李彥博, 李　新, 譚爰麗, 吳德兵, 洪　莉

(武漢大學人民醫(yī)院 婦產科, 湖北 武漢, 430060)

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神經生長因子的分布情況與子宮內膜異位癥疼痛的相關性研究

李彥博, 李新, 譚爰麗, 吳德兵, 洪莉

(武漢大學人民醫(yī)院 婦產科, 湖北 武漢, 430060)

摘要:目的分析患有子宮腺肌病的患者異位和在位2種情況時內膜組織表達神經生長因子的水平的影響，分析子宮內異癥患者與正常子宮內膜的患者之間的區(qū)別，以及這種區(qū)別與痛經的關系。方法收集本院從2014年1月—2014年12月期間收治的患有子宮肌病的患者22例為實驗組。選取同期行絕育術者或子宮肌瘤但子宮內膜正常增殖的患者22例作為對照組。運用免疫組化法檢測各個研究對象的神經生長因子表達水平。結果 對照組患者子宮內膜的神經生長因子水平低于子宮內異癥患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05); 子宮腺肌病患者中神經生長因子的表達高于在子宮內異癥患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05); EMT中度疼痛組和輕度疼痛組的OD值和PGP 9.5的密度明顯低于重度疼痛組(P<0.01)。結論子宮內膜中神經生長因子的含量可能可以作為檢測患者是否患有子宮內異癥的理論依據，也可以作為分析子宮內異癥患者的治療情況提供有利依據。

關鍵詞:子宮內膜異位癥; 神經生長因子; 痛經

子宮內膜異位癥(EMT)簡稱內異癥，主要癥狀為不孕、持續(xù)性疼痛以及盆腔粘連等，發(fā)病率達到了10%～15%。該疾病使患者的生活質量明顯下降，但病理上這種疾病呈現(xiàn)一種良性改變。目前認為，子宮內膜異位癥造成的疼痛與很多因素有關，但具體的影響因素目前尚無相關報道。就目前的研究而言，影響子宮內膜異位癥患者疼痛程度的一個重要因素可能是神經生長因子(NGF)的異常表達，其有可能是引發(fā)子宮內膜異位癥的原因之一。P物質、神經微絲蛋白以及降鈣素基因相關肽的表達與調控都與疼痛介質神經生長因子有關，且神經生長因子還可以增加感覺神經元的數量。此外，神經生長因子還是一種疼痛介質，參與了炎癥性疼痛以及痛覺過敏的過程。本實驗主要檢測了神經生長因子分布情況與疼痛的關系，根據疼痛以及子宮內膜異位癥與神經生長因子分泌的關系。同時，比較正?；颊吲c子宮內膜異位癥患者的神經生長因子含量，分析其與內異癥以及其與疼痛的關系。

1資料與方法

選取2014年1月—12月本院非子宮內膜疾病22例患者作為對照組，包括絕育手術者或者子宮肌瘤者，行子宮肌瘤切除術并且刮宮或者子宮全切患者，經病理證實子宮內膜正常的患者。選取同時期本院行經腹腔鏡或者經腹手術且刮宮，病理檢驗證實為子宮內膜異位癥的患者22例作為實驗組。所有參與患者年齡30～60歲，月經規(guī)律，臨床資料齊全。所有患者必須未經過放療、化療以及服用過激素類藥物，無代謝性、炎癥型、免疫型以及內分泌型疾病，沒有進行過宮內放置宮內絕育器材，術前6個月內無哺乳以及妊娠史。實驗前已簽署同意書。

在手術過程中獲取的新鮮組織標本，再用10%甲醛固定，進行常規(guī)脫水，然后進行石蠟包埋，再用切片機進行連續(xù)切片，厚度均為4 pm, 小心放置，備用。各組使用免疫組化的方法測量各組研究對象中神經生長因子的含量，主要步驟按照試劑盒上的說明進行。

2結果

2.1　對照組與子宮內膜異位癥組患者體內NGF、PGP 9.5的表達水平比較

對照組患者與子宮內膜異位癥組患者體內NGF的表達水平比較結果顯示，NGF在2種情況下的表達是有差異的，且NGF在子宮內膜異位癥組患者體內的表達比在對照組患者體內表達水平高(P<0.05)。對照組患者的神經生長因子水平略低于腺肌病在位內膜組以及異位內膜組患者，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。PGP 9.5在2種情況下的表達是有差異的，且PGP 9.5在子宮內膜異位癥組患者體內的表達高于對照組(P<0.01)。對照組PGP 9.5水平略低于腺肌病異位內膜組以及在位內膜組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。見表1。

