蔣連保 廖運(yùn)學(xué) 黃小都 謝峰云 李立軍 龍新山

【摘 要】 目的 探討阿奇霉素對立克次體性心肌炎患者血清HMGB1、IFN-γ水平變化的影響，闡述其臨床意義。方法 選用阿奇霉素治療立克次體性心肌炎患者，實(shí)驗(yàn)分組：A組（對照組）：0.9%氯化鈉250 ml 靜滴，B組：每日口服阿奇霉素分散片0.5，C組：每日靜滴阿奇霉素注射液0.5；治療后第1、3、5、7天用ELISA測定血清HMGB1、IFN-γ水平，并進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果 A組患者血清HMGB1、IFN-γ水平變化不明顯，C組較B組逐漸減弱（p<0.05），兩者呈正相關(guān)（r=0.91，P<0.01）。結(jié)論 阿奇霉素可降低立克次體性心肌炎患者血清HMGB1、IFN-γ水平，其結(jié)果為臨床治療立克次體性心肌炎患者提供了理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 阿奇霉素；立克次體性心肌炎；HMGB1；IFN-γ

【中圖分類號】 R978.1+5 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A

立克次氏體病是由感染立克次氏體引起，主要有恙蟲病、流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、立克次氏痘等，是一種人畜共患性急性發(fā)熱性疾病[1]。這類疾病存在于世界各地，在熱帶和亞熱帶一些國家，尤其是第三世界國家比較常見，國內(nèi)長江以南發(fā)病率較高。易導(dǎo)致器官功能障礙，如并發(fā)心肌炎、肺炎、腦膜腦炎、腎功能衰竭等，死亡率較高[2]。國內(nèi)外對立克次氏體病及其并發(fā)癥的報道較多，但從細(xì)胞因子角度研究其臨床及發(fā)病機(jī)制的報道較少。本實(shí)驗(yàn)用阿奇霉素治療立克次體性心肌炎患者，觀察其療效，并檢測血清HMGB1、IFN-γ水平變化，探討其發(fā)病機(jī)制，為臨床治療提供新依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院 2012年6月—2014 年9月符合立克次體性心肌炎診斷標(biāo)準(zhǔn)的住院患者且年齡在18歲以上的120例進(jìn)行臨床研究，其中男性80例，女性40例。

1.2 方法

1.2.1 患者行實(shí)驗(yàn)室檢查（如血象、血清學(xué)及病原學(xué)檢查），結(jié)合流行病學(xué)資料確定診斷[2]。根據(jù)同條件診斷結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。

1.2.2 患者從入院第一日始靜滴0.9%氯化鈉250ml和口服或靜滴阿奇霉素0.5g（每日一次）。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分三組：A組（對照組）：0.9%氯化鈉250ml 靜滴；B組：口服阿奇霉素分散片0.5g；C組：0.9%氯化鈉250ml加阿奇霉素注射液0.5g靜滴。

1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定患者血清HMGB1、IFN-γ水平：于治療后的第1、3、5、7天次日清晨采用抗凝管空腹抽取四組患者外周靜脈血4ml，靜置1.5小時，待上層血清析出，立即以2000轉(zhuǎn)/分鐘速度離心10分鐘，將血漿與血細(xì)胞快速分離，取上層血漿，裝入編號EP管中，置入-80℃冰箱凍存。采用ELISA法檢測患者血清HMGB1、IFN-γ水平。試劑盒購于德國IBL公司，操作按試劑盒說明書嚴(yán)格進(jìn)行，采用美國Bio Rad 550全自動酶標(biāo)儀在波長于450nm處讀取吸光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，光密度（ optical density，OD）值作為縱坐標(biāo)，通過標(biāo)本的 OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上得到標(biāo)本HMGB1 、IL-6濃度，并進(jìn)行相關(guān)分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，計數(shù)資料比較采用率表示，組間兩兩比較采用q檢驗(yàn)及t檢驗(yàn)，P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 立克次體性心肌炎病因統(tǒng)計 對120例患者資料進(jìn)行統(tǒng)計與分析，其中姜蟲病85例，占疾病案例總數(shù)70.8%；流行性斑疹傷寒15例，占疾病案例總數(shù)12.5%；地方性斑疹傷寒20例，占16%；其中男性80例，占66.7%，女性40例，占33.3%。

