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        不同質(zhì)量濃度低聚果糖和低聚半乳糖對(duì)發(fā)酵乳品質(zhì)的影響

        2015-03-17 05:36:22虞姣姣馬亞芳溫德蘭高貞旸唐為芷董明盛
        食品科學(xué) 2015年7期
        關(guān)鍵詞:低聚糖貯藏期

        虞姣姣,馬亞芳,溫德蘭,高貞旸,李 偉,唐為芷,董明盛*

        (南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇 南京 210095)

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        不同質(zhì)量濃度低聚果糖和低聚半乳糖對(duì)發(fā)酵乳品質(zhì)的影響

        虞姣姣,馬亞芳,溫德蘭,高貞旸,李 偉,唐為芷,董明盛*

        (南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇 南京 210095)

        摘 要:研究不同質(zhì)量濃度低聚果糖和低聚半乳糖對(duì)發(fā)酵乳在發(fā)酵期和貯藏期內(nèi)乳中菌落活菌數(shù)、滴定酸度和黏度的影響。結(jié)果表明:在發(fā)酵期低聚果糖(QHT-90 FOS)對(duì)發(fā)酵乳中乳酸菌活菌數(shù)的增殖作用要顯著高于低聚半乳糖(QHT-60 GOS),在QHT-90 FOS質(zhì)量濃度為1.5 g/100 mL的樣品中,12 h時(shí)瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)MB2-1活菌數(shù)可達(dá)到4.44×109CFU/g,而不同質(zhì)量濃度和結(jié)構(gòu)的低聚果糖和低聚半乳糖對(duì)樣品滴定酸度和黏度的影響差異不顯著;此外在4 ℃發(fā)酵乳貯藏期間,QHT-90 FOS對(duì)L. helveticus MB2-1有一定保護(hù)作用,在QHT-90 FOS質(zhì)量濃度為1.5 g/100 mL的樣品中,貯藏14 d后,活菌數(shù)僅減少11.90%,而滴定酸度基本不變,產(chǎn)品黏度保持在9 000 mPa·s。

        關(guān)鍵詞:低聚糖;發(fā)酵乳;發(fā)酵期;貯藏期

        發(fā)酵乳是新鮮牛奶經(jīng)乳酸菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)生乳酸而制成的乳制品[1-2]。發(fā)酵乳因其獨(dú)特的生理功能、均衡的營(yíng)養(yǎng)和美味倍受全球消費(fèi)者喜愛(ài),已成為乳制品中發(fā)展最快的產(chǎn)品[3-4]。乳酸菌具有提高牛奶營(yíng)養(yǎng)利用率,調(diào)節(jié)腸道菌群平衡,抑制腸道致病菌黏附和感染,增強(qiáng)機(jī)體免疫力,預(yù)防腫瘤發(fā)生,降低血清膽固醇水平等健康功效[5-8]。但由于發(fā)酵乳的生產(chǎn)較其他乳制品復(fù)雜、不易控制,現(xiàn)階段我國(guó)發(fā)酵乳的生產(chǎn)普遍存在發(fā)酵期乳酸菌活菌數(shù)低以及發(fā)酵乳在發(fā)酵貯藏過(guò)程中活菌會(huì)繼續(xù)代謝乳糖產(chǎn)生乳酸,產(chǎn)生后酸化現(xiàn)象,導(dǎo)致乳酸菌數(shù)量下降、乳清析出嚴(yán)重、入口質(zhì)感較差、不夠細(xì)膩等技術(shù)問(wèn)題,嚴(yán)重地制約了發(fā)酵乳的生產(chǎn)和消費(fèi)[9-10]。因此研究增加發(fā)酵期和貯藏期乳酸菌活菌數(shù),并能改善其口感,對(duì)于促進(jìn)我國(guó)發(fā)酵乳產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有十分重要的意義。

        近年來(lái)對(duì)不同因素對(duì)發(fā)酵乳發(fā)酵和貯藏期影響的研究較多,而不同質(zhì)量濃度和結(jié)構(gòu)的低聚糖對(duì)發(fā)酵乳發(fā)酵期和貯藏期的微生物和理化指標(biāo)影響的研究較少。如能將功能性低聚糖與發(fā)酵乳進(jìn)行有機(jī)結(jié)合,既能保留酸奶的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和獨(dú)特風(fēng)味,同時(shí)也強(qiáng)化了低聚糖的益生功能等特性,將非常適合現(xiàn)代人群的消費(fèi)需求。因此本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)研究不同結(jié)構(gòu)和質(zhì)量濃度的低聚糖對(duì)接種瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)MB2-1發(fā)酵乳發(fā)酵期和貯藏期中L. helveticus MB2-1活菌數(shù)、滴定酸度和黏度的影響,以期為減少發(fā)酵乳的后酸化和為發(fā)酵乳工業(yè)提供技術(shù)參考。

