摘要：目的：研究柚皮檸檬苦素的提取工藝條件及其穩(wěn)定性。方法：采用正交實(shí)驗(yàn)探究柚子皮中檸檬苦素提取工藝的最佳工藝參數(shù)和檸檬苦素穩(wěn)定性的影響因素。結(jié)果：以乙醇作為提取溶劑，提取溫度50℃，料液比1：20，浸提時(shí)間80min；檸檬苦素的穩(wěn)定性受光照、PH、溫度、金屬離子等因素的影響[1]，在不同環(huán)境中，其受影響的情況有明顯的差別。

關(guān)鍵詞：檸檬苦素 提取最佳參數(shù) 穩(wěn)定性

中圖分類號(hào)：S482.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2015）06-0000-00

檸檬苦素，純品白色、味苦，結(jié)晶狀。檸檬苦素和其他類似物化合物是柑橘類水果呈現(xiàn)苦味的主要原因，一般在柑橘屬植物果皮、果實(shí)、種子中富集。具有抗腫瘤、抗病毒[2]、鎮(zhèn)痛、抗炎、催眠等多種生物活性。該試驗(yàn)擬采用溶劑提取法以柚子皮[3]為原料，對(duì)檸檬苦素從柚子皮中提取的工藝進(jìn)行優(yōu)化[4]，研究最佳提取溶劑及相關(guān)影響因素，為這種物質(zhì)的提取和利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

柚子皮：市場(chǎng)銷售柚子，收集果皮，干燥。主要化學(xué)試劑：石油醚、乙醇、二氯甲烷、丙酮（均為分析純）分光光度計(jì)，數(shù)顯恒溫水浴箱，電子分析天平，微型植物粉碎機(jī)，干燥箱，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器

1.2 試驗(yàn)方法

（1）工藝流程；柚子皮→干燥、粉碎→石油醚脫脂→減壓蒸干→萃取→減壓蒸餾→溶解→過(guò)濾除雜→低溫結(jié)晶→檸檬苦素晶體將柚子皮干燥、粉碎，用60-90℃石油醚脫脂，向含有乙醇、二氯甲烷、丙酮的三支試管中各加入15g脫脂粉末置于水浴回流提取器中提取60min，將樣品溶液減壓蒸干，用二氯甲烷溶解轉(zhuǎn)移至其他容器減壓蒸餾，過(guò)濾，低溫結(jié)晶得檸檬苦素晶體。（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備和檸檬苦素含量的測(cè)定；準(zhǔn)確稱取所得檸檬苦素各10mg，用乙醇溶解，定容至50ml容量瓶中配成200ug/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。利用顯色試劑與檸檬苦素產(chǎn)生顏色的反應(yīng)原理，采用分光光度法測(cè)定柚皮中檸檬苦素的含量。（3）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制向5支試管中分別加入0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入5mL顯色液，加無(wú)水乙醇定容，搖勻，靜置60min。在500nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，使用直線回歸方法計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線。（4）檸檬苦素提取條件的優(yōu)化；溶劑提取法提取檸檬苦素時(shí)，影響提取效果的因素有很多，以乙醇為提取溶劑，結(jié)合單因素和正交實(shí)驗(yàn)對(duì)提取溫度、料液比、提取時(shí)間、溶劑濃度等因素對(duì)檸檬苦素的影響進(jìn)行研究，根據(jù)檸檬苦素的提取量為考察指標(biāo)，來(lái)確定最佳提取條件。因素與水平 表1所示：（5）穩(wěn)定性研究；一、檸檬苦素的初步純化：稱取10g檸檬苦素，加入100mL80%乙醇，在60℃恒溫水浴中攪拌100min后，抽濾，得到檸檬苦素待測(cè)溶液。二、光照對(duì)檸檬苦素穩(wěn)定性的影響；取10mL一定量的的檸檬苦素提取液裝于6支試管中，共三組分別在日光直射下、室內(nèi)自然光及暗處放置不同時(shí)間后，在500nm處測(cè)其吸光度，同時(shí)利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算檸檬苦素保存率。三、溫度對(duì)檸檬苦素穩(wěn)定性的影響；取10mL一定量檸檬苦素提取液裝于5支試管中，共四組分別放置室溫25℃，40℃，50℃，60℃，70℃下恒溫，每間隔一定時(shí)間取樣一次，迅速冷卻后測(cè)齊吸光度，同時(shí)利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算檸檬苦素的保存率。四、PH對(duì)檸檬苦素的影響；分別取檸檬苦素提取液10mL，分別用NaOH和HCL調(diào)至不同的PH值，震蕩，室溫避光靜止1h，在500nm處測(cè)量吸光度。五、離子對(duì)檸檬苦素的影響；取6支試管，各加入9.0mL檸檬苦素溶液，分別加入濃度為1.0mol/L的含有Fe3+、Ca2+、Cu2+、Al3+、K+的溶液1.0mL，使檸檬苦素溶液中金屬離子為0.1mol/L，搖勻，放置1h、2h、和4h后測(cè)定吸光度。

