白艷紅

抑癌基因LKB1和ARID1A在胃癌中的表達(dá)及預(yù)后關(guān)系的研究

白艷紅

抑癌基因；胃癌

胃癌是人類第二大致命性因素, 也是我國(guó)發(fā)病率最高的消化道腫瘤, 其發(fā)生演變過(guò)程受多種因子的調(diào)控［1］。有研究提示, 胃癌的發(fā)生與發(fā)展可能有其獨(dú)特的分子生物學(xué)背景［2］, 而其中兩種名為ARID1A和LKB1的基因在胃癌組織中的突變率可高達(dá)70%～80%。本文對(duì)60例胃組織黏膜標(biāo)本, 通過(guò)組織芯片技術(shù)和免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)基因LKB1和ARID1A進(jìn)行檢測(cè), 以探討二者在胃癌組織中表達(dá)的意義?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 從菏澤市榮軍醫(yī)院病理科選取2013年間手術(shù)切除的胃癌組織標(biāo)本共32例, 全部經(jīng)石蠟包埋處理, 其中男20例, 女12例, 平均年齡49.8歲, 全部是按國(guó)家胃癌協(xié)會(huì)合作組織標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核的病理組織切片, 其中5例是高分化腺癌, 9例是中分化腺癌.14例是低分化腺癌, 其余4例是胃黏液腺腺癌。同時(shí)作為對(duì)照的是10例正常胃組織標(biāo)本和18例炎癥胃組織。

1.2 制作組織芯片 ①制作空心蠟塊：空心蠟塊全部是利用空心模具一次性制作成型的。②目標(biāo)組織定位：通過(guò)對(duì)樣本蠟塊的病理切片進(jìn)行HE染色, 在光鏡下觀察其形態(tài)學(xué)變化。 ③蠟塊取樣：利用組織芯片取樣機(jī)在已標(biāo)記好的目標(biāo)蠟塊相應(yīng)部位鉆取目標(biāo)蠟塊組織。④目標(biāo)組織蠟塊制作：將已溶石蠟一次性放入到空心蠟塊中, 冷凝后即制作成了目標(biāo)芯片蠟塊。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) 高倍視野下對(duì)各個(gè)組織標(biāo)本均選擇3～4個(gè)有代表性的區(qū)域, 查找癌細(xì)胞數(shù), 最后取其平均值, 癌細(xì)胞數(shù)在5%以下者為陰性(-), 6%～30%之間者為一般陽(yáng)性(+).31%～60%之間者為中等陽(yáng)性(++), 60%以上的為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 在不同胃黏膜組織中LKB1和ARID1A的表達(dá) 正常胃黏膜LKB1的表達(dá)陽(yáng)性率為90.00%(9/10), 顯著高于胃癌組織56.25%(18/32)和胃炎組織33.33%(6/18)(P＜0.05)；而正常胃黏膜和胃炎組織中ARID1A的表達(dá)陽(yáng)性率分別為80.00%(8/10)和83.33%(15/18), 均顯著高于胃癌組織的12.50%(4/32) (P＜0.05)。

2.2 胃癌組織LKB1和ARID1A與淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系 LKB1在無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者中表達(dá)陽(yáng)性率為20.00%(8/12), 而伴淋巴轉(zhuǎn)移者陽(yáng)性表達(dá)率為66.67%(10/20), 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；胃癌伴淋巴轉(zhuǎn)移者ARID1A 陽(yáng)性表達(dá)率33.33%(4/12)與無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者0比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.3 胃癌病理組織分型及其浸潤(rùn)深度與LKB1和ARID1A表達(dá)的關(guān)系 LKB1和ARID1A在胃癌中的表達(dá)與其浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)(P＜0.05), 而與其病理組織分型無(wú)顯著相關(guān)性(P＞0.05)。見表1, 表2。