        1 材料與方法

        1.1材料與試劑

        1.1.1菌種

        高產(chǎn)黏L. helveticus MB2-1從新疆拜城縣傳統(tǒng)賽里木酸奶中分離得到,由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品微生物實(shí)驗(yàn)室提供[11]。

        1.1.2試劑與培養(yǎng)基

        低聚果糖(QHT-90 FOS)(純度≥90%)、低聚半乳糖(QHT-60 GOS)(純度≥60%)廣東江門(mén)量子高科生物股份有限公司饋贈(zèng);脫脂乳 南京衛(wèi)崗乳業(yè)有限公司;其他均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/p>

        MRS液體培養(yǎng)基:蛋白胨10.0 g、牛肉膏10.0 g、酵母膏5.0 g、葡萄糖20.0 g、吐溫-80 1.0 mL、無(wú)水乙酸鈉5.0 g、檸檬酸三銨2.0 g、K2HPO42.0 g、MgSO4·7H2O 0.58 g、MnSO4·4H2O 0.25 g,蒸餾水1 000 mL,pH 6.2~6.6,121 ℃滅菌20 min。MRS固體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基加入1.5%~2.0%瓊脂,121 ℃滅菌20 min。

        1.2儀器與設(shè)備

        AUY120島津分析天平日本Shimadzu公司;SL-N電子天平 上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司;手提式壓力蒸汽滅菌鍋上海三申醫(yī)療器械有限公司;Air Tech超凈工作臺(tái) 蘇凈集團(tuán)安泰公司;LRH系列生化培養(yǎng)箱上海一恒科技有限公司;NDJ-2系列數(shù)字式黏度計(jì)上海精天電子儀器有限公司。

        1.3方法

        1.3.1發(fā)酵期實(shí)驗(yàn)方法

        樣品配制:在含12 g/100 mL脫脂乳粉的牛奶中分別加入QHT-90 FOS、QHT-60 GOS和葡萄糖使其終質(zhì)量濃度為0.5、1.0、1.5 g/100 mL。滅菌(108 ℃、15 min)后分裝待用。

        發(fā)酵乳制備:將L. helveticus MB2-1從甘油管中接種活化后,按4 mL/100 mL接種至上述復(fù)原乳中,42 ℃恒溫培養(yǎng)。

        樣品指標(biāo)測(cè)定:發(fā)酵液在42 ℃條件下連續(xù)培養(yǎng)48 h,分別測(cè)定培養(yǎng)時(shí)間為0、4、8、12、24、48 h時(shí)樣品的各項(xiàng)指標(biāo)。

        菌落總數(shù)測(cè)定:依據(jù)GB 4789.35—2010《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 乳酸菌檢驗(yàn)》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

        黏度測(cè)定:25 ℃條件下取上述時(shí)間點(diǎn)的發(fā)酵乳100 mL,使用NDJ-2黏度計(jì)進(jìn)行測(cè)定,轉(zhuǎn)子根據(jù)酸奶黏度選擇3號(hào)轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)速6 r/min,當(dāng)扭矩?cái)?shù)值在20%~90%范圍內(nèi)測(cè)定的黏度值為有效值。

        滴定酸度測(cè)定:稱(chēng)取5.00 mL已攪拌均勻的樣品,置于150 mL錐形瓶中,加40 mL新煮沸冷卻至40 ℃的水,混勻后加入3 滴10 g/L酚酞指示劑,用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至為紅色在0.5 min內(nèi)不消失為終點(diǎn)。消耗的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液毫升數(shù)乘以20,即為酸度(°T)[12]。

        1.3.2貯藏期樣品指標(biāo)測(cè)定

        發(fā)酵乳制備:在含12 g/100 mL脫脂乳的牛奶中接種4 mL/100 mL的L. helveticus MB2-1,42 ℃恒溫培養(yǎng)7 h出現(xiàn)凝乳(視作發(fā)酵期結(jié)束,貯藏期開(kāi)始)。

        樣品制備:在上述發(fā)酵乳中添加QHT-90 FOS,使其終質(zhì)量濃度分別為:0.5、1.0、1.5 g/100 mL,其中以1.0 g/100 mL葡萄糖為對(duì)照組,4 ℃貯藏。