表1　對照組與子宮內膜異位癥組患者體內NGF、

2.2　神經生長因子與子宮內膜異位癥患者的疼痛關系

EMT輕度和中度疼痛組的NGF的OD值明顯低于重癥疼痛組。NGF本身在子宮內膜異位癥患者的體內高度表達，且隨著痛經評分的升高，NGF的表達量呈現(xiàn)更加明顯的增加趨勢。Pearson相關分析顯示，MoD值與痛經評分之間存在著顯著的正相關關系(P<0.001)。

3討論

子宮內膜異位癥目前在中國的發(fā)病率逐年上升，在普通婦科手術中占據30%以上[1]。子宮內膜異位癥會引起很多不適癥狀，如下腹痛、痛經以及性交痛等，極大地影響了女性的生活，且也已經成為了不育癥的病因之一[2]。內異癥目前的發(fā)病機制尚未研究清楚，它形態(tài)多樣，病情復雜，且常有復發(fā)，轉移以及浸潤的可能性，已經成為當今婦科的一個難治之癥以及成為了研究的熱點[3]。目前來看，對內異癥發(fā)病機制的說法很多，其中的主導理論是內膜細胞隨著經血逆流種植，而其中的關鍵問題在于對模型的建立以及科學的解釋。一種常見的生理現(xiàn)象其實就是經血逆流，不過許多經血逆流的人并沒有患上子宮內膜異位癥[4]?，F(xiàn)在對于子宮內膜異位癥新概念主要是內異癥是指內膜細胞異位發(fā)育、生長和出血時引發(fā)的癥狀。其實，內膜細胞的逆流也需要一定的條件，主要有以下4個方面[5]: ① 進入腹腔的內膜細胞需經輸卵管; ② 細胞碎片在經血中必須是活的; ③ 內膜細胞被移植到盆腔組織后要有一定的貼服力，以便貼在腔壁上; ④ 內異癥在盆腔的分布和脫落細胞的種植。因此，到達盆腔的內膜細胞要經過3道防線，在這一復雜的過程中，局部環(huán)境的多種酶、雌激素以及細胞因子都起到了非常重要的作用。非內異癥患者與內異癥患者的主要差異體現(xiàn)在在位內膜的生物以及分子特質的差異，這些差異都可以追溯到基因的差異上。這些理論可以很好的解釋內異癥的遺傳性以及家族傾向的原因，可以作為內異癥基因治療的基礎。

發(fā)病機制的新靶點是研究子宮在位內膜的新靶點[6]。對逆流到異地內膜的細胞的命運起到決定作用的是在位內膜的分子生物學、生物化學、遺傳學等以及組織 病理學等特征，即在位內膜決定論。它相對比較全面的詮釋、解釋以及修正了以往的學說，提出了新的解決問題的思路。以往的學說，比如Sampson學說，無法解釋某些重要部位的內異癥的發(fā)生機制，如副中腎管或體腔上皮化生假說則可以的解釋陰道直腸內異癥、子宮腺肌癥、胸腔等部位的內異癥發(fā)生機制。

內異癥的臨床病變以及臨床病理分類具有廣泛性的特點，部位分布呈彌漫性，病理分類表現(xiàn)出多形性[7]。近年來的研究[8]表明，其可以分為4種類型: ① 深部浸潤型(DIE); ② 腹膜型; ③ 卵巢型; ④ 特殊部位型。不同的組織其病理特征、治療發(fā)難都具有很大的差別。所以，內異癥是一種可以再細分的疾病。腹膜內異癥 (PEM)的表現(xiàn)具有明顯的階段性，從紅色、黑色到白色病變。這個步驟是內異癥換雜合病理組織變換的生物活性變化結果以及病理組織學變化結果。深部浸潤型(DIE)主要表現(xiàn)為苗勒管殘余性化生，已有活性的間質以及內膜腺體的基礎上，平滑肌纖維化或者增生后就成為子宮腺肌癥樣的結節(jié)，但其與腹膜內異癥時累及子宮直腸窩是很不同的。對內異癥的分期一直存在著爭議，內異癥分期評分法 (R-AFS)分期具有潛在的觀察誤差以及主觀誤差且對生育的估計存在一定的局限性。所以，完善分期，對內異癥的治療以及預后都是一個重要的問題[9]。目前，比較權威的內異癥診斷的金標準是腹腔鏡檢查，但是對所有可疑的內異癥患者都實行也不是一個十分可取的方法。所以今后的主要方向就是尋找敏感性和特異性均好的標志物[10]。加拿大對患者的子宮內膜、血清等多種特異性因子進行了綜合測評，推出了一種新的實驗方式，通過這種方式測得的子宮內膜異位癥的患者其陽性率是95%，陰性率是75%。參照國外的情況，根據中國的情況，新的診斷模式可以是分析以下的5種檢驗指標[11]: ① 不育：繼發(fā)性或者是原發(fā)性不育，特別是繼發(fā)性; ② 有性交痛、痛經、慢性盆腔疼痛或下腹痛; ③ B超聲掃描，結果中附件區(qū)不存在壁厚、內部點狀增強回聲、附件區(qū)無回聲以及界限不清等情況; ④ 盆腔檢查無直腸窩結節(jié)、觸 痛、附件包塊等; ⑤ 血清CA125水平在50到80 kIU/L[12]。

