劉勝軍　周靜文　楊代勤　許巧情

摘要 通過(guò)檢索黃鱔核苷酸序列，分析黃鱔已經(jīng)克隆出的免疫相關(guān)的基因。主要免疫基因有MHC、細(xì)胞間粘附分子、硒蛋白、肝抗菌肽、補(bǔ)體成分等；與疾病相關(guān)的酶類有彈性蛋白酶、醛縮酶、肽基脯氨酰異構(gòu)酶等；Y-box結(jié)合蛋白、抗增殖蛋白、泛素蛋白等蛋白也參與免疫反應(yīng)。

關(guān)鍵詞 黃鱔；免疫；基因

中圖分類號(hào) S966.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2015）19-131-03

黃鱔是我國(guó)主要經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)品之一，廣泛分布于湖泊、河流、水庫(kù)、池沼、溝渠等水體中，特別是珠江流域和長(zhǎng)江流域，更是盛產(chǎn)黃鱔的地區(qū)。

近年來(lái)，由于黃鱔生活環(huán)境的惡化和過(guò)度捕撈導(dǎo)致黃鱔分布范圍急劇下降[1]，再加上人們對(duì)黃鱔需求量的提高，出現(xiàn)了黃鱔養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，集約化養(yǎng)殖呈良好勢(shì)頭，由于養(yǎng)殖密度加大，集約化程度加快，疾病研究滯后，黃鱔發(fā)病率也隨之加大，一般發(fā)病率達(dá)30%，其中死亡的占70%，很大程度上制約了其發(fā)展速度[2]。黃鱔養(yǎng)殖病害主要有細(xì)菌性疾?。c炎、腐皮、爛鰓等）、寄生蟲?。ㄐ」舷x病、棘頭蟲病、毛細(xì)線蟲病等）、應(yīng)激性疾?。ㄉ喜莶『透忻安。┖推渌膊。òl(fā)燒病和肝膽病）[3]。迄今為止，關(guān)于黃鱔疾病的報(bào)道已有30多種[4]，占相當(dāng)大比重的是細(xì)菌性疾病、寄生蟲病和環(huán)境因素引起的疾病[5]，也有少數(shù)是真菌性疾病，但關(guān)于病毒性疾病的研究目前還未見(jiàn)報(bào)道。

由于黃鱔具有潛泥等獨(dú)特的生活習(xí)性，治療黃鱔的疾病大多數(shù)會(huì)選擇全池潑灑，亂用藥不僅會(huì)破壞水質(zhì)，而且會(huì)使黃鱔產(chǎn)生耐藥性，同時(shí)對(duì)鱔魚體產(chǎn)生一定的傷害。研究表明，嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）能引起黃鱔出現(xiàn)多種病理癥狀，是黃鱔的主要致病菌之一[6]。以前對(duì)該致病菌引起的水產(chǎn)動(dòng)物疾病主要采用抗生素類藥物治療，導(dǎo)致了病原菌產(chǎn)生耐藥性，不僅增加了對(duì)疾病的有效治療困難，而且大量使用抗生素類漁用藥物已成為公共衛(wèi)生安全的潛在問(wèn)題[7]。

利用免疫接種技術(shù)預(yù)防魚類的細(xì)菌性疾病，已被大量的研究證明是有效預(yù)防水產(chǎn)動(dòng)物疾病的方法，而在飼料中添加各種免疫刺激劑可以提高受免動(dòng)物的免疫保護(hù)率[8]。在免疫接種的同時(shí)，通過(guò)給予免疫刺激劑調(diào)節(jié)受免魚體自身免疫系統(tǒng)的功能，提高其抗病能力，也已經(jīng)成為目前國(guó)內(nèi)外研究者探討水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物疾病防治方法的重要途徑[9]。然而，目前免疫基因治療研究大部分應(yīng)用于人體，而如何研究黃鱔免疫基因預(yù)防技術(shù)成為黃鱔免疫階段性問(wèn)題。研究表明，用添加100.0 mg/kg免疫多糖的飼料投喂受免黃鱔，不僅可以提高受免黃鱔對(duì)嗜水氣單胞菌（A.hydrophila）脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）的免疫應(yīng)答水平，而且可以增強(qiáng)黃鱔的非特異性免疫力和抵抗嗜水氣單胞菌人工感染的能力，同時(shí)也證明了在飼料中添加免疫多糖對(duì)黃鱔的生長(zhǎng)速度和肝臟功能均無(wú)不良影響[7]。