        樣品指標(biāo)測(cè)定:分別于0、3、7、14 d測(cè)定發(fā)酵乳L(zhǎng). helveticus MB2-1活菌數(shù)、滴定酸度和黏度(方法同1.3.1節(jié))。

        1.4統(tǒng)計(jì)方法

        數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)間的顯著性差異通過(guò)單因素方差分析(one-way analysis of variance,ANOVA)檢驗(yàn)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1發(fā)酵期產(chǎn)品微生物和理化指標(biāo)變化

        2.1.1QHT-90 FOS和QHT-60 GOS對(duì)發(fā)酵乳中活菌數(shù)的影響

        由圖1可知,不同結(jié)構(gòu)的低聚糖對(duì)發(fā)酵乳中L. helveticus MB2-1活菌數(shù)的增殖作用不同。其中不同質(zhì)量濃度的同種低聚糖對(duì)L. helveticus MB2-1增殖作用無(wú)顯著差異。0~8 h,樣品中L. helveticus MB2-1活菌數(shù)變化不顯著,超過(guò)8 h活菌數(shù)顯著增加,其中質(zhì)量濃度為1.5 g/100 mL QHT-90 FOS的樣品8 h時(shí)L. helveticus MB2-1活菌數(shù)為2.8×108CFU/g,12 h時(shí)達(dá)最大值4.44×109CFU/g。發(fā)酵時(shí)間超過(guò)12 h,樣品L. helveticus MB2-1活菌數(shù)都呈下降趨勢(shì)。隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),添加QHT-90 FOS和QHT-60 GOS的樣品中活菌數(shù)變化趨勢(shì)相似,但QHT-90 FOS實(shí)驗(yàn)組活菌數(shù)顯著高于同質(zhì)量濃度的對(duì)照組和QHT-60 GOS實(shí)驗(yàn)組。說(shuō)明QHT-90 FOS在發(fā)酵過(guò)程中相較于QHT-60 GOS和葡萄糖更易被L. helveticus MB2-1所利用[13]??赡艿脑蚴翘砑観HT-90 FOS可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被乳桿菌、雙歧桿菌等益生菌代謝[14-16]。

        圖1 QHT-90 FOS和QHT-60 GOS對(duì)發(fā)酵乳乳酸菌活菌數(shù)的影響Fig.1 Effect of QHT-90 FOS and QHT-60 GOS on the viable count of Lactobacillus helveticus MB2-1 in fermented milk

        2.1.2QHT-90 FOS和QHT-60 GOS對(duì)發(fā)酵乳滴定酸度的影響

        圖2 QHT-90 FOS和QHT-60 GOS對(duì)發(fā)酵乳滴定酸度的影響Fig.2 Effect of QHT-90 FOS and QHT-60 GOS on the titratable acidity of fermented milk

        由圖2可知,隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),樣品的滴定酸度均增加。其中0~8 h滴定酸度增加顯著,超過(guò)8 h增加趨勢(shì)趨于平緩。而且不同質(zhì)量濃度的QHT-90 FOS、QHT-60 GOS和葡萄糖的發(fā)酵乳中滴定酸度無(wú)顯著差異。添加QHT-90 FOS的發(fā)酵乳滴定酸度最大,且QHT-90 FOS質(zhì)量濃度不同,發(fā)酵乳滴定酸度差異不顯著。說(shuō)明QHT-90 FOS促進(jìn)L. helveticus MB2-1的生長(zhǎng),使發(fā)酵乳產(chǎn)酸增加。

        2.1.3 QHT-90 FOS和QHT-60 GOS對(duì)發(fā)酵乳黏度的影響

        圖3 QHT-90 FOS和QHT-60 GOS對(duì)發(fā)酵乳黏度的影響Fig.3 Effect of QHT-90 FOS and QHT-60 GOS on the viscosity of fermented milk

        由圖3可知,隨著發(fā)酵的進(jìn)行,樣品黏度均顯著增加。發(fā)酵時(shí)間超過(guò)24 h,1.0 g/100 mL和1.5 g/100 mL的低聚糖樣品黏度較同質(zhì)量濃度葡萄糖樣品的黏度大,其可能原因?yàn)椋篖. helveticus MB2-1能夠利用發(fā)酵性糖類(lèi)產(chǎn)生胞外多糖,其中包括黏附于細(xì)胞表面的莢膜多糖和黏液多糖而促進(jìn)產(chǎn)黏[17-18],這與本實(shí)驗(yàn)測(cè)定L. helveticus MB2-1活菌數(shù)結(jié)果一致。也有研究指出添加低聚糖有利于水合作用而增加發(fā)酵乳的黏度[19-20]。

