陳世豪，譚柏松，張偉堅(jiān)

（南方醫(yī)科大學(xué)附屬新會(huì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 江門 529100）

原發(fā)性高血壓伴頸動(dòng)脈粥樣硬化與脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2活性水平相關(guān)性研究

陳世豪，譚柏松，張偉堅(jiān)

（南方醫(yī)科大學(xué)附屬新會(huì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 江門 529100）

目的 探討原發(fā)性高血壓(EH)患者伴發(fā)頸動(dòng)脈粥樣硬化(CAS)病變與脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2 (Lp-PLA2)的相關(guān)性。方法采用ELISA方法檢測(cè)130例EH患者和50例健康人群(健康對(duì)照組)的血漿Lp-PLA2水平，根據(jù)頸動(dòng)脈彩超檢查結(jié)果，130例EH患者中伴發(fā)CAS者75例，其中無斑塊18例，穩(wěn)定斑塊32例，不穩(wěn)定斑塊25例。結(jié)果EH伴發(fā)CAS者的Lp-PLA2中位數(shù)水平為(98～589)ng/ml，平均258 ng/ml，明顯高于單純EH者[102(59～195)ng/ml]和健康對(duì)照組[68(10～153)ng/ml]，P＜0.01；血漿Lp-PLA2診斷EH伴發(fā)CAS的ROC曲線AUC為0.971，當(dāng)以177.5 ng/ml為臨界值時(shí)，其敏感度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值和準(zhǔn)確性分別為85.3% (64/75)、97.1%(102/105)、95.5%(64/67)、90.3%(102/113)、92.2%(166/180)。EH伴發(fā)CAS患者中無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組、不穩(wěn)定斑塊組Lp-PLA2水平分別平均為169 ng/ml、249 ng/ml、372 ng/ml，三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論Lp-PLA2檢測(cè)對(duì)EH患者早期CAS有預(yù)測(cè)意義，為CAS早期診斷和干預(yù)治療提供積極的參考價(jià)值。

原發(fā)性高血壓；頸動(dòng)脈粥樣硬化；脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2

動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是心腦血管并發(fā)癥的病理基礎(chǔ)，原發(fā)性高血壓(EH)患者是促進(jìn)AS發(fā)生的高危人群，心腦血管疾病致殘、致死率極高，如何早期識(shí)別AS，并進(jìn)一步早期干預(yù)成為研究熱點(diǎn)。AS是一種炎癥性疾病，在粥樣斑塊形成、進(jìn)展和最終破裂的過程中均有炎癥性反應(yīng)介質(zhì)的參與。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)是近年來炎性反應(yīng)介質(zhì)的熱點(diǎn)，其具有促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化作用，與心腦血管疾病密切相關(guān)[1-2]。本研究探討原發(fā)性高血壓患者中Lp-PLA2與頸動(dòng)脈硬化的關(guān)系，為早期EH人群的動(dòng)脈粥樣硬化提供預(yù)測(cè)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2013年6月至2014年3月在本院內(nèi)科確診為EH患者130例，其中男性80例，女性50例；年齡31～93歲，平均(58±13)歲，所有患者均符合2010年修訂版的《中國(guó)高血壓防治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行頸動(dòng)脈彩超[頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度(IMT≥0.9或有動(dòng)脈粥樣斑塊)]確診75例頸動(dòng)脈硬化患者(EH伴發(fā)AS組)，根據(jù)斑塊顯示無斑塊18例，穩(wěn)定斑塊32例，不穩(wěn)定斑塊25例。此外55例為單純EH患者，同時(shí)選取健康人群50例作為健康對(duì)照組，排除心腦血管疾病及腫瘤等疾病。所有待測(cè)者均抽取空腹晨血3 ml EDTA抗凝，分離血漿-20℃保存。

