摘要：文章利用液相色譜法對油性食品中苯并（α）芘進(jìn)行測定分析，采用弗羅里硅土柱固相萃取柱凈化樣品，建立了高效液相色譜熒光法測定食品中苯并（α）芘的方法。樣品以環(huán)己烷為提取劑，凈化、蒸發(fā)濃縮后用流動相溶解，測定結(jié)果證實(shí)可靠，有應(yīng)用價值。

關(guān)鍵詞：油性食品 苯并（α）芘 液相色譜法

中圖分類號：TS207.3；O657.72 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-5336（2015）06-0000-00

1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)過程中所選擇的油性食品分析樣本包括豬肉以及橄欖油兩個部分，均采集于XX地區(qū)農(nóng)貿(mào)市場。實(shí)驗(yàn)所需的試劑包括：色譜級乙醇試劑，色譜級乙腈試劑，優(yōu)純級氫氧化鉀；弗羅里硅土小柱，苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)品（濃度為12.0mg/ml），環(huán)已烷，氫氧化鉀乙醇水溶液（劑量為1.0mol/L），標(biāo)準(zhǔn)儲備液（劑量為1.0mg/L），苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)工作液（濃度為0.5mg/ml），超純水，一級水。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)過程中所需的儀器設(shè)備包括：高效液相色譜分析儀（配合熒光檢測器），T25均質(zhì)器，渦旋振蕩器，氮吹儀，固相萃取儀，離心機(jī)。

1.3 樣品處理

將豬肉、橄欖油可食用部分切碎，充分混合均勻，密封后置入-18.0℃環(huán)境下冷凍儲存?zhèn)溆谩Ｌ崛》椒椋悍Q取2.0g劑量混合試樣，加入氫氧化鉀乙醇溶液10.0ml劑量，使其達(dá)到均質(zhì)狀態(tài)，持續(xù)時間2.0min。在溫度為80.0℃環(huán)境下水浴，皂化處理，持續(xù)時間為3.0h。自然冷卻至室溫狀態(tài)，然后加入10.0ml劑量超純水，充分混合均勻后，加入15.0ml劑量環(huán)已烷，在渦旋混合器上進(jìn)行處理，混合時間為2.0min，然后做離心處理，離心處理?xiàng)l件為4000.0r/min，持續(xù)時間為3.0min，離心處理后轉(zhuǎn)移上層清液。將10.0ml劑量環(huán)已烷加入混合樣品中，重復(fù)上述操作，將兩次離心處理后的提取液合并，使用氮吹儀操作，控制劑量在3.0ml～5.0ml范圍內(nèi)，保留濃縮溶液。凈化處理選擇弗羅里硅土柱進(jìn)行凈化，使用前通過6.0ml劑量環(huán)已烷進(jìn)行濕潤活化，將濃縮液移入弗羅里硅土柱內(nèi)，收集流出液，然后使用6.0ml劑量環(huán)已烷對弗羅里硅土柱進(jìn)行淋洗，將收集濾液合并并濃縮，使用1.0ml劑量乙腈試劑對濃縮液進(jìn)行溶解，以0.45um微孔濾膜進(jìn)行濾過處理。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 方法學(xué)驗(yàn)證

在按照上述色譜條件對樣品進(jìn)行液相色譜分析的過程當(dāng)中，將進(jìn)樣濃度作為橫向坐標(biāo)，將峰面積作為縱向坐標(biāo)，對苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)曲線所對應(yīng)的回歸方程以及線性范圍進(jìn)行計(jì)算分析。

2.2 回收率與精密度實(shí)驗(yàn)

將不含有苯并（α）芘成分的樣品作為反應(yīng)基質(zhì)，10倍狀態(tài)下測定低限，100倍狀態(tài)下測定低限水平并添加回收實(shí)驗(yàn)，重復(fù)實(shí)驗(yàn)次數(shù)為10次，取均值作為最終結(jié)果。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果

以濃度0.5ng/ml苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)品色譜分析為例，苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如下圖所示（見圖1）。根據(jù)色譜圖數(shù)據(jù)進(jìn)行線性探究實(shí)驗(yàn)，對應(yīng)線性方程為“y=1.70e+0.05x-1.25e+0.04”，相關(guān)性系數(shù)R2取值為0.9995（P<0.05）。

圖1：濃度0.5ng/ml苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)品色譜分析圖 圖2：的苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)工作曲線圖

該狀態(tài)下所對應(yīng)的苯并（α）芘標(biāo)準(zhǔn)工作曲線如下圖所示（見圖2），結(jié)合圖2來看，當(dāng)苯并（α）芘濃度控制在0.01ng/ml～10.0ng/ml范圍內(nèi)的情況下，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中峰面積與濃度之間具有良好的線性相關(guān)關(guān)系。

3.2 方法回收率與精密度結(jié)果

下表（如表1所示），為豬肉、橄欖油在液相色譜檢測條件下所對應(yīng)的苯并（α）芘回收率、精密度數(shù)據(jù)結(jié)果。根據(jù)表1中數(shù)據(jù)來看，豬肉、橄欖油添加濃度在1.0ug/kg～100.0ug/kg范圍內(nèi)時，回收率范圍取值在81.3%～93.5%范圍內(nèi)，精密度取值在0.68%～3.40%范圍內(nèi)。

表1：豬肉、橄欖油苯并（α）芘回收率、精密度數(shù)據(jù)表

4 結(jié)語

對于植物源油性食品而言，樣品基質(zhì)潔凈度好的，樣品分析前處理方法比較簡單，通常不需要皂化處理，但對于動物源油性食品而言，由于樣品基質(zhì)中成分復(fù)雜，存在多種可溶性蛋白質(zhì)，因此前處理效果將直接對檢測結(jié)果的判定水平產(chǎn)生影響。本次研究中，對豬肉（動物源油性食品）以及橄欖油（植物源油性食品）基質(zhì)進(jìn)行皂化處理，去除了油脂類雜質(zhì)，在此基礎(chǔ)之上通過環(huán)已烷萃取提取，取得了滿意的分析效果。

收稿日期：2015-03-16

作者簡介：邱鵬昊（1988—），男，江蘇南京人，本科，助理工程師，目前在江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院從事檢驗(yàn)工作。