葉立新 陳錦國 鐘玉杭 謝彩連

不同出生孕周新生兒先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥篩查中17-羥孕酮切值初探

葉立新 陳錦國 鐘玉杭 謝彩連

目的 探討建立適合本中心的關(guān)于足月兒(孕周≥37周)及早產(chǎn)兒(孕周＜37周)先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(CAH)篩查中17-羥孕酮(17-OHP)的切值。方法 采用熒光酶免疫分析方法檢測新生兒濾紙干血斑中17-OHP的濃度, 去除確診病例的17-OHP濃度數(shù)據(jù), 采用百分位數(shù)法確定切值。結(jié)果 4700例早產(chǎn)兒中, 17-OHP濃度分布水平為(15.96±10.34)ng/ml；65496例足月兒中, 17-OHP濃度分布水平為(10.21±4.96)ng/ml。早產(chǎn)兒17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為35.65、51.92 ng/ml, 足月兒17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為19.23、26.87 ng/ml, 兩組新生兒17-OHP濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)論 結(jié)合本中心的實(shí)際情況, 采用統(tǒng)一17-OHP切值進(jìn)行新生兒CAH篩查不合理, 建議早產(chǎn)兒17-OHP 切值采用50.0 ng/ml, 足月兒17-OHP 切值采用25.0 ng/ml, 以減少假陽性率和需召回率。

先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥；新生兒篩查；出生孕周；17-羥孕酮；切值

先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(congenital adrenal hyperplasia, CAH)是一組由于腎上腺皮質(zhì)激素合成過程中所需酶的先天性缺陷引起的常染色體隱性遺傳病, 21-羥化酶缺乏(21-OHD)是最常見的CAH類型, 約占所有CAH的90%～95%［1］。檢測新生兒足跟血干血斑中17-OHP濃度是對新生兒進(jìn)行CAH篩查行之有效的方法。本文結(jié)合新生兒出生孕周資料對本中心2014年1～10月的新生兒CAH篩查數(shù)據(jù)進(jìn)行回顧性分析, 探討建立適合本中心的關(guān)于足月兒及早產(chǎn)兒CAH篩查中17-OHP切值。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 東莞市新生兒疾病篩查中心2014年1～10月進(jìn)行的新生兒CAH篩查標(biāo)本70196例, 男38625例, 女31571例；所有標(biāo)本基本資料中有出生孕周記錄, 其中早產(chǎn)兒4700例, 足月兒65496例。

1.2 標(biāo)本采集與送檢 新生兒出生48～72 h后從足跟內(nèi)或外側(cè)采血4滴, 滴于&903專用采血濾紙上制作成干血斑, 每個(gè)血斑要求直徑≥8 mm, 正反面滲透性好, 共采集干血斑4個(gè)。血斑在自然通風(fēng)處晾干, 放置塑料袋內(nèi)密封, 并放入4℃冰箱保存。標(biāo)本由專職人員(2次/周)上門收集送東莞市新生兒疾病篩查中心進(jìn)行統(tǒng)一檢測。

1.3 檢測方法 采用熒光酶免疫的方法進(jìn)行17-OHP濃度檢測。所使用的儀器試劑包括芬蘭雷勃公司生產(chǎn)的Neonatal17-OHP試劑盒, Thermo Labsystems Fluoroskan Ascent 熒光讀數(shù)儀。

1.4 結(jié)果判斷 采用試劑盒廠家提供的17-OHP切值, 若同一標(biāo)本2次檢測17-OHP≥20 ng/ml(30 nmol/L)判斷為該新生兒CAH初篩陽性, 需將其召回重新采血復(fù)查確診。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 兩組間17-OHP濃度差異比較采用U檢驗(yàn), 采用百分位數(shù)法確定切值。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同出生孕周的新生兒CAH篩查結(jié)果 去除3例確診CAH的病例數(shù)據(jù)后, 分析新生兒17-OHP濃度標(biāo)本70196例, 其中男38625例, 女31571例；早產(chǎn)兒4700例, 足月兒65496例。4700例早產(chǎn)兒中, 17-OHP濃度分布水平為(15.96±10.34)ng/ml , 65496例足月兒中, 17-OHP濃度分布水平為(10.21±4.96)ng/ml ；早產(chǎn)兒17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為35.65、51.92 ng/ml, 足月兒17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為19.23、26.87 ng/ml,兩組新生兒17-OHP濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表1。

