董孟權(quán)，楊麗英

(河北省唐山市豐南區(qū)醫(yī)院頭頸外科 063300)

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·論 著·

RRBP1在早期發(fā)現(xiàn)甲狀腺微小癌中的診斷意義

董孟權(quán)，楊麗英

(河北省唐山市豐南區(qū)醫(yī)院頭頸外科 063300)

目的 觀察核糖體結(jié)合蛋白1(RRBP1)在早期發(fā)現(xiàn)甲狀腺微小癌中的診斷意義。方法 收集60例甲狀腺微小癌、50例甲狀腺瘤及50例健康者的靜脈血標(biāo)本，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(QRT-PCR)檢測(cè)RRBP1的表達(dá)，并分析RRBP1在甲狀腺微小癌中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 RRBP1在甲狀腺微小癌中的表達(dá)明顯高于甲狀腺瘤及健康者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；同時(shí)，RRBP1在甲狀腺瘤中的表達(dá)也明顯高于健康者(P<0.05)。此外，RRBP1在甲狀腺癌患者中的表達(dá)與腫瘤大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(P<0.05)，而與患者的年齡、性別、吸煙史、腫瘤的好發(fā)部位無(wú)明顯相關(guān)。結(jié)論 RRBP1表達(dá)與甲狀腺微小癌的發(fā)生相關(guān)，其表達(dá)的檢測(cè)有助于甲狀腺微小癌的診斷。

甲狀腺微小癌； 核糖體結(jié)合蛋白1； 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)； 臨床病理特征

甲狀腺微小癌性的病灶微小，發(fā)病隱匿，無(wú)明顯的臨床表現(xiàn)，往往不容易被診斷[1-3]。近年來(lái)，研究表明分子標(biāo)記物的檢測(cè)有助于甲狀腺微小癌的診斷[4-5]。核糖體結(jié)合蛋白(RRBP1)為一種粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白，近年來(lái)研究表明其表達(dá)與多種惡性腫瘤的發(fā)生相關(guān)[6-8]，然而其表達(dá)與甲狀腺微小癌的關(guān)系尚不明確。本研究檢測(cè)了不同甲狀腺病變患者中RRBP1的表達(dá)，以評(píng)估RRBP1的檢測(cè)對(duì)甲狀腺微小癌的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年1月至2014年12月本院穿刺或術(shù)后病理診斷確診為乳頭狀甲狀腺微小癌患者60例。其中，男22例，女38例，年齡38～69歲，平均45.7歲；吸煙史18例，無(wú)吸煙史42例；腫瘤直徑小于0.5 cm 21例，直徑大于或等于0.5 cm 39例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移11例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移49例；癌位于單側(cè)甲狀腺47 例，位于雙側(cè)13例。另選同期經(jīng)穿刺或術(shù)后病理確診為甲狀腺瘤50例，男24例，女26例，年齡32～56歲，平均40.2歲。健康者來(lái)源于本院健康查體者，男25例，女25例，年齡36～58歲，平均45.5歲。各組研究對(duì)象一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(QRT-PCR) 依據(jù)試劑盒的操作步驟嚴(yán)格進(jìn)行，患者的血液標(biāo)本收集后，采用Trizol法提取RNA，以生物分光光度計(jì)測(cè)定RNA濃度，反轉(zhuǎn)錄試劑盒(AppliedBiosystems，USA)將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，于熒光定量PCR儀 (美國(guó)Bio-Rad公司)檢測(cè)RRBP1的表達(dá)，以GAPDH作為內(nèi)參。采用Folds=2-ΔΔCt計(jì)算RRBP1在不同組表達(dá)的倍比關(guān)系，其中計(jì)算公式為ΔΔCt=[Ct(目的基因)-Ct(GAPDH)]實(shí)驗(yàn)組-[Ct(目的基因)-Ct(GAPDH)]對(duì)照組。其中RRBP1的引物序列為5′-AGTTCGGACCAG GTGAGGGAGCAC-3′，5′-GCGTCTTCAGCTGAACGGGGTCCT-3′,內(nèi)參GAPDH的引物序列為5′-CTGAACGGGAAGCTCACTGG-3′，5′-TGAGGTCCACCACCCTGTTG-3′。

2 結(jié) 果

2.1 RRBP1在甲狀腺微小癌、甲狀腺瘤及正?；颊咧械谋磉_(dá) QRT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示RRBP1在甲狀腺微小癌、甲狀腺瘤及健康者中的相對(duì)表達(dá)值分別為8.92±2.12、5.23±1.98、3.25±1.04，組內(nèi)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。其中，RRBP1在甲狀腺微小癌中的表達(dá)明顯高于甲狀腺瘤 (P<0.05)及健康者(P<0.01)，同時(shí)RRBP1在甲狀腺瘤中的表達(dá)也明顯高于健康者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖1。

2.2 RRBP1在甲狀腺癌中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 分析RRBP1在甲狀腺癌患者中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系，結(jié)果表明RRBP1在甲狀腺癌組織中的表達(dá)與腫瘤的直徑及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)，而與患者的年齡、性別、吸煙史及腫瘤的好發(fā)部位無(wú)明顯相關(guān)。見(jiàn)表1。

圖1 QRT-PCR檢測(cè)RRBP1在甲狀腺微小癌、甲狀腺瘤及健康者中的表達(dá)

