朱美抒　劉海燕　朱美慧

(1.深圳市第二人民醫(yī)院燒傷整形科, 廣東 深圳 518000；2.深圳美源醫(yī)療美容門診部， 廣東 深圳 518000)

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降鈣素原動(dòng)態(tài)檢測(cè)對(duì)體表慢性潰瘍患者感染診斷及預(yù)后的判斷價(jià)值*

朱美抒1劉海燕1朱美慧2

(1.深圳市第二人民醫(yī)院燒傷整形科, 廣東 深圳 518000；2.深圳美源醫(yī)療美容門診部， 廣東 深圳 518000)

【摘要】目的探討血清降鈣素原(procacitonin, PCT)動(dòng)態(tài)檢測(cè)對(duì)慢性潰瘍患者感染診斷及預(yù)后的判斷價(jià)值。方法對(duì)收治的368例慢性潰瘍患者，采集血液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，采用雙抗體夾心法檢測(cè)血清中PCT含量，并對(duì)其臨床資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果血培養(yǎng)的陽性率為37.50%(138/368)，PCT的陽性率為46.47%(171/368)。PCT診斷以0.5 ng/ml為陽性閾值，其敏感性和特異性分別為90.76%(334/368)和72.55%(267/368)，陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為60.82%(104/171)和82.74%(163/197)；且血清中PCT含量較高的患者預(yù)后情況較差(P<0.05)。結(jié)論血清降鈣素原水平對(duì)慢性潰瘍患者的診斷及預(yù)后的判斷具有一定的臨床價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】降鈣素原； 慢性潰瘍； 感染； 診斷； 預(yù)后

體表慢性潰瘍是外科臨床的常見病、多發(fā)病，主要由手術(shù)、燒傷及長(zhǎng)期壓迫等引起局部血液循環(huán)障礙、缺血、缺氧或局部皮膚營(yíng)養(yǎng)障礙所致。慢性潰瘍創(chuàng)面的愈合受到多種細(xì)胞外基質(zhì)、可溶性介質(zhì)、細(xì)胞因子的影響，創(chuàng)面感染是影響體表慢性潰瘍創(chuàng)面愈合的一個(gè)重要因素。降鈣素原(PCT)是由116個(gè)氨基酸構(gòu)成的分子量約為13kD的蛋白。血清降鈣素原被證實(shí)在多種感染性疾病中含量增加，可作為膿毒血癥及全身性炎癥反應(yīng)綜合征的標(biāo)志物，與C-反應(yīng)蛋白和白介素-6相比，具有一定的優(yōu)越性[1~4]。本研究通過檢測(cè)體表慢性潰瘍患者外周血PCT水平，探討其在慢性潰瘍患者感染診斷及預(yù)后中的價(jià)值。

1資料和方法

1.1臨床資料選擇2010年8月~2013年7月來我院就醫(yī)的368例懷疑有局部感染或全身感染的體表慢性潰瘍患者為研究對(duì)象，男212例，女156例，年齡27~73歲，平均47.8歲；其中靜脈性潰瘍128例，燒傷性潰瘍131例，糖尿病潰瘍53例，外傷性潰瘍56例。所有患者均知情同意，進(jìn)行常規(guī)治療。

1.2檢測(cè)方法所有慢性潰瘍患者入院當(dāng)天抽取靜脈血 3 ml，樣本量置入肝素真空抗凝管中，室溫3000 r/min離心15 min，取上清液，-80℃冰箱保存待測(cè)。采用雙抗體夾心法檢測(cè)血清中降鈣素原含量，降鈣素原ELISA試劑盒購(gòu)自法國(guó)梅里埃有限公司。使用前將所有試劑充分混勻，盡量避免氣泡的產(chǎn)生，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、空白孔和樣本都設(shè)置復(fù)孔；標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1∶1稀釋后加入50 μl于反應(yīng)孔內(nèi)；依次加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50 μl和待測(cè)樣品50 μl于反應(yīng)孔內(nèi)，立即加入50 μl的生物素標(biāo)記的抗體；蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃孵育1小時(shí)；甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，洗滌3次；每孔加入80 μl的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘；甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，洗滌3次；每孔加入底物A、B各50 μl，輕輕振蕩混勻，37℃避光孵育10分鐘；取出酶標(biāo)板，迅速加入50 μl終止液，立即使用法國(guó) mini VIDAS 熒光免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。PCT 參考范圍設(shè)定為 <0.5 ng/ml，>0.5 ng/ml判斷為陽性。同時(shí)以無菌操作抽取全血注入血培養(yǎng)瓶中，置于法國(guó)梅里埃公司Bact/Alert-240血培養(yǎng)儀中培養(yǎng)，并對(duì)樣品進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測(cè)。痰液、創(chuàng)面分泌物標(biāo)本分別接種于血培養(yǎng)基作常規(guī)培養(yǎng)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1慢性潰瘍患者與對(duì)照組PCT水平比較在368例慢性潰瘍患者中，血培養(yǎng)陽性率為37.50%，PCT的陽性率為46.47%。以PCT>0.5 ng/ml為陽性標(biāo)準(zhǔn)，其診斷的敏感性和特異性分別為90.76%和72.55%，陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為60.82%和82.74%，見表1。

表1368例慢性潰瘍患者血培養(yǎng)與血清PCT檢測(cè)結(jié)果 (n)