2.2 兩組新生兒17-OHP濃度分布情況 4700例早產(chǎn)兒中, 17-OHP濃度最低為0.01 ng/ml, 最高為104.56 ng/ml；65496例足月兒中, 17-OHP濃度最低為0.01 ng/ml, 最高為71.9 ng/ml。早產(chǎn)兒中, 17-OHP＜20 ng/ml占75.94%；足月兒中, 17-OHP＜20 ng/ml占97.44%。見表2。

表1 不同出生孕周新生兒17-OHP濃度比較( x-±s, ng/ml)

表2 不同出生孕周新生兒17-OHP濃度分布(n, %)

2.3 初篩陽性召回復(fù)查結(jié)果 按照廠家提供的17-OHP切值進(jìn)行判斷, 對上述70196例新生兒CAH篩查中初篩陽性者進(jìn)行召回復(fù)查確診, 無確診病例。另外, 去除的3例確診病例中17-OHP初篩濃度分別為：59.07、83.84、284.60 ng/ml。

2.4 不同出生孕周新生兒CAH篩查中17-OHP切值的建立 根據(jù)表1、表2及初篩陽性召回復(fù)查確診的數(shù)據(jù)分析,如按照廠家提供的17-OHP切值, 則早產(chǎn)兒初篩的召回率為24.06%、足月兒初篩的召回率為2.56%。為了防止CAH病例的漏診及盡可能減少初篩假陽性率, 結(jié)合以上統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)同時(shí)根據(jù)本中心的實(shí)際情況, 將本中心早產(chǎn)兒CAH篩查的17-OHP切值定為50.0 ng/ml、足月兒CAH篩查的17-OHP切值定為25.0 ng/ml。

3 討論

21-OHD是最常見的CAH類型, 占90%～95%。CAH如得不到早期診治, 嚴(yán)重的會引起腎上腺皮質(zhì)危象以及由此導(dǎo)致的腦損傷或死亡、女性患兒由于外生殖器男性化造成性別判斷錯(cuò)誤、過多雄激素均可對男、女患兒生長發(fā)育造成一系列的嚴(yán)重影響。17-OHP是目前最常用的篩查21-OHD的敏感指標(biāo), 通過篩查, 能使70% 21-OHD(主要是失鹽型和大部分單純男性化型)的CAH患兒在未出現(xiàn)臨床癥狀前得到早期診斷。

合理的陽性切值的確立在篩查實(shí)驗(yàn)中至關(guān)重要, 直接影響篩查陽性的判斷。陽性切值太高容易出現(xiàn)漏篩的風(fēng)險(xiǎn), 太低導(dǎo)致的高召回率帶來不必要的浪費(fèi)和新生兒家長的心理負(fù)擔(dān)。由于各篩查實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)條件的不同, 不同地區(qū)人群分布也不同, 因此, 進(jìn)行行之有效的新生兒CAH篩查, 不能單純使用試劑廠家提供的切值作為篩查陽性判斷標(biāo)準(zhǔn), 應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室合理的17-OHP切值。