臨床病理特征nRRBP1相對(duì)表達(dá)值P年齡(歲)<45329．52±1．680．755≥45288．32±1．86性別男388．39±1．780．778女229．45±1．83吸煙史有189．78±1．770．596無(wú)428．06±1．82腫瘤直徑(cm)<0．5217．62±1．620．004≥0．53910．22±1．42好發(fā)部位單側(cè)479．12±1．850．875雙側(cè)138．72±1．79淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有1111．32±1．620．000無(wú)496．52±1．54

3 討 論

近年來(lái)，分子標(biāo)記物的檢測(cè)在腫瘤的早期診斷中發(fā)揮著重要作用。文獻(xiàn)[4]發(fā)現(xiàn)分子標(biāo)記物的檢測(cè)有助于區(qū)分甲狀腺微小癌及良性病變。Marchetti等[5]發(fā)現(xiàn)通過(guò)檢測(cè)BRAF在甲狀腺活檢組織中的突變有助于甲狀腺微小癌的診斷。其中，RRBP1為一種粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白，在核糖體結(jié)合及新生蛋白跨膜易位過(guò)程中的發(fā)揮重要作用[9-11]。研究發(fā)現(xiàn)RRBP1不僅高表達(dá)癌細(xì)胞系，在乳腺癌[6]、肺癌[7]及結(jié)直腸癌組織[8]中均發(fā)現(xiàn)了其高表達(dá)，提示RRBP1為腫瘤發(fā)生相關(guān)的癌基因。然而，RRBP1是否高表達(dá)于甲狀腺癌，是否有助于甲狀微小癌的鑒別診斷，有待進(jìn)一步研究。

本研究結(jié)果表明，RRBP1在甲狀腺微小癌中的表達(dá)明顯高于甲狀腺瘤及健康者，同時(shí)RRBP1在甲狀腺瘤中的表達(dá)也明顯高于健康者，提示RRBP1的表達(dá)可能與甲狀腺微小癌的發(fā)生有關(guān)，其表達(dá)的檢測(cè)有助于區(qū)分甲狀微小癌、甲狀腺瘤及健康者。此外，結(jié)果也顯示RRBP1在甲狀腺微小癌中的表達(dá)與腫瘤直徑及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)；腫瘤瘤直徑大于或等于0.5 cm患者中RRBP1的表達(dá)明顯高于直徑小于0.5 cm患者中的表達(dá)，淋巴結(jié)患者中RRBP1的表達(dá)也明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的表達(dá)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示RRBP1的表達(dá)可能與甲狀腺癌細(xì)胞的增殖及侵襲相關(guān)，其表達(dá)的檢測(cè)有助于判別甲狀腺微小癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的潛能。因此，本文認(rèn)為RRBP1可能為甲腺狀微小癌發(fā)生相關(guān)的新型分子標(biāo)記物，其表達(dá)的檢測(cè)有助于甲狀腺微小癌的早期診斷。

然而，目前關(guān)于RRBP1在健康者中的表達(dá)量，尚無(wú)參考標(biāo)準(zhǔn)，不能確定RRBP1表達(dá)的臨界值以明確區(qū)分甲狀腺微小癌、甲狀腺瘤及健康者，大樣本量的深入研究將具有重要的臨床意義。此外，關(guān)于RRBP1在甲狀腺微小癌的發(fā)生、發(fā)展中的生物學(xué)功能及其作用機(jī)制仍不清楚。其中，Tsai等[7]研究發(fā)現(xiàn)RRBP1的高表達(dá)可增強(qiáng)抗凋亡蛋白GRP78的表達(dá)，抑制肺癌細(xì)胞的凋亡，進(jìn)而促進(jìn)其生長(zhǎng)。RRBP1高表達(dá)于甲狀腺微小癌是否與其調(diào)控GRP78相關(guān)，仍有待于后續(xù)研究證實(shí)。

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Diagnostic significance of RRBP1 in early detection of thyroid microcarcinoma

DONGMeng-quan,YANGLi-ying

(FengnanDistrictHospital,Tangshan,Hebei063300,China)

Objective To investigate the diagnostic significance of ribosome binding protein 1 (RRBP1) in the early detection of thyroid microcarcinoma.Methods QRT-PCR was used to detect the expression of RRBP1 in blood samples collected from 60 patients with thyroid microcarcinoma,50 patients with thyroid neoplasm and 50 healthy people.Meanwhile,the relationship between RRBP1 expression and clinicopathological characteristics in thyroid microcarcinoma was analyzed.Results RRBP1 expression in thyroid microcarcinoma was significantly higher than that in thyroid neoplasm and healthy people,the difference was statistically significant (P<0.05).Meanwhile,RRBP1 expression in thyroid neoplasm was significantly higher than that in healthy people (P<0.05).Moreover,RRBP1 expression in thyroid microcarcinoma was significantly correlated with the tumor size and lymph node metastasis(P<0.05),but had no obvious correlation with the age,sex,smoking history,tumor predilection locations.Conclusion RRBP1 expression is associated with the occurrence of thyroid microcarcinoma and its detection may be beneficial for the diagnosis of thyroid microcarcinoma.

thyroid microcarcinoma; RRBP1; QRT-PCR; clinicopathological characteristics

董孟權(quán)，男，本科，主治醫(yī)師,主要從事頭頸外科工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.14.044

A

1672-9455(2015)14-2078-02

2015-02-20

2015-04-10)