2 試驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

在相同條件下對(duì)脫脂粉末進(jìn)行提取，乙醇、二氯甲烷較接近，丙酮提取效果稍好，對(duì)溶劑的毒性、刺激性、操作性及成本的考慮，選用乙醇作為柚皮中檸檬苦素的提取溶劑。

2.2 檸檬苦素標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖1 所示：

由圖1 得知，檸檬苦素標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y = 0.0033x + 0.0255，其中線性相關(guān)系數(shù)R2= 0.9935

2.3 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

從表2可知，影響檸檬苦素提取量的因素中，得出各因素對(duì)檸檬苦素提取的影響的大小順序?yàn)镃>D>B>A，其最優(yōu)水平組合為A1B2C2D2， 乙醇濃度70%，提取溫度50℃，料液比1：20，浸提時(shí)間80min

2.4 檸檬苦素的穩(wěn)定性結(jié)果

通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（檸檬苦素保存率）可以看出，光照對(duì)檸檬苦素穩(wěn)定性的影響顯著，陰暗放置穩(wěn)定性好；室溫25℃、40℃下檸檬苦素的穩(wěn)定性變化不是很明顯，50℃、60℃、70℃時(shí)，溫度升高，檸檬苦素的保存率越低；檸檬苦素在PH為1～3時(shí)不穩(wěn)定，3～7時(shí)較為穩(wěn)定，7～14時(shí)穩(wěn)定性最差；金屬離子中，Cu2+對(duì)檸檬苦素影響最大，其次是Fe3+、Al3、Ca2+、K+。

3 結(jié)語(yǔ)

最佳提取工藝參數(shù)是乙醇為提取溶劑，提取溫度50℃，料液比1：20，浸提時(shí)間80min；光照，溫度，pH，等對(duì)檸檬苦素穩(wěn)定性的影響較為顯著，保存檸檬苦素時(shí)應(yīng)放置在陰暗處，低溫或室溫下，保持弱酸或中性環(huán)境，盡量避免與金屬的接觸，柚子皮目前并未被人們加以利用，以柚子皮為原料，提取其中的檸檬苦素，具有較高的開(kāi)發(fā)價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景。

參考文獻(xiàn)

[1] 孫明奇，胡建中，潘思軼.柑橘皮類胡蘿卜素提取物穩(wěn)定性研究[J].食品科學(xué)，2007.

[2] 賈冬英，姚開(kāi)，譚敏.柚果皮中生理活性成分的研究進(jìn)展[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2001（11）：77-78.

[3] 肖麗鳳.柚子中組分的提取、分離及分析方法的研究[J].食品分析，2008：9-14.

[4] 羅水忠，潘利華，何建軍.柑橘籽中檸檬苦素的提取與抑菌性研究[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊，2006（10）.

收稿日期：2015-02-26

基金項(xiàng)目：2014年度吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院大學(xué)生科技創(chuàng)新課題（項(xiàng)目編號(hào)：2014081）。

作者簡(jiǎn)介：高山（1992—），男，寧夏石嘴山人，吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院本科在讀，研究方向：食品科學(xué)與工程。

*通訊作者：呂聞明（1982—），男，吉林吉林人，研究生，研究方向：食品科學(xué)與工程。E-mail：11948227@qq.com。