摘要：目的 分析EDTA依賴性血小板減少的現(xiàn)象并推測其原因。方法 對26例EDTA依賴性血小板減少患者重新采血，手工計數(shù)血小板（Plt）與白細胞（WBC），并按時間梯度上機檢驗Plt與WBC的計數(shù)變化，同時檢驗其ESR和免疫球蛋白含量。結果 采血后10 min內(nèi)，上機檢測EDTA抗凝血，，其Plt及WBC計數(shù)結果與手工法的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），采血30 min以后，儀器法計數(shù)結果與手工法的差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；對比健康志愿者，EDTA依賴性血小板減少癥患者的紅細胞沉降率（ESR）、C-反應蛋白、IgG及IgM差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 EDTA依賴性血小板減少癥的發(fā)生可能與患者的血小板、自身抗體及其他個體因素有關，做血常規(guī)檢查時遇到Plt計數(shù)水平與臨床指征不相吻合時，需及時與臨床溝通并復查，必要時推片鏡檢計數(shù)，以避免誤診。

關鍵詞：EDTA依賴性血小板減少；血小板；白細胞；紅細胞沉降率；C-反應蛋白

ICSH建議，臨床血常規(guī)檢查計數(shù)全血細胞需用EDTA鹽抗凝，肝素、枸櫞酸鹽等抗凝劑均不適用，因此臨床血常規(guī)均采用紫帽EDTA抗凝管來采集。EDTA依賴性血小板減少癥患者近年來常見報道，其發(fā)生已經(jīng)成為臨床Plt計數(shù)誤診的最主要因素，正常人群中該現(xiàn)象的發(fā)生率為0.09%～0.21%，與免疫系統(tǒng)紊亂密切相關，但具體原因目前尚不明確[1]。本研究對26例EDTA依賴性血小板減少癥（EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia，EDTA-PTCP）患者的血常規(guī)進行分析，討論其儀器計數(shù)的Plt和WBC數(shù)量與采樣后標本存放時間的關系，同時對其ESR、C-反應蛋白及三個亞型的血清免疫球蛋白含量進行檢測。

1資料與方法

1.1一般資料 收集2012年9月～2014年6月至我院住院并確認為EDTA-PTCP的患者及我院體檢科健康體檢者的資料。EDTA-PTCP組（患者組）共26例，其中男l(wèi)1例，女15例，年齡平均（49±17）歲，健康志愿組共30例，男12例，女l8例，年齡平均（45±16）歲。

1.2儀器和試劑 SYSMEX-XE5000全自動五分類血細胞分析儀； Beckman Coulter AU2700全自動生化分析儀及IgA、IgG、IgM試劑（伊利康速率散射比濁法）；C-反應蛋白試劑（西班牙BioSystems）；Olympus公司CHS雙目顯微鏡；血沉儀；EDTA-K2、枸櫞酸鈉抗凝管；所有儀器均為原裝配套試劑，儀器室內(nèi)質(zhì)控正常在控，能力驗證結果滿意。

1.3方法 抽取26例EDTA-PTCP患者的清晨空腹靜脈血，按要求注入EDTA-K2及含分離膠試管。EDTA-K2抗凝管立即混勻后分別于5 min、10 min、30 min、60 min、90 min、l20 min進行儀器法血常規(guī)檢驗。采集患者血液時，所有26例標本分別按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行涂片，通過顯微鏡鏡檢，選擇有經(jīng)驗的主管檢驗師計數(shù)Plt和WBC含量[2]，將其結果作為參考值。ESR及免疫球蛋白含量的檢測按對應的SOP文件進行。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS 18.0進行統(tǒng)計分析，t檢驗比較組間差異，P<0.05為組間差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1患者組Plt和WBC計數(shù) 26例EDTA-PTCP陽性患者在采血后不同時間段對樣品進行的儀器法檢測Plt和WBC計數(shù)見表1，與手工計數(shù)相比，5 min與10 min時上機檢測EDTA-K2抗凝血的Plt和WBC計數(shù)，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），但30 min及以后的差異逐漸變大（P<0.05）。

2.2 ESR、C-反應蛋白及免疫球蛋白檢測結果 與對照組相比，患者組IgG、IgM、C-反應蛋白及ESR的檢驗結果明顯高于健康對照組，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而IgA的結果，與對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），見表2。

3討論

自Onder等報道一例EDTA-PTCP現(xiàn)象后，引起了國內(nèi)外廣泛關注[3]。EDTA-PTCP是由于EDTA抗凝血在全自動血細胞計數(shù)儀上檢測時，EDTA鹽誘導血小板聚集、堆積，從而影響血小板計數(shù)，使血小板計數(shù)偏低[3]。而EDTA-K2是目前公認的血細胞計數(shù)的抗凝劑，已廣泛用于臨床血常規(guī)檢測。可以確定，發(fā)生EDTA-PTCP的原因之一是在EDTA鹽作為抗凝劑的前提下，出現(xiàn)的免疫介導的冷抗血小板自身抗體。究其原因，可能與血小板表面存在的某種隱匿性抗原有關[4]。

本研究中，隨著采血后時間的延長，患者組血小板聚集逐漸加重，儀器法計數(shù)血小板含量逐步減少，而白細胞數(shù)在血液采集30 min后明顯升高，其可能原因就是因為出現(xiàn)了血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，導致血小板計數(shù)減少，儀器誤認為聚集的血小板為白細胞而導致白細胞計數(shù)的增高。在患者組中，血清IgG、IgM的含量相比健康對照組，有較大增高，ESR，CRP也顯著高于對照組，因此可以認為，患者血清中的免疫球蛋白成分及水平與EDTA-PTCP現(xiàn)象有一定的相關性。

血常規(guī)是臨床檢查的最基本項目，臨床應用非常廣泛。盡管EDTA-PTCP在人群的發(fā)生概率很低，但一旦遇到并忽視此類患者，可能造成誤診，給患者及臨床診治工作帶來很大困擾。日常工作狀態(tài)下，采血后10 min進行血常規(guī)檢驗在平常工作中可能較難實現(xiàn)，而超過30 min，血小板計數(shù)會減少而白細胞會相對升高，造成檢驗結果的偏差，甚至出現(xiàn)危急值。因此在日常工作中，檢驗工作人員必須加強與患者和臨床醫(yī)師的溝通，對無任何出血癥狀且Plt直方圖又發(fā)生改變的血小板減少患者，應加強人工推片復檢，通過手工法計數(shù)血小板和白細胞以排除EDTA依賴性血小板減少的干擾。

參考文獻：

[1]張昌峰，朱俊.淺析EDTA依賴性假性血小板減少癥病因[J].安徽醫(yī)藥，2009，13（3）：302.

[2]葉應嫵，王毓三，申子瑜，主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006：136-143.

[3]Onder O，Weinstcin A，Loyer LW.Pseudothrombocytopenia caused by platelet agglutinins that ale reactive in blood anticoagulated with chelating ageats[J].Blood，1980，56：177-182.

[4]龍聰，郭輝，楊章元.42例EDTA依賴性血小板減少癥患者的檢測分析[J].海南醫(yī)學，2012，23（15）：100-101.

編輯/肖慧