杜 偉，張 彬，溫黎明，李金源(河北聯(lián)合大學口腔醫(yī)學院，河北唐山 063000)

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微種植體支抗負載對妊娠大鼠雌激素和孕激素的影響

杜 偉，張 彬△，溫黎明，李金源(河北聯(lián)合大學口腔醫(yī)學院，河北唐山 063000)

目的 建立妊娠大鼠模型，探討正畸微種植體支抗負載對妊娠大鼠孕激素、雌激素的影響。方法 30只雌性大鼠分為正常組、妊娠組、妊娠加力組，左側脛骨植入微種植體2枚，腹主動脈采血檢測孕激素、雌激素，同時檢測右側脛骨骨密度。結果 妊娠組、妊娠加力組大鼠雌激素水平高于正常組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；孕激素水平高于正常組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；妊娠組大鼠骨密度低于正常組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 妊娠階段施加60 g正畸輕力時大鼠雌激素、孕激素會稍有下降，妊娠階段骨密度下降。

妊娠大鼠； 微種植體支抗； 雌激素； 孕激素； 骨密度

雌激素、孕激素有維持妊娠的重要作用，隨著正畸治療期間妊娠患者數量的增加，對妊娠患者適宜施加多少克的力值，并對兩種激素產生多大的影響國內外已有報道，但多為臨床報道。本研究在動物試驗的基礎上研究妊娠期間微種植體支抗加力對雌激素、孕激素的影響，為臨床妊娠患者正畸治療提供理論依據，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物與材料 健康成年雌性Wistar大鼠30只，雄性大鼠5只，體質量200～220 g，SPF級(北京維通利華實驗動物技術有限公司提供)動物許可證號：SCXK(京)2007-0001。材料：60枚微型鈦合金螺釘(寧波慈北醫(yī)療器械有限公司)直徑1.6 mm，長度8.0 mm。

1.2 方法

1.2.1 微種植體支抗的植入 所有大鼠SPF環(huán)境飼養(yǎng)，自由進食與飲水。大鼠適應性飼養(yǎng)1周后，分為3組：正常組、妊娠組、妊娠加力組，每組10只雌性大鼠，各組大鼠分別用10%水合氯醛(3 mL/kg)腹腔注射麻醉，麻醉后固定，暴露左側脛骨骨面后在脛骨近、遠兩端各植入1枚種植釘，檢查種植體植入到位后，逐層嚴密縫合肌層與皮層，拍X線片觀察種植釘植入情況(圖1、2)，術后硫酸慶大霉素抗感染[2.5 mg/(kg·d)]治療3 d。

1.2.2 妊娠大鼠動物模型的建立 所有大鼠植入種植體，種植體無明顯松動及脫落，種植體周圍無紅腫，視為傷口愈合好。采用陰道涂片法確定大鼠的動情周期，將處于發(fā)情前期處女鼠與雄性大鼠進行同籠飼養(yǎng)(1∶1)，以陰道栓出現明顯的當天確定為妊娠第1天,妊娠加力組大鼠懷孕第1天兩種植體支抗之間鎳鈦彈簧加輕力60 g,妊娠鼠單籠飼養(yǎng)，正常組于同一天加力60 g，妊娠組不加力記錄每只大鼠懷孕的日期，于懷孕第21天處死大鼠。處死大鼠時，均先打開腹腔見到多只即將分娩的小鼠，確定建模成功后，進行大鼠腹主動脈取血，監(jiān)測大鼠建模前、后雌激素及孕激素的變化。

1.3 檢查項目

1.3.1 雌激素、孕激素測定 在兩組大鼠妊娠21 d后分娩之前，以10%水合氯醛(3 mL/kg)腹腔注射麻醉，行腹主動脈穿刺取血，處死大鼠，采用放射免疫法(RIA)對雌激素、孕激素進行定量研究，觀察雌激素、孕激素的變化規(guī)律。

1.3.2 骨密度測定 待大鼠妊娠21 d后，以10%水合氯醛(3 mL/kg)腹腔注射全身麻醉，麻醉后固定，利用雙能X線骨密度儀掃描檢測大鼠右側脛骨骨密度值。

圖1 微種植體骨內X線片

圖2 鎳鈦彈簧加力

2 結 果

2.1 一般情況檢查結果 適應性喂養(yǎng)大鼠期間其精神狀態(tài)良好，植入種植體2周后，兩組大鼠微種植支抗均保持良好的穩(wěn)定性，部分軟組織出現輕微紅腫現象，1只大鼠傷口出現化膿，待行簡單清創(chuàng)縫合之后，化膿現象得到明顯改善。妊娠組、妊娠加力組大鼠進食、飲水量較正常大鼠明顯增加，體質量在妊娠最后1周出現明顯增加，日常活動明顯減少，不如正常大鼠活躍。

2.2 各組雌激素、孕激素測定結果比較 見表1。妊娠組、妊娠加力組雌激素水平較正常組升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，孕激素水平較正常組有大幅度提升，并在分娩之前達到峰值，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；妊娠組、妊娠加力組雌激素、孕激素測定差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表1 各組大鼠雌激素、孕激素水平變化±s)

注：與正常組比較，*P<0.05；與妊娠組比較，△P<0.05。

2.3 加力前、后骨密度測定結果比較 正常組大鼠脛骨骨密度(0.240 2±0.001 1)g/cm2,妊娠組大鼠脛骨骨密度(0.197 0±0.004 6)g/cm2,妊娠加力組大鼠脛骨骨密度(0.188 6±0.002 2)g/cm2,正常組與妊娠組大鼠脛骨骨密度比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，正常組與妊娠加力組大鼠脛骨骨密度比較，差異也有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，妊娠組與妊娠加力組大鼠脛骨骨密度比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3 討 論