國內(nèi)研究表明［2-4］, 新生兒17-OHP的濃度水平與新生兒出生孕周與出生體重有關(guān), 建議足月兒與早產(chǎn)兒、出生低體重兒與出生正常體重兒進(jìn)行CAH篩查采用不同的17-OHP切值。國外的研究也提示, 新生兒出生后如合并心肺疾病時(shí)17-OHP也會升高［5,6］。Olgemller等［7］研究資料同樣表明,根據(jù)新生兒出生體重和胎齡為依據(jù)建立相應(yīng)的17-OHP切值, 可以提高確診率, 同時(shí)在不影響篩查敏感性的前提下減少35%的召回率。萬志丹等［8］研究發(fā)現(xiàn), 新生兒不同出生孕周、不同出生體重各組別間17-OHP的濃度存在顯著性差異, 其中, 出生孕周與17-OHP濃度的相關(guān)性最好, 建議新生兒CAH篩查分早產(chǎn)兒和足月兒兩個(gè)17-OHP切值即可。

本研究顯示, 4700例早產(chǎn)兒中, 17-OHP濃度分布水平為(15.96±10.34)ng/ml, 65496例足月兒中, 17-OHP濃度分布水平為(10.21±4.96 )ng/ml；早產(chǎn)兒17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為35.65、51.92 ng/ml, 足月兒17-OHP濃度的95%百分位數(shù)和99%百分位數(shù)分別為19.23、26.87 ng/ml, 兩組新生兒17-OHP濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。同時(shí), 確診的3例CAH病例17-OHP初篩濃度均＞50 ng/ml。如果使用試劑廠家提供的17-OHP的切值,早產(chǎn)新生兒組CAH的初篩陽性召回率為24.06%, 足月新生兒組CAH的初篩陽性召回率為2.56%, 過高的召回率會引起科室人力、物力的浪費(fèi)和新生兒家長的心理負(fù)擔(dān)。為了防止CAH病例的漏診及盡可能減少初篩假陽性率, 結(jié)合以上統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)同時(shí)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況, 將本中心早產(chǎn)兒CAH篩查的17-OHP切值定為50.0 ng/ml、足月兒CAH篩查的17-OHP 切值定為25.0 ng/ml；同時(shí), 應(yīng)加強(qiáng)對初篩17-OHP濃度為25.0～50.0 ng/ml的早產(chǎn)兒的隨訪, 避免CAH的漏診。

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Brief investigation of 17-hydroxyprogesterone cut-off values in congenital adrenal hyperplasia screening for newborn with different birth gestational weeks

YE Li-xin, CHEN Jin-guo, ZHONG Yuhang, et al.
Dongguan City Maternal and Child Health Care Hospital/Dongguan City newborn disease Screening Center, Dongguan 523002, China

Objective To investigate and establish appropriate 17-hydroxyprogesterone (17-OHP) cutoff value in congenital adrenal hyperplasia (CAH) screening for term infant (gestational weeks≥37 weeks) and premature infant (gestational weeks＜37 weeks).Methods Fluorescence enzyme immunoassay was applied to detect 17-OHP concentration in newborn dried blood spots on filter paper.17-OHP concentrations in diagnosed cases were eliminated for cut-off value determination by percentile method.Results 17-OHP concentration distribution level was (15.96±10.34) ng/ml in 4700 premature infants, and (10.21±4.96) ng/ml in 65496 term infants.Percentiles of 95% and 99% 17-OHP concentration in premature infants were 35.65 and 51.92 ng/ml, and those in term infants were 19.23 and 26.87 ng/ml.The difference of 17-OHP concentration between the two groups had statistical significance (P＜0.01).Conclusion Implement of unified 17-OHP concentration cut-off value for newborn CAH screening is irrational.Suggestions are made for implement of 50.0 ng/ml as 17-OHP concentration cut-off value in premature infant, and 25.0 ng/ml in term infant, in order to reduce false positive rate and needed recall rate.

Congenital adrenal hyperplasia; Newborn screening; Birth gestational weeks; 17-hydroxyprogesterone; Cut-off value

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.14.004

2015-04-02］

523002 東莞市婦幼保健院東莞市新生兒疾病篩查中心