1.2 檢測(cè)方法 采用ELISA方法檢測(cè)Lp-PLA2，試劑由天津康爾克生物技術(shù)有限公司提供批號(hào)140201，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控品為原裝配套試劑。測(cè)定儀器為瑞士TECAN全自動(dòng)酶免分析儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，血漿Lp-PLA2檢測(cè)數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，采用中位數(shù)表示，以非參數(shù)檢驗(yàn)比較各組的Lp-PLA2差異，并采用ROC曲線確定最佳臨界值和ACU，同時(shí)對(duì)不同組合的檢測(cè)效能進(jìn)行評(píng)價(jià)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血漿Lp-PLA2水平比較 EH伴發(fā)AS組血漿Lp-PLA2水平與單純EH組及健康對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U值分別為191.0、40.0，P均＜0.01)；而單純EH組與健康對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U值為552.0，P＜0.01)，見表1。

表1 各組血漿Lp-PLA2水平比較[中位數(shù)(范圍)]

2.2 血漿Lp-PLA2水平在EH伴發(fā)AS患者中的臨界值確定和檢測(cè)效能評(píng)價(jià) 以單純EH患者組和健康對(duì)照組為陰性對(duì)照組(n=105)，用ROC曲線評(píng)價(jià)檢測(cè)效能，見圖1，最佳截?cái)嘀狄?77.5 ng/ml為臨界值，AUC為0.971，敏感度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值和準(zhǔn)確性分別為85.3%(64/75)、97.1%(102/ 105)、95.5%(64/67)、90.3%(102/113)、92.2%(166/180)，顯示很好的檢測(cè)效能。

圖1 EH合并AS組與非AS組（單純EH和健康人群）ROC曲線分析

2.3 EH伴AS患者中各組血漿Lp-PLA2水平比較 無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組和不穩(wěn)定斑塊組血漿Lp-PLA2水平經(jīng)非參數(shù)檢驗(yàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U值分別為58.0、1.0、62.5，P均＜0.01)，見表2。且從無斑塊至穩(wěn)定性斑塊的出現(xiàn)到趨向不穩(wěn)定的程度，血漿Lp-PLA2水平隨之升高。

表2 EH伴頸動(dòng)脈硬化患者中各組別血漿Lp-PLA2水平比較[中位數(shù)(范圍)]

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化是引發(fā)心腦血管病變的重要危險(xiǎn)因素，研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性高血壓患者血壓變異性(BPV)是頸動(dòng)脈粥樣硬化的重要影響因素[3]。頸動(dòng)脈硬化的臨床診斷依賴頸動(dòng)脈B超檢測(cè)，特異性的實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)較少，國(guó)外已研究脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)作為炎性反應(yīng)介質(zhì)，具有促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化作用，可作為評(píng)估早期心腦血管疾病的預(yù)測(cè)及治療預(yù)后的重要指標(biāo)。

Lp-PLA2是由441個(gè)氨基酸殘基組成的一種絲氨酸脂酶，相對(duì)分子質(zhì)量為45.4 KU，是非鈣依賴的磷脂酶，主要由成熟的巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞合成和分泌，并受炎性介質(zhì)的調(diào)節(jié)[4]。血小板活化因子(PAF)具有促進(jìn)炎性介質(zhì)釋放的作用，從而發(fā)生炎癥反應(yīng)及血栓的形成。Lp-PLA2作為血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)，具有降解PAF作用，阻止PAF的炎癥活動(dòng)和血栓形成[5]，所以Lp-PLA2具有抗炎和抗AS作用。而在人類中只有大約10%的Lp-PLA2與HDL結(jié)合[6]，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明HDL-Lp-PLA2具有抗AS作用。同時(shí)，流行病學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2的活性與HDL呈明顯的負(fù)相關(guān)性[7]，但具體的機(jī)制還不清楚。

另一方面，目前研究較多的是Lp-PLA2與LDL結(jié)合從而促進(jìn)AS作用，結(jié)合在LDL上的Lp-PLA2隨LDL被運(yùn)送到了血管壁上易受損傷的區(qū)域，在LDL生成氧化磷脂之后，Lp-PLA2就迅速將其水解生成有生物活性的促炎物質(zhì)(lyso-PC和ox-NEFA)[8]，進(jìn)而刺激細(xì)胞因子產(chǎn)生如TNF-α和IL-6，增加斑塊內(nèi)炎癥反應(yīng)，而斑塊中的炎癥細(xì)胞又產(chǎn)生更多的Lp-PLA2，導(dǎo)致刺激斑塊的持續(xù)增長(zhǎng)，細(xì)胞因子和蛋白酶降解纖維帽的平滑肌細(xì)胞和膠原基質(zhì)，使斑塊變得脆弱、破裂和脫落，致使動(dòng)脈粥樣硬化，從而導(dǎo)致心腦血管疾病的發(fā)生。