表1 LKB1和ARID1A與胃壁浸潤(rùn)深度的關(guān)系［n(%)］

表2 LKB1和ARID1A與組織病理分型的關(guān)系［n(%)］

3 討論

本研究通過(guò)對(duì)60例胃黏膜標(biāo)本組織芯片的LKB1和ARID1A表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè), 其表達(dá)情況與大多數(shù)研究結(jié)果較一致。

LKB1對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用的主要發(fā)生在細(xì)胞周期的G1 期, 抑制細(xì)胞增殖, 促進(jìn)細(xì)胞凋亡［3］。本研究中, 作者通過(guò)對(duì)LKB1 基因在胃癌組織中表達(dá)的檢測(cè)分析, 認(rèn)為胃癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移可能與其表達(dá)缺失密切相關(guān)。也有研究者考慮LKB1 抑癌作用可能與其對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的負(fù)性調(diào)節(jié)有關(guān), VEGF的表達(dá)下調(diào), 可抑制腫瘤新生血管的產(chǎn)生, 進(jìn)而對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生抑制作用［4］。本研究不僅檢測(cè)到胃癌組織中LKB1基因存在表達(dá)下調(diào), 而且與胃癌浸潤(rùn)深度及淋巴轉(zhuǎn)移呈正相關(guān), 與胃癌的組織病理類型無(wú)相關(guān)性?？梢? LKB1基因作為候選抑癌基因在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制值得引起關(guān)注。

ARID1A基因?qū)δ[瘤的抑制作用主要表現(xiàn)在使一種染色質(zhì)重塑因子失活性突變進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的再生。作者研究發(fā)現(xiàn)ARID1A基因在胃癌黏膜中的表達(dá)陽(yáng)性率與正常胃組織和炎癥組織相比明顯偏低, 分析認(rèn)為其低表達(dá)與胃癌的浸潤(rùn)深度和轉(zhuǎn)移可能有關(guān), 胃癌細(xì)胞的形成、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移可能是ARID1A基因?qū)ξ赴┘?xì)胞凋亡調(diào)控作用減弱或消失的結(jié)果。閆毓秀等［5］認(rèn)為ARID1A作用機(jī)制可能為：ARID1A基因表達(dá)的調(diào)節(jié)需要p53蛋白, 而p53蛋白又是通過(guò)調(diào)節(jié)CDKN1A和SMAD3基因的轉(zhuǎn)錄來(lái)抑制細(xì)胞增殖的。

綜上所述, ARID1A基因在抑制胃癌細(xì)胞增殖中具有重要作用。腫瘤的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的多基因參與的過(guò)程, ARID1A和LKB1在胃癌發(fā)生發(fā)展的不同環(huán)節(jié)可能為相對(duì)獨(dú)立而又相互作用的調(diào)控基因, 抑癌機(jī)制仍不清晰, 研究較為零散, 需進(jìn)行系統(tǒng)研究。

［1］ 夏雷, 莫伏根, 李剛, 等.胃癌中 HER-2 和 HER-3 的表達(dá)及臨床意義. 實(shí)用老年醫(yī)學(xué).2013.27(11):903-907.

［2］ Rugge M, Shiao YH, Bumno G, et al. The p53 gene inpatients under the age o.40 with gastric cancer: mutation rates are low but are associated with a cardiac location. Mol Pathol.2000.53(4):207-210.

［3］ Choi BI, Lee HJ, Han JK, et al. Detection of hypervascular nodular hepatocellur carcinomas: value of triphasic helical CT compared with iodized oil CT. AJR.2010.157(2):219-224.

［4］ Khan MA, Combs CS, Brunt EM, et al. Positron emission tomography scanning in the evaluation of hepatocellular carcinoma. Ann Nucl Med.2009.14(2):121-126.

［5］ 閆毓秀, 張淑萍, 滑靜. p53 基因研究進(jìn)展.北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào).2009.24(2):74-77.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.20.026

2015-01-14］

264003 濱州醫(yī)學(xué)院, 山東省菏澤市榮軍醫(yī)院