子宮內膜異位癥時疼痛也是本病的主要癥狀之一，但病灶大小不一定與經期疼痛的程度呈正比[13]，卵巢異位囊腫、粘連嚴重的患者可能并不表現(xiàn)出疼痛[14], 但是散在于盆腔內的小的病灶確可以引起劇烈疼痛。少數患者經歷長期的下腹痛，經期疼痛異常加劇。今年來的研究還未對繼發(fā)性疼經的發(fā)病機制研究明確，但是可以造成血管攣縮、子宮平滑肌過強收縮、繼發(fā)子宮缺血、缺氧的物質是前列腺素含量的異常增高[15]。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，正常患者的子宮內膜和子宮內膜異位癥的患者的子宮內膜不一樣，其纖維分布尤其不同，EMT的發(fā)病很有可能就與這些纖維的不同有關。神經生長因子表達的異常增加被認為與子 宮內膜異位癥患者痛經的發(fā)生有關，進一步的研究發(fā)現(xiàn)，非EMT患者與EMT患者的在位內膜相比，神經纖維稀疏，且高表達p75NTR以及TrkA。這些物質在子宮內膜異位癥患者的病灶處的表達異常升高，足以說明痛覺過敏以及痛經都與其有一定的關系。神經生長因子是一種靶源性的神經營養(yǎng)因子，支持神經元的生長分化、存活以及功能的維持，在調整神經病理性疼痛的過程中起到了至關重要的作用。很多學者認為，子宮內膜異位癥患者的痛經與神經生長因子的異常表達增加密切相關。本研究通過對腺肌病患者內膜組織以及正?；颊邇饶そM織中神經生長因子的表達情況，以及它與痛經的關系，揭示了神經生長因子在子宮內膜異位癥的患者中與其痛經的發(fā)生、發(fā)展以及結局有著密不可分的關系。結果顯示，對照組患者的神經生長因子水平略低于腺肌病異位內膜組以及在位內膜組患者(P<0.05)。Pearson相關分析顯示，MoD值與痛經評分之間存在著顯著的正相關關系(P<0.001)。

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Research on the correlation between distribution of nerve growth factors and endometriosis pain

LI Yanbo, LI Xin, TAN Yuanli, WU Debing, HONG Li

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,ThePeople′sHospitalofWuhanUniversity,Wuhan,Hubei, 430060)

ABSTRACT:ObjectiveTo analyze the influence of the level of nerve growth factor in uterine adenomyosis patients and normal patients, to research the difference between them and to explore its relation with dysmenorrhea. MethodsA total of 22 uterine adenomyosis patients from January 2014 to December 2014 were selected as the experimental group and 22 patients with normal intrauterine membrane were selected as control group. The content of their nerve growth factor of these patients were detected. ResultsNerve growth factor levels in endometriosis patients were higher than those with normal endometrium(P<0.05). And the expression of nerve growth factor was higher than those with normal endometrium (P<0.05). The OD value and PGP 9.5 density in EMT medium pain group and mild pain group were lower than that in the server pain group (P<0.01). ConclusionThe occurrence of endometriosis may be associated with nerve growth factor, which is powerful evidence for the treatment of endometriosis.

KEYWORDS:endometriosis; nerve growth factor; dysmenorrhea

基金項目:湖北省自然科學基金(ZRY1153)

收稿日期:2015-04-26

中圖分類號:R 473.71

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)17-045-03

DOI:10.7619/jcmp.201517014