在本研究中，血漿Lp-PLA2在EH伴發(fā)AS組中的水平顯著高于單純EH組和健康對(duì)照組，經(jīng)非參數(shù)Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果顯示，血漿Lp-PLA2具有血管炎癥特異性，提供動(dòng)脈粥樣斑塊炎癥及穩(wěn)定性的信息，在頸動(dòng)脈硬化診斷中有一定的特異性。臨床研究證實(shí)Lp-PLA2水平是獨(dú)立于傳統(tǒng)心血管危險(xiǎn)因子預(yù)測(cè)心血管事件的新的炎癥標(biāo)志物。因此，我們確定以單純EH組及健康對(duì)照組為非頸動(dòng)脈硬化組(n=105)，使用ROC曲線評(píng)價(jià)檢測(cè)效能，并確定臨界值為177.5 ng/ml(AUC為0.971)，可見，血漿Lp-PLA2水平對(duì)于EH患者頸動(dòng)脈硬化有很好的檢測(cè)效能。

研究根據(jù)患者斑塊顯示性質(zhì)分為無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組和不穩(wěn)定斑塊三組進(jìn)行血漿Lp-PLA2水平比較，經(jīng)非參數(shù)Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，三組間均顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊處存在大量Lp-PLA2，Lp-PLA2參與斑塊的形成和發(fā)展，從無斑塊至穩(wěn)定性斑塊的出現(xiàn)到趨向不穩(wěn)定的程度，血漿Lp-PLA2水平隨之升高。Lp-PLA2作為動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死的一個(gè)獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子已得到一些流行病學(xué)研究的證實(shí)[9-10]，其升高會(huì)增加缺血性卒中的風(fēng)險(xiǎn)。龍璐等[11]研究證實(shí)隨著Lp-PLA2的升高，急性缺血性腦卒中患者出現(xiàn)頸動(dòng)脈硬化斑塊的可能性逐漸增大，而且斑塊性質(zhì)從穩(wěn)定逐漸趨向不穩(wěn)定。此外，美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)和國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃提出，Lp-PLA2可以作為目前CHD最好的預(yù)測(cè)因子[12]，而國(guó)內(nèi)徐冬玲等[13]有研究認(rèn)為對(duì)冠心病患者Lp-PLA2檢測(cè)可輔助識(shí)別斑塊的穩(wěn)定程度及斑塊局部炎癥反應(yīng)的程度。由此可見，對(duì)于原發(fā)性高血壓這類心腦血管高危人群，隨著對(duì)Lp-PLA2生物學(xué)活性的深入闡明，檢測(cè)方法學(xué)的提高，Lp-PLA2對(duì)于其心腦血管疾病的早期的診斷和治療中的評(píng)估都有廣闊的應(yīng)用前景。

[1]Packard CJ,O'Reilly DS,Caslake MJ,et al.Lipoprotein-associated phospholipase A2as an independent predictor of coronary heart disease[J].N Engl J Med,2000,343(16):1148-1155.

[2]Oei HH,vander Meer IM,HofmanA.Lipoprotein-associated phospholipaseA2activity is associated with risk of coronary heart disease and ischemicstroke:theRotterdamStudy[J].Circulation,2005,5:570-575.

[3]徐 燕,王夢(mèng)琳,高旭光,等.原發(fā)性高血壓患者血壓變異性和頸動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2013,16(11):1206-1209.

[4]Stafforini DM.Biology of platelet-activating factor acetylhydrolace (PAF-AH,lipoprotein associated phospholipase A2)[J].Cardiovascular Drugs and Therapy,2009,23(1):73-83.