由于Wistar大鼠雌激素、孕激素的變化規(guī)律與人類妊娠期間是相似的，所以本研究選擇Wistar大鼠作為研究對象。兩種激素對維持妊娠有非常重要的作用，同時對骨代謝也有非常重要的影響。婦女在妊娠期間骨礦物質需要量大增，特別是對鈣的需求，但可以依靠自身多種調節(jié)機制來維持成骨與破骨之間的平衡，Seifer-Klauss等[1]報道，雌激素、孕激素共同作用可以增加骨質疏松患者的骨密度。雌激素可促進維生素D生成并增加其活性，提高維生素D的水平，可使腸鈣吸收增加，保持鈣平衡[2]。1988年Komm等[3]在成骨細胞上發(fā)現了雌激素受體，明確了雌激素對骨細胞的直接作用。1990年Pensler等[4]又在破骨細胞上發(fā)現了雌激素受體，更加明確了雌激素與骨細胞的直接作用關系。骨細胞胞漿中有糖皮質激素受體及黃體酮受體，糖皮質激素可引起骨形成下降，破骨細胞數量增加，黃體酮可競爭性結合糖皮質激素受體，從而起拮抗糖皮質激素的作用，并通過糖皮質激素受體的介導而影響成骨細胞[5]。孕激素可刺激降鈣素分泌，繼而抑制破骨細胞活性，最終減少骨吸收[6]。說明雌激素、孕激素可以共同起到促進成骨、抑制破骨的作用。

隨著孕周的延長，母體為了適應胎兒生長發(fā)育的需要，鈣的需求量日益增加。母體鈣主動經胎盤轉運給胎兒，加之孕婦循環(huán)血量的增加，孕婦若沒有補充足夠的鈣，就會表現為低血鈣。說明妊娠期間孕婦鈣的需求量明顯增加而攝入量不足是骨中礦物質丟失的主要因素，也是孕期骨密度下降的主要原因[7]。Gambacciani等[8]報道顯示，孕周與骨密度呈明顯負相關，孕期骨密度明顯下降,于妊娠末期下降最為明顯。Moya等[9]就曾報道過妊娠引起的暫時性骨質疏松癥。有文獻顯示妊娠期骨量減少,骨密度下降可表現為骨軟化癥、骨質疏松癥和暫時性骨質疏松癥等3種形式。

本研究結果顯示，種植體植入后，雌激素在大鼠處女期水平較低,妊娠期處于較高水平,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。孕激素在大鼠處女期水平較低，妊娠期處于較高水平,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。骨密度在妊娠期間較正常組稍有下降，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。這一結果與沒有植入種植體支抗的大鼠，兩種激素水平變化趨勢大致相似。說明妊娠期間加60 g的正畸輕力進行矯正，雌激素、孕激素水平會稍有下降，可能影響孕婦的身體健康和對胎兒產生不良影響[10]。同時研究中發(fā)現加力的刺激雖然引起了大鼠血清雌激素、孕激素波動，但在本研究中也觀察到大鼠的妊娠仍然得以持續(xù)，無流產現象，說明機體的適應代償能力是較強的，也說明研究中所用力值是大鼠機體所能承受的。

總之，雌激素、孕激素在孕婦懷孕期間可以維持成骨與破骨之間的平衡,對維持妊娠起重要作用。同時本研究以建立妊娠大鼠模型為基準，同時在動物試驗中模擬了臨床一部分患者在做正畸治療期間懷孕的情況，所以本研究結果對在矯正期間妊娠患者有一定的臨床指導意義。本研究的改善DPN的臨床癥狀[9]。

本研究結果顯示，治療組能夠顯著改善DPN患者的臨床療效，治療總有效率達84%。治療組周圍神經傳導速度較對照組顯著提高，這可能與空氣波壓力治療改善血液循環(huán)，減輕組織水腫，加強下肢氧合度并加速炎癥致痛物質的代謝，改善周圍神經營養(yǎng)狀況有關[10]。總之，空氣波壓力治療儀聯(lián)合α-硫辛酸及護理干預治療DPN臨床療效顯著，安全性較好，值得推廣。

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Effect of micro implant anchorage loading on estrogen and progesterone in pregant rat

DUWei,ZHANGBin△,WENLi-ming,LIJin-yuan

(DepartmentofStomatologyCollege,HebeiUnitedUniversity,Tangshan,Hebei063000,China)

Objective To establish the pregnant rat model for investigating the effect of the orthodontic micro implant anchorage loading on estrogen and progesterone.Methods 30 female rats were randomly divided into three groups:the normal group,pregnancy group and pregnancy loading group.The left tibia was implanted by 2 micro implants.The levels of estrogen and progesterone were detected by collecting blood sample via abdominal aorta，and at the same time the right tibia bone mineral density was detected.Results The estrogen level in the pregnancy group and the pregnancy loading group were higher than that in the normal group with statistical difference(P<0.05),while the progesterone level was higher than that in the normal group,the difference was statistically significant(P<0.05).The bone mineral density in the pregnancy group was lower than that in the noma group(P<0.05).Conclusion When exerting 60g orthodontic light force during pregnant period，the levels of estrogen and progesterone in rats will decrease.The bone mineral density decreased during pregnant period.

pregnancy rats； micro implant anchorage； estrogen； progesterone； bone mineral density

杜偉，女，碩士，住院醫(yī)師，主要從事口腔正畸學研究。

△通訊作者，E-mail：zhangbin3065@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.09.031

A

1672-9455(2015)09-1259-02

2014-11-28

2015-01-22)