)胞處理機(jī)一次性使用附件相連接，安裝好管路，按照設(shè)定的程序進(jìn)行洗滌，具體操作過(guò)程參照ACP215血細(xì)胞處理機(jī)CELL WASH操作手冊(cè)；手工組采用手工方法制備，首先將懸浮紅細(xì)胞與0.9%生理鹽水四聯(lián)袋用無(wú)菌接管機(jī)進(jìn)行連接，將四聯(lián)袋中首袋生理鹽水加入懸浮紅細(xì)胞中，邊加邊混勻，加完后稱重配平，在溫度4℃、離心速度3400r/min、時(shí)間8min的條件下離心，離心后用分漿夾將上清液及白膜層擠入空袋中棄去。再將第二袋生理鹽水加入紅細(xì)胞中，同以上步驟，如此依次洗滌紅細(xì)胞3次，最后將剩下的一袋生理鹽水酌量加入紅細(xì)胞中，使最終洗滌紅細(xì)胞的體積在250ml±10%.具體操作過(guò)程參照《血站技術(shù)操作規(guī)程》[1]。紅細(xì)胞洗滌前后分別留樣備檢。

1.3 檢測(cè)方法 紅細(xì)胞的數(shù)量采用全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)；殘余白細(xì)胞的數(shù)量采用Nageotte計(jì)數(shù)板檢測(cè)；血漿蛋白含量采用雙縮脲法檢測(cè)。試劑配制及檢測(cè)過(guò)程均嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的要求操作[2]。紅細(xì)胞回收率（%）=（洗滌后紅細(xì)胞計(jì)數(shù)/洗滌前紅細(xì)胞計(jì)數(shù)）×100%，白細(xì)胞清除率（%）=（1-洗滌后白細(xì)胞計(jì)數(shù)/洗滌前白細(xì)胞計(jì)數(shù)）×100%，血漿蛋白清除率（%）=（1-洗滌后上清蛋白含量/洗滌前上清蛋白含量）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，應(yīng)用配對(duì)樣本的t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

機(jī)洗組和手工組制備的洗滌紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè)，其結(jié)果見(jiàn)表1。

3 討論

臨床輸血并不是絕對(duì)安全的，它有可能引發(fā)多種輸血不良反應(yīng)以及輸血傳播病毒的危險(xiǎn)，不同的血液成分引發(fā)的輸血不良反應(yīng)發(fā)生率是不一樣的[3]，其中白細(xì)胞和血漿帶來(lái)的危險(xiǎn)度最高，紅細(xì)胞和血小板則相對(duì)比較安全，而洗滌紅細(xì)胞由于去除了血液中絕大部分血漿和白細(xì)胞以及一些電解質(zhì)、枸櫞酸鹽和微聚物等物質(zhì)，從而明顯降低了輸血不良反應(yīng)的發(fā)生及傳播輸血相關(guān)疾病的風(fēng)險(xiǎn)，臨床使用更安全可靠。目前國(guó)內(nèi)制備洗滌紅細(xì)胞的方法有全自動(dòng)血細(xì)胞處理機(jī)洗滌法和傳統(tǒng)手工洗滌法，傳統(tǒng)手工洗滌法制備的時(shí)間較長(zhǎng)，操作繁瑣，易受工作人員技術(shù)水平及離心機(jī)轉(zhuǎn)速、溫度等影響，造成制品質(zhì)量的不穩(wěn)定性，但由于比較經(jīng)濟(jì)，因而國(guó)內(nèi)多數(shù)血站仍采用手工法。而全自動(dòng)血細(xì)胞處理機(jī)的應(yīng)用使得洗滌紅細(xì)胞的制備過(guò)程程序化、標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化，操作方便，節(jié)約人力，節(jié)省時(shí)間，保證了制品的質(zhì)量，但成本較高，國(guó)內(nèi)應(yīng)用較少。

血漿蛋白清除率是洗滌紅細(xì)胞質(zhì)量監(jiān)控的一項(xiàng)重要指標(biāo)。在原料血中蛋白的含量越高，則血漿蛋白清除率就越高[4]。在手工法洗滌制備中，我們發(fā)現(xiàn)隨著血漿蛋白清除率的增加，紅細(xì)胞回收率卻會(huì)出現(xiàn)下降的情況，二者具有無(wú)法調(diào)和的矛盾，而全自動(dòng)血細(xì)胞處理機(jī)解決了這一難題，它不僅提高了血漿蛋白清除率，同時(shí)也增加了紅細(xì)胞的回收率。從本次試驗(yàn)中可以看出，兩種方法制備的洗滌紅細(xì)胞均可以達(dá)到國(guó)家規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，全自動(dòng)血細(xì)胞處理機(jī)制備的洗滌紅細(xì)胞的紅細(xì)胞回收率及血漿蛋白清除率明顯優(yōu)于手工法制備的，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），這與國(guó)內(nèi)相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道基本相符[5，6]。另有學(xué)者認(rèn)為，最好不要使用保存期末的懸浮紅細(xì)胞做原料血[7]，如果制備洗滌紅細(xì)胞采用去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞做原料血?jiǎng)t效果會(huì)更好，紅細(xì)胞回收率可以提高5%-6%，而白細(xì)胞殘留量可以降低1000倍[8]。

總之，使用全自動(dòng)血細(xì)胞處理機(jī)洗滌制備紅細(xì)胞更科學(xué)合理，制備的產(chǎn)品更安全可靠，完全可以替代手工法為臨床提供高質(zhì)量的血液制品，值得在血站大力推廣應(yīng)用。

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