        2.2貯藏期實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

        由上述結(jié)果可知在發(fā)酵期QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳均產(chǎn)生有利影響。為進(jìn)一步研究QHT-90 FOS在貯藏期對(duì)發(fā)酵乳品質(zhì)的影響,在發(fā)酵完成的發(fā)酵乳中添加QHT-90 FOS使其終質(zhì)量濃度分別為0.5、1.0、1.5 g/100 mL,并以終質(zhì)量濃度為1.0 g/100 mL的葡萄糖為對(duì)照,置于4 ℃冰箱內(nèi)貯藏并分別在3、7、14 d時(shí)測(cè)定樣品中L. helveticus MB2-1活菌數(shù)、滴定酸度和黏度,結(jié)果如圖4~6所示。

        2.2.1 不同質(zhì)量濃度的QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳中L. helveticus MB2-1活菌數(shù)的影響

        圖4 不同質(zhì)量濃度QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳乳酸菌活菌數(shù)的影響

        Fig.4 Effect of QHT-90 FOS with different concentrations on the viable count of Lactobacillus helveticus MB2-1 in fermented milk

        由圖4可知,貯藏期0~3 d內(nèi)L. helveticus MB2-1活菌數(shù)顯著減少,超過(guò)3 d活菌數(shù)減少趨勢(shì)減緩。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在貯藏3 d時(shí)活菌數(shù)均能維持在3×107CFU/g左右。對(duì)照組在貯藏超過(guò)3 d后,活菌數(shù)減少了32.20%;而添加質(zhì)量濃度為1.5 g/100 mL的QHT-90 FOS的實(shí)驗(yàn)組活菌數(shù)僅減少11.90%,由此可知在0~14 d貯藏期內(nèi)QHT-90 FOS對(duì)L. helveticus MB2-1有一定保護(hù)作用,能夠保護(hù)L. helveticus MB2-1的正常生長(zhǎng),減緩L. helveticus MB2-1的死亡。在一定范圍內(nèi),質(zhì)量濃度越高的QHT-90 FOS對(duì)L. helveticus MB2-1的保護(hù)作用效果越明顯。

        2.2.2不同質(zhì)量濃度的QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳滴定酸度的影響

        酸奶的貯藏期中,一方面要通過(guò)生產(chǎn)設(shè)備、生產(chǎn)工藝及衛(wèi)生條件的改善,防止酵母菌、霉菌污染而造成酸奶脹袋;另一方面要注意酸奶的后酸化[21]。后酸化不僅會(huì)使發(fā)酵乳酸度增加,影響其口感和風(fēng)味,而且還會(huì)導(dǎo)致過(guò)量的乳清析出及乳酸菌無(wú)法適應(yīng)過(guò)酸的環(huán)境而大量死亡。

        圖5 不同質(zhì)量濃度QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳滴定酸度的影響Fig.5 Effect of QHT-90 FOS with different concentrations on the titratable acidity of fermented milk

        由圖5可知,添加QHT-90 FOS的發(fā)酵乳在貯藏期對(duì)發(fā)酵乳滴定酸度有顯著影響。質(zhì)量濃度不同的QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳滴定酸度的影響不同。其中滴定酸度變化最顯著的是對(duì)照組,滴定酸度增加了19.51%;質(zhì)量濃度為0.5 g/100 mL的QHT-90 FOS實(shí)驗(yàn)組,滴定酸度減小了4.18%;1.0 g/100 mL的QHT-90 FOS實(shí)驗(yàn)組,滴定酸度減小了3.37%。與0.5 g/100 mL和1.0 g/100 mL實(shí)驗(yàn)組的結(jié)果不同,在貯藏期間1.5 g/100 mL的QHT-90 FOS實(shí)驗(yàn)組滴定酸度增加了18.04%。這一結(jié)果在生產(chǎn)實(shí)際中具有重大意義,添加適宜質(zhì)量濃度的QHT-90 FOS可以有效降低滴定酸度,減緩后酸化對(duì)酸奶風(fēng)味的影響,但在添加QHT-90 FOS時(shí)要嚴(yán)格控制質(zhì)量濃度,QHT-90 FOS質(zhì)量濃度過(guò)低可能達(dá)不到降低酸度的效果,而質(zhì)量濃度過(guò)高,不僅造成發(fā)酵成本增加而且還會(huì)使發(fā)酵乳的酸度增加。