2.2 ELISA測定血清HMGB1、IFN-γ水平變化 ELISA檢測結(jié)果顯示，A、B、C三組患者血清HMGB1、IL-6濃度B組較A組弱（P<0.05），C組比B組弱（P<0.05）、D組弱于C組（P<0.05）；且于治療后1、3、5、7天抽血測定的結(jié)果有顯著差異（P<0.05）。（見表1）

2.3 將以上患者治療后第7天血清HMGB1、IFN-γ水平進(jìn)行相關(guān)性分析： 結(jié)果呈顯著正相關(guān)（r=0.91，P<0.01）。

3 討論

立克次氏體是由美國病理學(xué)家H.T.立克次首先描述，故名。立克次氏體病以鼠類為儲存宿主，由某些節(jié)肢動物如虱、蚤、蜱或螨為媒介傳給人類。表現(xiàn)有高熱、頭痛、精神癥狀（如譫妄、狂躁、昏迷等）、皮疹（Q熱無皮疹）和肝、脾腫大等，有的有皮膚潰瘍及焦痂。診斷主要依據(jù)典型臨床表現(xiàn)。確診可作立克次氏體分離及血清學(xué)檢查[3]。其病原體在自然界主要存在于嚙齒動物（家鼠、田鼠、溝鼠等）和家畜（犬、牛、羊）體內(nèi)。傳染源主要是病人和鼠類。感染后病情進(jìn)展快，易并發(fā)心肌炎、肺炎等并發(fā)癥。阿奇霉素或四環(huán)素族抗生素治療有特效。

HMGB1 是一個具有顯著促炎效應(yīng)的細(xì)胞因子。研究發(fā)現(xiàn)， HMGB1可通過作用一些炎癥介質(zhì)來干預(yù)IFN-γ、IL-6 、VEGF等的調(diào)節(jié)；另有報道，HMGB1還可引起炎癥的級聯(lián)放大效應(yīng)，形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)體系[34]，表現(xiàn)為一種正反饋效應(yīng)[4]。IFN-γ也是一種強(qiáng)有力的致炎癥因子，可以刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)粘附子，并上調(diào)其它致炎癥細(xì)胞因子如IL-1等表達(dá)[4]。立克次氏體侵入人體后，常在小血管內(nèi)皮細(xì)胞及單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中繁殖，引起細(xì)胞腫脹、壞死以及造成血管炎等。立克次氏體亦可在實(shí)質(zhì)器官中（如肝、脾、腎、腦、心等）的血管內(nèi)皮細(xì)胞中繁殖，導(dǎo)致細(xì)胞代謝障礙、壞死及間質(zhì)性炎癥，引致相應(yīng)癥狀[5]。

阿奇霉素是一類時間依賴性大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物，對立克次體、衣原體、支原體等有抗菌作用，具有較長的PAE及半衰期（14.9-76.8小時）。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在立克次體性心肌炎患者中，可以檢測到HMGB1、IFN-γ因子，說明HMGB1、IFN-γ參與其發(fā)病過程；立克次體性心肌炎可能誘導(dǎo)HMGB1、IFN-γ的分泌，加重立克次體性心肌炎全身炎癥的病情進(jìn)展。研究證明，HMGB1、IFN-γ也可作為判斷立克次體性心肌炎患者免疫功能狀態(tài)的指標(biāo)之一。抑制或減少HMGB1、IFN-γ的分泌可作為立克次體性心肌炎的預(yù)防和治療措施之一。

另外，實(shí)驗(yàn)過程中分別檢測A、B、C三組HMGB1、IFN-γ水平，發(fā)現(xiàn)HMGB1、IFN-γ濃度逐漸減弱，說明靜滴阿奇霉素較口服使用可以更有效抑制其炎癥反應(yīng)，同時為使用阿奇霉素治療立克次體性心肌炎提供了新證據(jù)，其理論依據(jù)為臨床治療立克次體性炎性并發(fā)癥提供了新思路。

參考文獻(xiàn)

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