在檢索過(guò)程中筆者發(fā)現(xiàn)大部分酶類、蛋白質(zhì)等與人或動(dòng)物的腫瘤疾病相關(guān)，表明這些免疫基因大多數(shù)是從其他動(dòng)物的研究中發(fā)現(xiàn)而試圖應(yīng)用于黃鱔疾病免疫。筆者總結(jié)了黃鱔免疫相關(guān)基因的研究現(xiàn)狀，旨在為黃鱔免疫防治的進(jìn)一步發(fā)展提供信息。

1 材料與方法

在NCBI網(wǎng)站中檢索黃鱔（Monopterus albus）核苷酸序列，運(yùn)用NCBI網(wǎng)站中的blastx程序比對(duì)已查找的黃鱔核苷酸序列（DNA and RNA sequences、EST），篩選出與免疫、疾病相關(guān)的基因以及生化相關(guān)的酶類和蛋白質(zhì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 免疫基因 迄今為止，在黃鱔中共克隆了MHC、幾丁質(zhì)酶、補(bǔ)體成分、凝集素、溶菌酶、黏附分子，熱休克蛋白、硒蛋白及凋亡因子等主要免疫基因（表1）。

2.2 酶類基因的擴(kuò)增 在黃鱔中共克隆了水解酶類、氧化還原酶類、轉(zhuǎn)移酶類、裂解酶類、異構(gòu)酶類、合成酶類、轉(zhuǎn)錄酶類以及與泛素相關(guān)的酶類等基因（表2）。

2.3 蛋白質(zhì)類基因 經(jīng)檢索可知，在黃鱔中克隆了核糖體蛋白、Y-box結(jié)合蛋白、鈣結(jié)合蛋白、核小體結(jié)合蛋白、CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白、纖溶酶原激活物抑制物1RNA結(jié)合蛋白、FK506結(jié)合蛋白、DNA結(jié)合抑制蛋白、平滑肌肌動(dòng)蛋白、皮質(zhì)肌動(dòng)蛋白、抗增殖蛋白、Ras相關(guān)蛋白、泛素、14-3-3蛋白、埃茲蛋白、脂聯(lián)素受體、硫氧還蛋白、核不均一核糖核蛋白、膜聯(lián)蛋白A2、糖蛋白、生長(zhǎng)激素、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78、原肌球蛋白（表3）。

3 小結(jié)

綜上所述，目前黃鱔中克隆的免疫基因包括主要組織相容性復(fù)合體 I和II、幾丁質(zhì)酶 1和2、補(bǔ)體成分、β-乳糖苷結(jié)合凝集素、C型溶菌酶、肝抗菌肽、細(xì)胞間黏附分子2、粘附調(diào)節(jié)分子、熱休克蛋白、熱休克同源蛋白、硒結(jié)合蛋白、硒蛋白、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（硒蛋白）、細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白、凋亡抑制因子、高遷移率族蛋白、腎母細(xì)胞瘤蛋白、生長(zhǎng)分化因子、冷誘導(dǎo)型 RNA 結(jié)合蛋白。

43卷19期 劉勝軍等 名特水產(chǎn)養(yǎng)殖對(duì)象黃鱔免疫基因的研究現(xiàn)狀

參考文獻(xiàn)

[1] 朱長(zhǎng)開(kāi).黃鱔資源保護(hù)與人工增殖初探[J].水利漁業(yè)，2003，23（6）：33-34.

[2] 李明鋒，王汝英.黃鱔Monopterus albus （Zulew）病害研究進(jìn)展明[J].現(xiàn)代漁業(yè)信息，2004，19（6）：6-8.

[3] 陳麗婷，肖光明，王曉清，等.黃鱔養(yǎng)殖主要病害分析及防治措施[J].當(dāng)代水產(chǎn)，2012（7）：67-69.

[4] 黃成娟.淺談黃鱔的養(yǎng)殖現(xiàn)狀和發(fā)展前景[J].齊魯漁業(yè)，2010，27（7）：57.

[5] 陳曉利.黃鱔嗜水氣單胞菌病和溫和氣單胞菌病防治研究[D].雅安： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[6] 彭永興.黃鱔高密度養(yǎng)殖中常見(jiàn)病害防治[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2003（4）：40.

[7] 徐海華，李兆文，汪成竹.免疫多糖對(duì)受免黃鱔免疫保護(hù)力的增強(qiáng)作用[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，12（2）：80-84.

[8] 金淑英，李斯華，黃挺進(jìn).酵母葡聚糖對(duì)斷奶仔豬抗病促生長(zhǎng)作用的試驗(yàn)研究[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2001（3）：3-4.

[9] 陳昌福，陳萱，陳超然，等.β-葡聚糖的特性及其對(duì)動(dòng)物免疫功能的調(diào)節(jié)[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，22（1）：95-100.