        2.2.3 不同質(zhì)量濃度QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳黏度的影響

        由圖6可知,在含有質(zhì)量濃度不同的QHT-90 FOS樣品中,黏度呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。添加QHT-90 FOS的樣品貯藏期前3 d黏度顯著上升,超過(guò)3 d黏度緩慢下降。與實(shí)驗(yàn)組不同的是,對(duì)照組黏度在7 d時(shí)達(dá)最大值。而且樣品黏度與QHT-90 FOS質(zhì)量濃度關(guān)系不顯著,可能的原因是高質(zhì)量濃度低聚糖促進(jìn)L. helveticus MB2-1的生長(zhǎng),使活菌數(shù)增多,低聚糖消耗后會(huì)消耗自身多糖使樣品黏度降低;低質(zhì)量濃度低聚糖的樣品中活菌數(shù)少,低聚糖消耗少,不消耗自身多糖。由此可知添加適宜質(zhì)量濃度的QHT-90 FOS能夠達(dá)到較好地保持發(fā)酵乳黏度的效果。

        圖6 不同質(zhì)量濃度QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳黏度的影響Fig.6 Effect of QHT-90 FOS with different concentrations on the viscosity of fermented milk

        3 結(jié) 論

        不同質(zhì)量濃度和結(jié)構(gòu)的低聚糖對(duì)發(fā)酵乳在發(fā)酵期和貯藏期內(nèi)乳菌落活菌數(shù)、滴定酸度和黏度的影響結(jié)果表明,QHT-90 FOS在發(fā)酵期和貯藏期對(duì)發(fā)酵乳均有顯著有利影響,發(fā)酵期中QHT-90 FOS能夠促進(jìn)L. helveticus MB2-1生長(zhǎng),在添加1.5 g/100 mL QHT-90 FOS的樣品中,12 h時(shí)L. helveticus MB2-1活菌數(shù)可達(dá)到4.44×109CFU/g;在4 ℃貯藏條件下發(fā)酵乳中質(zhì)量濃度為1.5 g/100 mL的QHT-90 FOS對(duì)發(fā)酵乳的品質(zhì)可產(chǎn)生有利作用,能夠保護(hù)L. helveticus MB2-1的存活,減緩其衰亡,緩解發(fā)酵乳的后酸化和增加產(chǎn)品黏度。

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        Effects of Fructooligosaccharide and Galactooligosaccharide at Different Concentrations on the Quality of Fermented Milk

        YU Jiaojiao, MA Yafang, WEN Delan, GAO Zhenyang, LI Wei, TANG Weizhi, DONG Mingsheng* (
        College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)

        Abstract:This work studied the effects of fructooligosaccharide (QHT-90 FOS) and galactooligosaccharide (QHT-60 GOS) with various concentrations on the viable count of Lactobacillus helveticus MB2-1, titratable acidity and viscosity of fermented milk during fermentation and storage. The results showed that QHT-90 FOS had a better ability to increase the proliferation of Lactobacillus in fermented milk than QHT-60 GOS. When the concentration of QHT-90 FOS was 1.5 g/100 mL in 12-hour fermented milk, the viable count of L. helveticus MB2-1 reached 4.44 × 109CFU/g. Oligosaccharides with different structures had similar effects on titratable acidity and viscosity of different samples. QHT-90 FOS had the ability to protect L. helveticus MB2-1. Under the storage condition of 4 ℃, the viable count of L. helveticus MB2-1 decreased by only 11.90%. After 14 days of storage, the titratable acidity remained unchanged, and the viscosity stayed at a high level of 9 000 mPa·s.

        Key words:oligosaccharides; fermented milk; fermentation period; storage period

        doi:10.7506/spkx1002-6630-201507013

        中圖分類(lèi)號(hào):TS201.3

        文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

        文章編號(hào):1002-6630(2015)07-0066-05

        *通信作者:董明盛(1961—),男,教授,博士,研究方向?yàn)槭称肺⑸锱c生物技術(shù)。E-mail:dongms@njau.edu.cn

        作者簡(jiǎn)介:虞姣姣(1994—),女,本科,研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)、食品微生物。E-mail:18211233@njau.edu.cn

        基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31201422);國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31371807);國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)項(xiàng)目(2011AA100903);“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAD18B01-4);江蘇省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(BK2011651);教育部博士點(diǎn)基金項(xiàng)目(新教師類(lèi))(20110097120028);南京農(nóng)業(yè)大學(xué)SRT計(jì)劃項(xiàng)目(1318A07)

        收稿日期:2014-03-31

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