[5]Tselepis AD,John-Chapman M.Inflammation,bioactive lipids and atherosclerosis:potential roles of a lipoprotein-associated phospholipase A2,platelet activating factor-acetylhydrolase[J].Atherosclerosis,2002,4:57-68.

[6]Vinson A,Mahaney MC,Cox LA,et al.Apleiotropic QT Lon 2p influences serumLp-PLA2 activity and LDL cholesterol concentration in a baboon model for the genetics of atherosclerosis risk factors [J].Atherosclerosis,2008,196(2):667-673.

[7]Brilakis ES,Khera A,Mcguire DK,et al.Influence of race and sex on lipoproteinassociated phospholipase A2 levels:observations from the dallas heart study[J].Atherosclerosis,2008,199(1):110-115.

[8]Lavi S,Mc Connell JP,Rihal CS,et al.Localproduction of lipoprotein-associated phospholipase A2and lysophosphatidylcholine in the coronary circulation:association with early coronary atherosclerosis and endothelialdys-function in humans[J].Circulation,2007,115 (21):2715-2721.

[9]Oei HHS,van der Meer IM,Hofman A,et al.Lipoprotein associated phospholipase A2activity is associated with risk of coronary heart disease and ischemic stroke:the Rotterdam Study[J].Circulation,2005,111(5):570-575.

[10]Jenny NS,Solomon C,Cushman M.Lipoprotein-associated phospholipaseA(2)[J].Atheroclerosis,2010,2:528-532.

[11]龍 璐,王鐘明,陳 貞,等.急性缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平與頸動(dòng)脈硬化斑塊穩(wěn)定性及神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,28(10):885-889.

[12]蔡人權(quán),葉 平.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2對(duì)預(yù)測(cè)冠心病事件的臨床價(jià)值[J].放射免疫學(xué)雜志,2010,23(2):197-199.

[13]徐冬玲,劉軍妮,杜貽萌,等.脂蛋白相關(guān)磷脂酶與冠狀動(dòng)脈易損斑塊的相關(guān)性[J].中華內(nèi)科雜志,2009,48(8):651-654.

Correlation between lipoprotein-associated phospholipase A2 level and carotid atherosclerosis in patients with essential hypertension.

CHEN Shi-hao,TAN Bai-song,ZHANG Wei-jian.Department of Clinical Laboratory,Xinhui Hospital,Affiliated Hospital of Southern Medical University,Jiangmen 529100,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo study the correlation of lipoprotein associated phospholipase A2(Lp-PLA2)with carotid atherosclerosis(CAS)in patients with essential hypertension(EH).MethodsThe levels of Lp-PLA2 were measured by ELISA in 130 patients of EH(EH group)and 50 healthy subjects(healthy control group)．According to the results of cervical vascular color Doppler ultrasound examination,there were 75 patients with CAS in 130 patients with EH,and were classified into non-plaque group(18 cases),stable plaque group(32 cases)and unstable plaque group(25 cases).ResultsThe median value of Lp-PLA2 was higher in EH patients with CAS[258(98～589)ng/ml]than that in EH patients[102(59～195)ng/ml]and in control subjects[68(10～153)ng/ml](P＜0.01).The area under the ROC curve(AUC)was 0.971.When cutoff value of the Lp-PLA2 was 177.5 ng/ml,the diagnostic sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and accuracy rate were 85.3%(64/75),97.1%(102/105), 95.5%(64/67),90.3%(102/113),92.2%(166/180).The median value of Lp-PLA2 were 169(98～265)ng/ml, 249(145～364)ng/ml,372(259～589)in EH patients with CAS in non-plaque group,stable plaque group and unstable plaue group,respectively.There was statistically significant difference among the three groups.ConclusionLp-PLA2 detection has significance for prediction of early CAS in patients with EH,and can provide a positive reference value for early diagnosis and intervention of CAS.

Essential hypertension;Carotid atherosclerosis;Lipoprotein associated phospholipaseA2

R544.1

A

1003—6350（2015）03—0380—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.03.0136

2014-06-16)

陳世豪。E-mail：mandychen1999@163.com