Table 1Results of blood culture and PCT in 368 patients with chronic ulcer

PCT血培養(yǎng)陽性陰性總數(shù)陽性10467171陰性34163197總數(shù)138230368

2.2病原菌種類與PCT水平分析血培養(yǎng)和PCT雙陽性的患者共104例，根據(jù)感染病原菌將患者分為：革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、真菌和混合四類，分別為23、40、13、和 28例，各類感染中PCT水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)，見表2。

表2　病原菌種類與PCT水平分析

2.3PCT水平與慢性潰瘍患者預(yù)后分析在171例PCT陽性的患者中，PCT>20 ng/ml的患者92例，潰瘍創(chuàng)面愈合時(shí)間(26.37±6.04)天；PCT<20 ng/ml的患者79例，創(chuàng)面愈合時(shí)間為(14.48±3.21)天，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血清PCT水平較高的慢性潰瘍患者預(yù)后較差。

3討論

降鈣素原(PCT)發(fā)現(xiàn)于1989年，是人類降鈣素(Calcitonin, CT)的前體物質(zhì)，由11號(hào)染色體上的Calc-1基因編碼轉(zhuǎn)錄而成，無激素活性，半衰期為25~30小時(shí)[5]。在正常生理?xiàng)l件下，PCT 由甲狀腺濾泡旁C 細(xì)胞分泌，在血液中含量低于0.05 ng/mL，在機(jī)體受到感染時(shí)，PCT可由多種組織器官分泌，PCT向降鈣素的轉(zhuǎn)化也受到炎性細(xì)胞因子抑制，大量釋放，致使血液中PCT水平大幅增加。機(jī)體感染后3小時(shí)PCT水平就開始升高，24小時(shí)達(dá)到平臺(tái)期。大量體內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α等炎性介質(zhì)或者微生物感染均能夠引起PCT水平迅速增加，并且與感染程度呈正相關(guān)，抗生素治療后血清PCT迅速下降[6~8]。目前，PCT已成為膿毒癥、急性肺炎、器官移植后感染、慢性重型乙型肝炎、胰腺炎等感染的早期診斷的指標(biāo)[9~12]。

目前針對(duì)PCT的臨床研究采用的檢驗(yàn)方法與研究對(duì)象不同，不同組織器官感染的臨界值、敏感性和特異性方面也存在差異。筆者在368例慢性體表潰瘍患者中的研究發(fā)現(xiàn)，PCT的陽性率為46.47%，以PCT>0.5 ng/ml為陽性標(biāo)準(zhǔn)，其敏感性和特異性分別為90.76%和72.55%，陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為60.82%和82.74%，提示PCT也可作為慢性潰瘍感染的診斷依據(jù)。但是革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、真菌和混合感染組PCT水平無明顯差異(P>0.05)，提示PCT不能鑒別感染菌的種類，這與張有江[13]等人在血液感染中的研究結(jié)果一致，這也可能是由于本研究樣本量較小所致。PCT高表達(dá)的患者潰瘍創(chuàng)面愈合時(shí)間(26.37±6.04天)，比PCT低表達(dá)的患者創(chuàng)面愈合時(shí)間(14.48±3.21天)長(zhǎng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明血清PCT含量可能與慢性潰瘍感染患者的預(yù)后相關(guān)。

4結(jié)論

本研究結(jié)果表明，血清降鈣素原水平對(duì)體表慢性潰瘍患者的診斷及預(yù)后判斷具有一定的臨床價(jià)值。采用雙抗體夾心法檢測(cè)PCT水平特異性和靈敏度高。但感染后血液中急劇增加的PCT確切產(chǎn)生部位和機(jī)制還不清楚，PCT能否代替血培養(yǎng)、WBC等手段作為慢性潰瘍患者感染診斷及預(yù)后的重要指標(biāo)，還有待更系統(tǒng)的深入研究。

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The value of PCT for diagnosis and prognosis of infections in patients with chronic ulcer

ZHU Mei-shu1, LIU Hai-yan1, ZHU Mei-hui2

(1.ShenzhenSecondPeople'sHospital,Shenzhen518000,Guangdong;2.ShenzhenMeiyuanMedicalCosmeticClinic,Shenzhen518000,Guangdong)

【Abstract】ObjectiveTo explore the clinical significance of serum procacitonin (PCT) level for diagnosis and prognosis of infections in patients with chronic ulcer. Methods368 chronic ulcer patients were collected. Blood of patients was collected for bacterial culture and PCT detection by double antibody clip method and their clinical data were retrospectively analyzed. ResultsAmong 368 cases, the positive rate of blood culture and PCT was 37.50% (138/368) and 46.47% (171/368). The level of PCT in serum higher than 0.5 ng/mL was judged as positive, the sensitivity and specificity was 90.76% (334/368) and 72.55% (267/368) respectively, positive and negative predictive value was 60.82% (104/171) and 82.74% (163/197) respectively. The poorer prognosis was observed in patients with higher levels of PCT (P<0.05). ConclusionThe level of procacitonin in serum can provide certain basis for diagnosis and prognosis of infections in patients with chronic ulcer.

【Key words】Procacitonin; Chronic ulcer; Infection; Diagnosis; Prognosis

(收稿日期：2014-03-03； 編輯： 陳舟貴)

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金(81301642)

【中圖分類號(hào)】R 632.1

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

doi：10.3969/j.issn.1672-3511.2015.01.010